背景[1-3]
沙門、志賀菌屬瓊脂(SS)對照培養(yǎng)基用于沙門氏菌，志賀氏菌的選擇性分離培養(yǎng)。
沙門志賀菌屬瓊脂培養(yǎng)基(SS)成分（g/L）：牛肉粉5.0g；示月胨5.0g；乳糖10.0g；3號膽鹽8.5g；枸櫞酸鈉8.5g；硫代硫suan鈉8.5g；枸櫞酸鐵1.0g；中性紅0.025g；煌綠0.00033g；瓊脂17.0g；PH值6.9-7.1。
沙門、志賀菌屬瓊脂(SS)對照培養(yǎng)基
沙門志賀菌屬瓊脂培養(yǎng)基(SS)用法：
稱取本品63.53克，溶解于1000ml蒸餾水中，加熱煮至沸，不必高壓蒸汽滅菌，冷至45-50℃倒成平板。
志賀氏菌在SS培養(yǎng)基上為比較透明、直徑1mm左右、表面光滑、圓形的較小菌落。進(jìn)一步確認(rèn)需要確證還需要做生化試驗(yàn)及血清凝集測定。
倒平皿（以最常用的直徑為90毫米的培養(yǎng)皿來說）時(shí)倒15毫升左右,不需要太準(zhǔn)確。但方便觀察溶血環(huán)厚度在大約3、4毫米。
沙門菌屬體型大多為（0.7～1.5）μm×（2.0～5.0）μm，其無芽胞，是無莢膜的革蘭陰性直桿菌，除雞沙門菌外都有周身鞭毛，能運(yùn)動，多數(shù)有菌毛。
志賀氏菌屬（Shigella Castellani）是一類革蘭氏陰性短小桿菌，是人類細(xì)菌性痢疾最為常見的病原菌，主要流行于發(fā)展中國家，通稱痢疾桿菌，耐寒，能在普通瓊脂培養(yǎng)基上經(jīng)過24小時(shí)生長，形成直徑達(dá)2mm大小、半透明的光滑型菌落。無芽胞，無莢膜，無鞭毛，多數(shù)有菌毛。
應(yīng)用[4][5]
用于雞糞中多重耐藥細(xì)菌的分離鑒定及介導(dǎo)抗性基因水平轉(zhuǎn)移元件的檢測研究
圍繞質(zhì)粒在環(huán)境抗生素抗性基因水平傳播中所起的作用進(jìn)行以下幾方面的研究:一、雞糞中多重耐藥細(xì)菌的分離鑒定及抗性檢測。用含有慶大霉素、氯霉素、阿莫西林、頭孢氨芐、環(huán)丙沙星、四環(huán)素、紅霉素、卡那霉素這八種抗生素的培養(yǎng)基（LB培養(yǎng)基、SS培養(yǎng)基）,從一規(guī)模化養(yǎng)雞場的雞糞中篩選出35株多重耐藥細(xì)菌。這些多重耐藥細(xì)菌分布在13個(gè)不同的屬,以革蘭氏陰性細(xì)菌為主導(dǎo)。
在LB培養(yǎng)基中G-細(xì)菌與G+細(xì)菌分別占63%和37%,在SS培養(yǎng)基中G-細(xì)菌與G+細(xì)菌分別占87%和13%。這些細(xì)菌中對紅霉素具有耐藥性的最多,對阿莫西林具有耐藥性的最少,它們分布于變形菌門、放線菌門以及厚壁菌門。
抗生素抗性基因常與重金屬抗性基因定位在同一個(gè)遺傳元件上,我們將沒有抗生素抗性的大腸桿菌與2株耐8種抗生素細(xì)菌進(jìn)行對比實(shí)驗(yàn)。結(jié)果表明,這些多重耐藥菌對Zn、Pb、Cu、Mn的抗性比沒有抗生素抗性的細(xì)菌強(qiáng)。
多重耐藥細(xì)菌質(zhì)粒的檢測及遺傳特性研究。我們提取了各多抗菌的抗性質(zhì)粒并轉(zhuǎn)化入模式菌株DH5a中。進(jìn)一步檢測發(fā)現(xiàn),這些多抗菌中均有一大小在15kb左右的質(zhì)粒被成功轉(zhuǎn)入DH5a中。攜帶該質(zhì)粒的DH5a可以在加有四環(huán)素、卡那霉素、頭孢氨芐的LB固體培養(yǎng)基上生長,這表明該質(zhì)粒上可能攜帶這三種抗生素抗性基因。
測序結(jié)果顯示,該質(zhì)粒大小為14591bp,將其與NCBI中現(xiàn)有質(zhì)粒進(jìn)行同源性對比分析,發(fā)現(xiàn)其與一植物雙元穿梭表達(dá)載體p ZGA22的相似度達(dá)到99%。通過生物信息學(xué)分析,我們發(fā)現(xiàn)其攜帶編碼四環(huán)素類（tet RC、tet RN）、磷酸轉(zhuǎn)移酶類（NTPII、NTPIII）抗性基因以及一個(gè)能同時(shí)控制多種抗生素抗性和重金屬抗性的超家族域GloEDIBRP。
結(jié)果表明,該質(zhì)粒很可能具有介導(dǎo)環(huán)境中多種耐藥基因（包括多種重金屬抗性基因）發(fā)生水平轉(zhuǎn)移的能力。
參考文獻(xiàn)
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