4-氯丙酸是一種無色透明液體，在原料藥合成過程中，它是最為常用的醫(yī)藥方面的中間體之一。近年來，原料藥中基因毒雜質(zhì)研究要求的提高，使得如4?氯丁酸等物質(zhì)被確定為基因毒雜質(zhì)，成為原料藥檢測中必需研究內(nèi)容?；蚨拘噪s質(zhì)來源于原料藥合成過程中的起始物料、中間體、試劑和反應(yīng)副產(chǎn)物，也可能是由藥物在合成、儲存或者制劑過程中降解產(chǎn)生的。其特點(diǎn)是在低濃度時即可造成人體遺傳物質(zhì)的損傷，進(jìn)而導(dǎo)致基因突變并可能促使腫瘤發(fā)生，對人體用藥安全性產(chǎn)生威脅。在現(xiàn)有的藥品質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)中，需進(jìn)行嚴(yán)格控制。

制備方法

將86g的γ-丁內(nèi)酯投入燒瓶中,保持室溫常壓攪拌。加入5g的硅鎢酸投入燒瓶中，保持室溫常壓攪拌均勻。緩慢滴加200g的20%鹽酸,攪拌反應(yīng)2h。取樣GC分析，γ-丁內(nèi)酯殘留小于1%，4-氯丙酸含量達(dá)到99%以上。靜置分層，收集下層產(chǎn)品，上層水相重復(fù)套用[1]。

檢測方法

將待測樣品中的4-氯丙酸衍生為4-氯丙酸酯；其中，氣相色譜檢測的條件包括：色譜柱，選用5％苯基?95％?二甲基聚硅氧烷共聚物固定液色譜柱。將待測樣品中的4-氯丙酸衍生為4-氯丙酸甲酯或4-氯丙酸乙酯，具體可使用甲醇或乙醇進(jìn)行衍生。使用甲醇進(jìn)行衍生，能夠兼顧衍生反應(yīng)和樣品的溶解性。以上衍生反應(yīng)在硫酸的催化作用下進(jìn)行。該衍生反應(yīng)可在室溫下即可進(jìn)行，無需加熱等特殊反應(yīng)條件。

以甲醇衍生檢測4-氯丙酸為例，進(jìn)行具體試驗(yàn)。(1)4?氯丁酸衍生條件和初步檢測儀器條件溶劑：甲醇；4-氯丙酸貯備液：取4-氯丙酸約24mg，精密稱定，置100ml量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻即得0.24mg/ml貯備液。6μg/ml 4-氯丙酸溶液：精密量取0.24mg/ml 4-氯丙酸貯備液5ml置200ml量瓶，用甲醇稀釋至刻度，搖勻即得。取5ml置20ml頂空瓶中，滴加50μl硫酸，壓蓋密封，進(jìn)樣分析。檢測方法如下：依次在樣品盤中排列甲醇，6μg/ml 4-氯丙酸溶液，參照下表中儀器條件，衍生后進(jìn)樣檢測[2]。

參考文獻(xiàn)

[1]大豐躍龍化學(xué)有限公司.一種合成γ-氯代丁酸的方法 :CN201811120274.9[P]. 2019.01.25.

[2]北京諾康達(dá)醫(yī)藥科技股份有限公司. 4-氯丁酸的檢測方法:CN202110199000.9[P]. 2021-06-22.