"LLC-MK2 Thawing恒河猴腎細胞系
細胞背景資料：胚胎；腎；自發(fā)永生
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
LLC-MK2 Thawing恒河猴腎細胞系
細胞生長：貼壁
購買的細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因？研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳，原因比較復雜，常見原因可歸納為：培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳；血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳；解凍過程錯誤；冷凍細胞解凍后，加以洗滌細胞和離心；懸渾細胞誤認為死細胞；培養(yǎng)溫度使用錯誤；細胞置于-８０℃太久等。建議嚴格參照ATCC的標準操作規(guī)程進行細胞復蘇、凍存等工作。欲將一般動物細胞離心下來，其離心速率應為多少轉(zhuǎn)速?欲回收動物細胞，其離心速率一般為３００×g(約１O(jiān)OOrpm),５-１０分鐘，轉(zhuǎn)速過高或離心時間過長都將造成細胞死亡。合適的離心轉(zhuǎn)速是根據(jù)相對離心力決定。RCF=１.１１９×１０５×r×(rpm)２，其中r為離心機轉(zhuǎn)軸中心與離心套管底部內(nèi)壁的距離；rpm為離心機每分鐘的轉(zhuǎn)數(shù)；RCF(relative centrifugal force)為相對離心力，以重力加速度g(９８０.６６cm/s２)的倍數(shù)來表示單位。
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細胞株(系)的使用，為醫(yī)學研究和測試工作帶來了極大的方便。但細胞的傳代是有限制的，長期連續(xù)傳代的細胞，不僅消耗大量的人力和物力，而且細胞的生長與形態(tài)等會有一定退變或轉(zhuǎn)化，因而細胞失去原有的遺傳特性，有時還會由于細胞污染而造成傳代中斷，種子丟失。因此，在實際工作中常需凍存一定數(shù)量的細胞，以備替換使用。細胞冷凍與復蘇是細胞培養(yǎng) 室的常規(guī)工作和通用技術(shù)。目前，細胞凍存最常用的技術(shù)是液氮冷凍保存法，主要采用加適量保護劑的緩慢冷凍法凍存細胞。細胞在不加任何保護劑的情況下直接冷凍，細胞內(nèi)外的水分會很快形成冰晶，從而引起一系列不良反應。如細胞脫水使局部電解質(zhì)濃度增高，pH值改變，部分蛋白質(zhì)由于上述原因而變性，引起細胞內(nèi)部空間結(jié)構(gòu)紊亂，溶酶體膜由此遭到損傷而釋放出溶酶體酶，使細胞內(nèi)結(jié)構(gòu)成分造成破壞，線粒體腫脹，功能丟失，并造成能量代謝障礙。胞膜上的類脂蛋白復合體也易破壞引起細胞膜通透性的改變，使細胞內(nèi)容物丟失。如果細胞內(nèi)冰晶形成較多，隨冷凍溫度的降低，冰晶體積膨脹造成細胞核DNA空間構(gòu)型發(fā)生不可逆的損傷，而致細胞死亡。因此，細胞冷凍技術(shù)的關(guān)鍵是盡可能地減少細胞內(nèi)水分，減少細胞內(nèi)冰晶的形成。采用甘油或二甲基亞砜作保護劑，這兩種物質(zhì)分子量小，溶解度大，易穿透細胞，可以使冰點下降，提高細胞膜對水的通透性，且對細胞無明顯毒性。慢速冷凍方法又可使細胞內(nèi)的水分滲出細胞外，減少胞內(nèi)形成冰結(jié)晶的機會，從而減少冰晶對細胞的損傷。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
LLC-MK2 Thawing恒河猴腎細胞系
細胞生長特性：貼壁
細胞傳代的一般方法：開始細胞傳代前，仔細檢查細胞傳代所需的儀器和試劑是否齊全：一般主要有：細胞(單層細胞，鏡檢適合)、培養(yǎng)液(MEM-０.２%LH培養(yǎng)液或MEM培養(yǎng)液或１９９等適合細胞有要求的培養(yǎng)液)、滅活小牛血清、慶大霉素溶液（１萬單位）、７.５％NaHC０３溶液、０.２５％胰蛋白酶、PBS洗液。用具：小方瓶(１００m１)、克氏瓶、膠塞、吸管(１０ml、１m１）、細胞吹打管（２０ml）(以上用具需經(jīng)１２１℃至少１５分鐘高壓滅菌)、C０２ 孵箱、超凈臺、倒置顯微鏡、４℃、-２０℃冰箱；操作步驟：鏡檢細胞，挑選生長狀態(tài)良好，細胞界限清晰，具有立體感，形態(tài)好無污染、無異常及可疑病變細胞。配制細胞培養(yǎng)液：按以下配比配制MEM-０.２%LH培養(yǎng)液１００ml內(nèi)，加入滅活小牛血清１０m１，慶大霉素溶液０.３m１，７.５%碳酸鈉溶液３ml。（僅供一般參考）。消化細胞；先用PBS洗液沖洗細胞表面１-２次，每次１０m１，棄去洗液，向細胞瓶內(nèi)加入０.２５％胰蛋白酶溶液，每瓶１m１，細胞瓶平放，使消化液完全覆蓋細胞表面。至細胞完全脫落到胰酶中。每瓶加入１０m１細胞培養(yǎng)液吹打分散細胞，按所需的傳代比例分裝于小方瓶(１００m１)中，再加入１０m１細胞培養(yǎng)液重復吹打一次后分裝，然后補加至所需培養(yǎng)量。加塞，置于３７±１℃孵箱培養(yǎng)。約２～４天成片。(由細胞接種濃度決定)；填寫傳代記錄。
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
Hmy.2 CIR細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Balb/c3T3細胞、NE1細胞、KYSE 450細胞
HTori:3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KBM-7/Hap8細胞、H4-II-E細胞、SCC7細胞
Anip973細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WI-38細胞、COLO-320-DM細胞、MDCKII細胞
T1-73細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PM6細胞、C12細胞、CL MC/9細胞
PC-3M-1E8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR-4細胞、ARH 77細胞、QBI-293A細胞
KM12SM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OV90細胞、16-HBEo細胞、SW 948細胞
