402960-38-7

1178564-27-6

1007207-67-1

一般步驟：在氮?dú)獗Ｗo(hù)下，向DMF（550 mL）中加入4-氯-7-甲磺?；?2-嗎啉-4-基-6,7-二氫-5H-吡咯并[2,3-d]嘧啶（57.9 g，181.6 mmol）、2-氨基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環(huán)戊烷-2-基)嘧啶（48.2 g，218.0 mmol）、磷酸鉀（42.4 g，199.8 mmol）和水（30 mL），并進(jìn)行脫氣處理。隨后，加入二氯雙(三苯基膦)鈀(II)（1.3 g，1.8 mmol），再次脫氣，然后在60℃下攪拌反應(yīng)2小時(shí)。反應(yīng)完成后，將反應(yīng)混合物冰浴冷卻，加入水（750 mL），繼續(xù)攪拌2小時(shí)。過(guò)濾收集沉淀，依次用水（240 mL）和丙酮（240 mL）洗滌，得到粗產(chǎn)物（75.6 g）。將粗產(chǎn)物（62.0 g）懸浮于水（1500 mL）中，50℃下攪拌1小時(shí)。過(guò)濾懸浮液，依次用水（400 mL）和丙酮（400 mL）洗滌，得到5-(7-甲磺?；?2-嗎啉-4-基-6,7-二氫-5H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)嘧啶-2-胺，為灰白色固體（53.7 g，收率96%）。

參考文獻(xiàn)：

[1] Patent: EP2239261, 2010, A1. Location in patent: Page/Page column 38-39

[2] Bioorganic and Medicinal Chemistry Letters, 2011, vol. 21, # 6, p. 1767 - 1772

CH5132799抑制I型PI3Ks，尤其是PI3Kα，IC50為14 nM；對(duì)PI3Kβδγ作用效果稍弱，對(duì)PIK3CA突變型細(xì)胞系敏感。

CH5132799選擇性抑制I類PI3Ks，PI3Kα (IC50 = 0.014 μM )，PI3Kβ (IC50 = 0.12 μM )，PI3Kδ (IC50 = 0.50 μM )，PI3Kγ (IC50 = 0.036 μM )，但是對(duì)II類PI3Ks，III類PI3k和mTOR的抑制作用較弱，對(duì)26種蛋白激酶沒(méi)有抑制活性(IC50 > 10 μM)。CH5132799對(duì)PI3Kα的致癌突變體E542K (IC50 = 6.7 nM)，E545K (IC50 = 6.7 nM)和H1047R (IC50 = 5.6 nM)比對(duì)野生型PI3Kα表現(xiàn)出更強(qiáng)的抑制活性。CH5132799處理的負(fù)荷PIK3CA突變型的乳腺癌KPL-4細(xì)胞中，Akt的磷酸化作用，和其直接底物，PRAS40與FoxO1/3a，以及下游因子，包括S6K，S6和4E-BP1的磷酸化作用，被有效抑制。負(fù)荷PIK3CA突變型的癌細(xì)胞系顯著對(duì)CH5132799敏感。PI3K通路通過(guò)突變激活的人腫瘤細(xì)胞系中，CH5132799表現(xiàn)出有效的抗腫瘤活性[HCT116(CRC): IC50 = 0.20 lM，KPL-4(BC):13 IC50 = 0.032 lM，T-47D(BC): IC50 = 0.056 lM，SK-OV-3(卵巢)，IC50 = 0.12 lM]。CH5132799有效抑制KPL-4細(xì)胞中的AKT磷酸化。