823Cells概述^[1]

823Cells是人胃腺癌細胞（低分化），形態(tài)特征呈上皮樣，生長狀態(tài)是貼壁生長，RPMI1640+10%FBS中培養(yǎng)，按照1:3傳代，2-3天換液一次。在無血清細胞凍存液中保存。

823Cells處理方法^[1]

收到細胞先不開瓶蓋，瓶身擦拭酒精后放在培養(yǎng)箱靜置若干小時（視細胞密度而定）穩(wěn)定細胞狀態(tài)。接著在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照（建議收細胞時就整體外觀拍一張照片，觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，隨后在顯微鏡下拍下細胞狀態(tài)，100×，200×各一張），觀察記錄細胞在運輸過程中是否有污染情況。

823Cells復蘇與凍存方法^[1]

復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加4-6mL完全培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或將細胞懸液加入6cm皿中），培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細胞變圓脫落后，進行離心收集，1000RPM條件下離心8-10分鐘，去除上清，按凍存數(shù)量加入血清及DMSO，凍存比例為90%FBS+10%DMSO。

主要參考文獻

[1] Bo Leng，Xiao-Dan Liu，Qing-Xi Chen；Inhibitory effects of anticancer peptide from Mercenaria on the BGC-823 cells and several enzymes?！禙EBS letters》 2005