背景及概述[1]
氨基葡萄糖硫酸鉀鹽是一種氨基糖類化合物。氨基糖類通常作為復(fù)雜寡糖類和多糖類中的單糖殘基,氨基葡萄糖是單糖葡萄糖的氨基衍生物。氨基葡萄糖可以明顯緩解關(guān)節(jié)炎及風(fēng)濕病患者的疼痛及改善、預(yù)防、治療及修復(fù)結(jié)締組織損傷,對(duì)骨骼和關(guān)節(jié)炎發(fā)炎也有一定的療效,同時(shí)也有助于急性、慢性炎癥的愈合,因此對(duì)心臟病、肺炎也有一定的療效抑制癌細(xì)胞或纖維細(xì)胞的過度生長,對(duì)癌癥和惡性腫瘤起到抑制和治療作用。
制備[1-2]
報(bào)道一、
取1kg甲殼素粉末,往其中加入2.5L乳酸甘氨酸鹽酸鹽和0.85L質(zhì)量濃度為32%的鹽酸,在43℃條件下攪拌混合,再使用隔膜泵連續(xù)泵入微孔膜過濾器進(jìn)行過濾得濾液;所得濾液升溫至68℃,保溫并滴加質(zhì)量濃度為25%的鹽酸,攪拌15min,冷卻后加入活性炭脫色,濃縮,洗滌,干燥得氨基葡萄糖鹽酸鹽;往所得氨基葡萄糖鹽酸鹽中加入硫酸鉀水溶液,加熱至溫度為60℃,加入丙酮,降溫至30℃,攪拌15~20小時(shí),使物料充分反應(yīng);將反應(yīng)完成的物料降溫至-5℃,在攪拌條件下結(jié)晶,再離心得白色結(jié)晶體;將離心后的白色結(jié)晶體在溫度35℃~50℃的真空條件下烘干后得到氨基葡萄糖硫酸鉀鹽。通過HPLC法測定其含量,產(chǎn)率為87.7%,純度為99.98%,且在25℃,60%的相對(duì)濕度條件下放置12個(gè)月,仍保持穩(wěn)定,純度為99.97%。
報(bào)道二、
將大腸桿菌、枯草芽孢桿菌、葡萄球菌在平板培養(yǎng)基上活化培養(yǎng)6h,控制培養(yǎng)溫度37℃,搖床速度200rpm;將培養(yǎng)的大腸桿菌、釀酒酵母、葡萄球菌按照體積比3:1:0.8混合后接種在種子培養(yǎng)基中活化培養(yǎng),控制培養(yǎng)溫度37℃,搖床速度230rpm,培養(yǎng)時(shí)間為12h,用氨水調(diào)節(jié)pH值6.9;將混合發(fā)酵劑按照10%接種量接種至含有葡萄糖和氮源的發(fā)酵培養(yǎng)基中在發(fā)酵罐中進(jìn)行發(fā)酵培養(yǎng),培養(yǎng)溫度為37℃,搖床速度230rpm,培養(yǎng)時(shí)間為40h,用氨水調(diào)節(jié)pH值6.9,得到含有氨基葡萄糖的發(fā)酵液,整個(gè)發(fā)酵過程控制葡萄糖補(bǔ)料速度為4L/h;發(fā)酵液離心分離,去除菌體,收集上清液,向上清液中加入30%鹽酸進(jìn)行水解得水解液;水解液在80℃、真空度-0.07MPa下真空濃縮,回收鹽酸;將濃縮液降溫至10℃,在50rpm速度攪拌下結(jié)晶6h,沉淀4h后,離心分離得氨基葡萄糖鹽酸鹽粗品,離心所得母液加入濃鹽酸用于飛機(jī)熬夜?jié)饪s液水解;所得粗產(chǎn)品用水溶解,水溶液經(jīng)預(yù)處理過的732陽離子交換柱層析,水溶液通過柱床流速為3ml·cm-2·min-1,用水洗脫,用5%AgNO3溶液檢測直至無氯離子,減壓濃縮,采用95%乙醇溶液進(jìn)行重結(jié)晶得氨基葡萄糖鹽酸鹽;用過的樹脂床用95%的乙醇洗脫即可再生;將氨基葡萄糖鹽酸鹽溶解在水中,在攪拌條件下加入硫酸鉀,硫酸鉀、氨基葡萄糖鹽酸鹽、水的質(zhì)量比為1:2:10,在40℃攪拌60min,反應(yīng)產(chǎn)物在真空下-35℃冷凍干燥得氨基葡萄糖硫酸鉀鹽,純度為98.3%。
參考文獻(xiàn)
[1] [中國發(fā)明,中國發(fā)明授權(quán)] CN201911084802.4 一種氨基葡萄糖硫酸鉀鹽的制備方法
[2] [中國發(fā)明] CN201911210934.7 微生物發(fā)酵生產(chǎn)氨基葡萄糖硫酸鉀鹽的方法