背景及概述^[1][2]

依克立達(dá)鹽酸鹽的游離堿依克立達(dá)是第三代P-蛋白抑制劑， 能夠抑制ABC轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白AB-CB1和ABCG2。

制劑^[1-3]

陳大中等人建立了藥物測定方法,并制備共載阿霉素和依克立達(dá)的PLGA納米粒。方法：利用紫外分光光度法(UV)和高效液相色譜法(HPLC)分別建立阿霉素和依克立達(dá)的測定方法;采用納米沉淀法制備共載納米粒,通過調(diào)節(jié)兩藥的投藥比,優(yōu)化處方,考察納米粒的粒徑、形態(tài)、包封率、載藥量以及體外釋放。

結(jié)果：阿霉素在1~40μg/ml濃度范圍內(nèi)線性關(guān)系良好,標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸方程為A=0.021C+0.002,r=0.999 5;依克立達(dá)在0.5~100μg/ml濃度范圍內(nèi)線性關(guān)系良好,標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸方程為A=120 742.462 6C+1 974.570 4,r=1.000 0;通過處方優(yōu)化,共載納米粒的粒徑約為50nm,分布均一,呈圓形,阿霉素和依克立達(dá)的包封率分別為56.58%、51.66%,載藥量分別為1.48%、1.85%,兩藥摩爾比約為1∶1;體外釋放緩慢。結(jié)論分別建立了方便快捷、結(jié)果準(zhǔn)確、重復(fù)性好的阿霉素和依克立達(dá)的檢測方法,并且制備了分散性好、粒徑較小的納米粒,為后續(xù)實(shí)驗(yàn)提供基礎(chǔ)。

合成^[4]

在步驟1中，通過在乙醇中攪拌，然后加熱回流至少0.5小時， 優(yōu)選1小時2-氨基-3-甲氧基苯甲酸(IIa)、2-溴苯甲酸(IIb)、碳酸鉀和 銅粉形成的混懸液而得到式(IIc)的甲氧基二酸。將該混懸液冷卻至 20-25℃，加入水。加入助濾劑，過濾該混合液。將濾床用水洗滌， 用大約30分鐘通過加入濃鹽酸將合并的濾液調(diào)節(jié)至pH2-3。然后在 10-12℃下，在反應(yīng)器中將得到的混懸液老化至少1小時，過濾收集 固體產(chǎn)物，用水洗滌，在50℃下真空干燥。

在步驟2中，將步驟1中形成的式(IIc)甲氧基二酸與乙腈混合， 加熱回流，然后用2小時滴加三氯氧化磷。將該混合液加熱回流至 少1小時，優(yōu)選2小時。然后將該混懸液冷卻至10-15℃。加入水， 將得到的稠漿狀液加熱回流2.5小時。然后將該漿狀液冷卻至10℃， 過濾。將產(chǎn)物，式(II)吖啶酮酸依次用水和乙腈洗滌，在50℃下真空干燥48小時。

在步驟3中，通過將式(IIIa)的4-硝基苯乙基溴、式(IIIb)的6，7- 二甲氧基-1，2，3，4-四氫異喹啉鹽酸鹽、無水碳酸鉀和碘化鉀在DMF 中混合得到式(IIIc)的該硝基苯乙基異喹啉。通氮?dú)狻嚢柘拢瑢⒃?混合液于70℃下加熱18小時。將該混合液冷卻至50℃，加入甲醇。 再將該混合液冷卻至30℃，然后加入水。在10℃下將該混合液攪拌 1小時，過濾，將該產(chǎn)物用水洗滌，在45℃下真空干燥。

在步驟4中，在15-20℃下，將在步驟3中形成的式(IIIc)的硝基 苯乙基異喹啉在乙醇和THF溶液中攪拌，通入氮?dú)猓尤隤d/C催化 劑。再通入氮?dú)夂螅Ｖ箶嚢?，向該混合液中通入氫氣。繼續(xù)攪拌， 并將該混合液保持在15-25℃下直至停止吸收氫氣。過濾該反應(yīng)混合 液，將濾器用THF漂洗，然后在55-65℃下將合并的濾液真空濃縮 至適當(dāng)?shù)捏w積。用20-40分鐘加入己烷，再將得到的漿狀液冷卻至0 ℃。0℃下攪拌1.5小時后，過濾該混懸液，將該固體用己烷洗滌，在40-45℃下真空干燥。得到的固體為式(III)的氨基苯乙基異喹啉。

在步驟5中，通氮?dú)庀?，將中間體化合物，式(II)吖啶 酮酸和式(III)的氨基苯乙基異喹啉混合物在DMF中攪拌直至約在10 分鐘內(nèi)完全溶解。加入肽偶合劑TBTU，再加入堿三乙胺。在20-25 ℃下，將該溶液攪拌1-2小時直至反應(yīng)完成。加入異丙醇和水的混合 液，在20-25℃下將該混合液攪拌30-60分鐘直至結(jié)晶出現(xiàn)。過濾得到的漿狀液，即式(IV)的MDRI游離堿，依次用甲醇和水洗滌，在高 至50℃的真空干燥箱中干燥。

然后通過在35-40℃下將該粗品MDRI游離堿溶于DMF中，然 后在35-40℃下用約4小時通過加入乙醇進(jìn)行重結(jié)晶。再將得到的漿狀液于10℃冷卻1小時，過濾。將該產(chǎn)物用甲醇洗滌，在高至50℃ 的真空干燥箱中干燥。

在步驟6中，將攪拌的式(1V)的MDRI游離堿的冰醋酸混懸液 加熱至65-70℃，將得到的溶液熱過濾。然后將該溶液再加熱至70℃，加入熱的、預(yù)過濾的乙醇。然后，用大約30分鐘加入預(yù)過濾的濃鹽 酸。在70℃下，將得到的溶液攪拌直至形成結(jié)晶，大約20分鐘，然 后用1小時冷卻至20-25℃，過濾。將得到的濾餅用乙醇洗滌，在65 ℃真空干燥箱中干燥至少70小時。

主要參考資料

[1]陳大中,高潔,解方園,張翮,魯瑩,鄒豪,鐘延強(qiáng).共載阿霉素和依克立達(dá)的PLGA納米粒的制備及表征[J].藥學(xué)實(shí)踐雜志,2017,35(03):219-223+251.

[2] 楊佳,程麗芳,程亮,宿露,陳大為.依克立達(dá)雙重敏感納米遞藥系統(tǒng)的構(gòu)建及其逆轉(zhuǎn)多藥耐藥的考察[J].中國醫(yī)藥工業(yè)雜志,2016,47(03):288-293.

[3] CN201610988454.3基于PAMAM的聯(lián)合攜載阿霉素及耐藥逆轉(zhuǎn)劑的納米遞送系統(tǒng)的制備方法

[4] (WO1998052923) SYNTHESIS OF ACRIDINE DERIVATIVE MULTIDRUG-RESISTANT INHIBITORS