背景[1-3]
丁?；o酶A合成酶3抗體是一類可以特異性結合丁?；o酶A合成酶3的多克隆抗體，主要用于體外檢測丁?；o酶A合成酶3的免疫學實驗。
?；o酶A acyl－CoA為脂肪酸與輔酶A的硫醇脂化合物（RCO－CoA）。是脂肪酸合成和分解的活性代謝中間物，水解時生成脂肪酸和輔酶A。另外在脂肪酸和輔酶A合成時消耗ATP。
輔酶A（coenzyme A），是一種輔酶，值得注意的是其在合成和氧化脂肪酸的角色，和在三羧酸循環(huán)中氧化丙酮酸。所有基因組測序日期編碼的酶，即利用輔酶A作為底物，并在4%左右的細胞酶中使用（或硫酯，例如乙酰-CoA）作為基材。在人類中，輔酶A生物合成需要半胱氨酸、泛酸和三磷酸腺苷（ATP）。主要參與脂肪酸以及丙酮酸的代謝。
輔酶A系自鮮酵母中提取而得，為體內乙酰反應的輔酶，可與乙酸鹽結合成為乙酰輔酶A，進入氧化過程，對糖、蛋白質及脂肪的代謝有重要作用；體內三羧酸循環(huán)、乙酰膽堿的合成、肝糖原的儲存、膽固醇量的降低及血漿脂肪含量的調節(jié)等，均與輔酶A有密切關系。
應用[4][5]
用于椰肉發(fā)育過程中差異表達基因的分離和功能注釋研究
利用SSH法構建了四個SSH文庫,并利用Blast2GO軟件對這些差異表達序列進行了功能注釋。
結果表明：在隨機選擇的1272個序列的克?。總€文庫約300個克?。┲?有63%的序列與數據庫中已知的蛋白質功能類似。通過對文庫中階段特異性表達的序列的GO（gene ontology）id比較分析,篩選得到了6個在椰肉發(fā)育過程中持續(xù)上調的基因,28個持續(xù)下調的基因,28個先短暫性的上調后下調以及9個先短暫性下調然后上調的基因。
以KEGG（Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes）數據庫為背景分析發(fā)現差異表達基因中有溶血磷脂酸?；D移酶（LPAAT）、磷脂酶D、乙酰輔酶A羧化酶羧羥基轉移酶、3-羥基異丁?；o酶A水解酶和丙酮酸脫氫酶與脂肪酸的合成和分解代謝途徑有關；磷酸丙糖異構酶、纖維素合成酶和1,3-β葡聚糖苷酶與糖代謝途徑相關；另外,磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶（PEPC）既與脂肪酸代謝有關又與糖代謝相關。
從獲得的737個非冗余基因中選擇了103個階段特異性表達的基因進行熒光定量PCR的驗證。結果顯示：SSH文庫所得到的序列有效性高達66.6%。綜上所述,本研究通過SSH文庫構建和生物信息學分析的方法獲得了一系列與椰肉發(fā)育過程中組織發(fā)育、脂肪酸代謝、糖代謝和次生代謝相關的功能基因。
研究的進行將更好地揭示椰肉發(fā)育的調控方式,為最終克隆影響椰肉發(fā)育及物質代謝的關鍵基因,并從分子水平上改良果實發(fā)育和成熟特性提供更可靠的理論依據。同時,獲得的椰子胚乳組織特異表達基因將為其它物種果實品質的改良提供參考資源。
參考文獻
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[2]Photosynthesis and carbon partitioning in transgenic tobacco plants deficient in leaf cytosolic pyruvate kinase.Grodzinski,Jiao,Knowles,Plaxton.Plant Physiology.1999
[3]Production of medium chain saturated fatty acids with enhanced antimicrobial activity from crude coconut fat by solid state cultivation of Yarrowia lipolytica.Parfene Georgiana,Horincar Vicentiu,Tyagi Amit Kumar,Malik Anushree,Bahrim Gabriela.Food Chemistry.2012
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[5]梁遠學.椰肉發(fā)育過程中差異表達基因的分離和功能注釋[D].海南大學,2014.