HFLS-OA細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HFF-1細胞、L5178-R細胞、COV 434細胞
HCEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HARAB細胞、VSC4.1細胞、B104 [Rat neuroblastoma]細胞
UPCI:SCC90細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jurkat (clone E6-1)細胞、NCIH1155細胞、GM00637B細胞
Jiyoye細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ABC-1細胞、LNCaP C4-2細胞、3AO細胞
Jurkat (clone E6-1)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW756細胞、CEM-CCRF (CAMR)細胞、MOLT-16細胞
OCI-AML3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC0078細胞、UPCI:SCC90細胞、P3X63Ag8.653細胞
LTEPsm細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H596細胞、ONS76細胞、LC-1/sq細胞
H1299細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C-4-I細胞、Jurkat細胞、T8細胞
HS578細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAMA-1細胞、Wien-133細胞、SMA 560細胞
SKBR-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI 1846細胞、Jurkat clone A3細胞、MDA-MB-468細胞
H-929細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C3H/10T1/2 CL8細胞、ZR751細胞、NCI-H661細胞
U118MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2141細胞、TCCSUP細胞、SNU-878細胞
DHL-16細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MyLa2059細胞、NS1-Ag4細胞、ARO81-1細胞
S16細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MS751細胞、Hep 3B2細胞、BEL-7404細胞
2780細胞系相關(guān)產(chǎn)品：aTC1 Clone 6細胞、T-47D細胞、HCC-1428細胞
2780細胞系相關(guān)產(chǎn)品：aTC1 Clone 6細胞、T-47D細胞、HCC-1428細胞
hFOB1.19細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Helacyton gartleri細胞、IPLB-SF 21細胞、Ramos細胞
Sp2/mIL-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDAPCa2b細胞、WM239A細胞、UCLA RO-81-A-1細胞
B35細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT-3細胞、NCI-H1688細胞、MeT-5A細胞
HKF細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-157細胞、OV1063細胞、NCIH520細胞
LLC-MK2 Thawing恒河猴腎細胞系
QG-56細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SY5Y細胞、Tu-686細胞、SB細胞
PZ-HPV-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-SNU-216細胞、174xCEM.T2細胞、HEK-293FT細胞
Transformed C3H Mouse Kidney-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-1088細胞、NK92-MI細胞、HAEC細胞
PC3M-1E8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CEMx721.174.T2細胞、MC3T3-E1 Subclone 4細胞、Hs839.T細胞
H1155細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HM細胞、C32 [Human melanoma]細胞、NCIH526細胞
NCIH1688細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H23細胞、AGS細胞、786-0WT細胞
3T3 Swiss Albino細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVTOKO細胞、BNL CL2細胞、CCK81細胞
MPP-89細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Adeno-293細胞、COLO 738細胞、IBRS2細胞
RPE-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human Hepatocyte Line 5細胞、H-1793細胞、HFLS細胞
A.704細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK293-EBNA細胞、16HBE140細胞、HSC-2細胞
HN 4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NTERA2細胞、EFM-192A細胞、NCI-H1915細胞
KFB細胞系相關(guān)產(chǎn)品：YAC-1細胞、KYSE0030細胞、TK-10細胞
