鏈霉親和素（Streptavidin）是一種來源于阿維丁鏈霉菌（Streptomyces avidini）分子量約為66 kDa的四聚體蛋白。主要特點是每個亞基均可結合一個生物素分子，且該結合是高特異性以及超強非共價相互作用（Kd≈10^-15 M）。

應用

1. 蛋白質(zhì)和核酸的檢測與純化（如親和層析、Pull-down）

2. 免疫分析（如ELISA、Western blot）

3. 細胞和組織標記（原位雜交）

4. 藥物靶向遞送

5. 生物傳感器開發(fā)

應用示例

案例一：鏈霉親和素-生物素系統(tǒng)在ELISA檢測中的應用

操作步驟：

1.  包被抗體

將捕獲抗體稀釋后包被于ELISA板，4℃過夜。

2. 封閉

用含BSA的封閉液封閉非特異性結合位點，室溫1小時。

3. 加入待測樣品

孵育1-2小時，洗滌去除未結合物質(zhì)。

4. 加入生物素標記的檢測抗體

孵育1小時，洗滌。

5. 加入鏈霉親和素-HRP（辣根過氧化物酶）

孵育30分鐘，洗滌。

6. 顯色反應

加入TMB底物，顯色后加入終止液，測定OD值。

案例二：鏈霉親和素磁珠在蛋白質(zhì)純化中的應用

操作步驟：

1.  生物素標記抗體制備

將特異性抗體用生物素標記試劑標記。

2. 磁珠預處理

鏈霉親和素磁珠用PBS洗滌，去除保存液。

3. 抗體與磁珠結合

將生物素標記抗體與磁珠孵育30分鐘，形成磁珠-抗體復合物。

4. 樣品孵育

加入待純化蛋白樣品，孵育1小時。

5. 磁性分離

磁力架吸附磁珠，去除未結合蛋白。

6. 洗滌與洗脫

用洗滌液洗滌磁珠，最后用洗脫液洗脫目標蛋白。

7. 檢測

如SDS-PAGE等。