鹽酸替羅非班為一高效可逆性非肽類血小板表面糖蛋白(GPⅡb/MIa)受體拮抗劑,可阻止纖維蛋白原與糖蛋白IIb/Ia受體結(jié)合,從而阻斷血小板的交聯(lián)及血小板的聚集,是一種很有發(fā)展前途的抗血小板藥,臨床上與肝素聯(lián)用,療效確切,安全性好。該藥原料及制劑在國內(nèi)已有上市，但《中華人民共和國藥典》尚未收載。L-N-丁基磺酰-P-羥基苯丙胺是鹽酸替羅非班降解生成的一種雜質(zhì)，本文以鹽酸替羅非班注射液為研究對象,依據(jù)鹽酸替羅非班注射液進(jìn)口注冊標(biāo)準(zhǔn)(JX20080265)和分析方法研究指導(dǎo)原則等,對鹽酸替羅非班注射液中一個關(guān)鍵雜質(zhì)L-N-丁基磺酰-P-羥基苯丙胺開展研究,建立了相應(yīng)的分析方法,為鹽酸替羅非班注射液的質(zhì)量控制提供有效保障,以達(dá)到與原研安全一致。

檢測方法^[1]

1、色譜條件

色譜柱(YMC-Triart C18 4.6mmx250 mm,5 pum);流動相:0.01mol/L磷酸二氫鉀溶液(磷酸調(diào)節(jié)pH值2.3)-乙腈(70:30,體積比),等度洗脫;流速1mL/min;檢測波長227nm;進(jìn)樣量50uL。操作方法:按照《中華人民共和國藥典》2020年版四部通則(0512)檢測。

2、流動相選擇

系統(tǒng)適用性溶液:取鹽酸替羅非班對照品與雜質(zhì)A對照品適量,分別精密稱定,加水稀釋溶解并制成每1mL中約含替羅非班25ug,L-N-丁基磺酰-P-羥基苯丙胺0.5ug的混合溶液;精密量取本品適量,用水稀釋制成每1mL中約含替羅非班25ug的溶液,作為供試品溶液。采用進(jìn)口注冊標(biāo)準(zhǔn)(JX20080265)中的流動相檢測進(jìn)樣供試品溶液,發(fā)現(xiàn)用不同品牌的C18色譜柱,主成分均在50min以后出峰,出峰時間較晚。因此,選擇合適的色譜柱,調(diào)整流動相比例,最終確定流動相的比例為70:30,其它色譜條件不變。確定流動相比例之后,通過等度洗脫進(jìn)樣系統(tǒng)適用性溶液,主成分出峰時間合適,L-N-丁基磺酰-P-羥基苯丙胺和主峰的分離度符合規(guī)定。主峰保留時間為13.057min,雜質(zhì)L-N-丁基磺酰-P-羥基苯丙胺為11.204min,分離度符合檢測要求。

3、波長選擇

通過二極管陣列檢測器對主成分和已知雜質(zhì)進(jìn)行考察,發(fā)現(xiàn)主成分和已知雜質(zhì)L-N-丁基磺酰-P-羥基苯丙胺均在227nm處有最大吸收,且輔料在此波長處無干擾,因此,采用227nm為檢測波長。

參考文獻(xiàn)

[1]崔芹芹,李發(fā)成,張貴民. 鹽酸替羅非班注射液中雜質(zhì)A分析方法的建立[J]. 山東化工,2022,51(11):142-146. DOI:10.3969/j.issn.1008-021X.2022.11.043.