CAL-27細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL-51細胞、My-La 2059細胞、NCI-747細胞
HT 1197.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RBSMC細胞、RMS 13細胞、KNS-42細胞
HNE2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKN-AS細胞、Panc-05.04細胞、HPAEC細胞
ChaGo K-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UCH1細胞、HIT clone T15細胞、KYSE 510細胞
AHH1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GOTO細胞、DKMG細胞、NCI-HUT-596細胞
SNU387細胞系相關(guān)產(chǎn)品：3T3L1細胞、SNU739細胞、Human Intestinal Epithelial Cell-6細胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tsup-1細胞、P3X63Ag8細胞、HTori-3.1細胞
EB-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUP-M2細胞、CTLA4 Ig-24細胞、SUD6細胞
U-373MG ATCC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IPLB-Sf21-AE細胞、A2780-CP細胞、HK-2 [Human kidney]細胞
TE-15細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MV4:11細胞、CHOS細胞、NCI-H820細胞
NCI-H810細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ACHN細胞、JB6 Cl 30-7b細胞、H2228細胞
Keio University-19-19細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SF539細胞、RPMI no 8226細胞、IHH-4細胞
UK Pan-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPMEC細胞、DAN-G細胞、RBE4細胞
SUM 52細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA415細胞、SU86-86細胞、SKRC-20細胞
NL-20細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RERF-LC-MS細胞、9L細胞、Hs832.Tc細胞
A-172細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK Mel 2細胞、HPAF-2細胞、KALS-1細胞
NCTC clone 929細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDAMB157細胞、SU-DHL-1細胞、CCD19Lu細胞
McA-RH8994細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LAN1細胞、PL-45細胞、Mel624細胞
IR 983F細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-231 #4175細胞、Detroit-562細胞、HCT GEO細胞
KY180細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW1353細胞、SW 1088細胞、RKO-E6細胞
CEM.C1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：10RGB細胞、NCIH23細胞、MN-9D細胞
LLC-MK2 Thawing恒河猴腎細胞系
NCIH345細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 738細胞、MT4細胞、Jurkat clone A3細胞
ssMCF-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-SNU-C1細胞、NCI.H522細胞、AZ 521細胞
JHH7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE354.T細胞、GM03190細胞、WERI-Rb-1細胞
Earles's cells細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BC3 H1細胞、OCI-LY-8細胞、NCI-SNU-C2B細胞
MKN-74細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RMS 1598細胞、IHHA-1細胞、alpha-TC1-6細胞
SEG-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1522細胞、CNLMG-B5537SKIN細胞、AR4-2J細胞
H22-H8D8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHL1細胞、NCI-H69C細胞、HS-294-T細胞
Nittby-Salford 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FAK+/+細胞、H-1522細胞、Dx5細胞
C-33A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH740細胞、CEM-T4細胞、PC3M-IE8細胞
THP1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HBVP細胞、WM115-mel細胞、MUTZ3細胞
VMM5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NuTu 19細胞、HCC9724細胞、EM3細胞
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