"FRhK-4 Thawing恒河猴胚腎細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:胚胎;腎;自發(fā)永生;雌性
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
FRhK-4 Thawing恒河猴胚腎細(xì)胞系
細(xì)胞生長:貼壁
購買的細(xì)胞死亡或細(xì)胞存活率不佳可能原因?研究人員在細(xì)胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳,原因比較復(fù)雜,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳;血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳;解凍過程錯誤;冷凍細(xì)胞解凍后,加以洗滌細(xì)胞和離心;懸渾細(xì)胞誤認(rèn)為死細(xì)胞;培養(yǎng)溫度使用錯誤;細(xì)胞置于-80℃太久等。建議嚴(yán)格參照ATCC的標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程進(jìn)行細(xì)胞復(fù)蘇、凍存等工作。欲將一般動物細(xì)胞離心下來,其離心速率應(yīng)為多少轉(zhuǎn)速?欲回收動物細(xì)胞,其離心速率一般為300×g(約1O(jiān)OOrpm),5-10分鐘,轉(zhuǎn)速過高或離心時間過長都將造成細(xì)胞死亡。合適的離心轉(zhuǎn)速是根據(jù)相對離心力決定。RCF=1.119×105×r×(rpm)2,其中r為離心機(jī)轉(zhuǎn)軸中心與離心套管底部內(nèi)壁的距離;rpm為離心機(jī)每分鐘的轉(zhuǎn)數(shù);RCF(relative centrifugal force)為相對離心力,以重力加速度g(980.66cm/s2)的倍數(shù)來表示單位。
細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細(xì)胞株(系)的使用,為醫(yī)學(xué)研究和測試工作帶來了極大的方便。但細(xì)胞的傳代是有限制的,長期連續(xù)傳代的細(xì)胞,不僅消耗大量的人力和物力,而且細(xì)胞的生長與形態(tài)等會有一定退變或轉(zhuǎn)化,因而細(xì)胞失去原有的遺傳特性,有時還會由于細(xì)胞污染而造成傳代中斷,種子丟失。因此,在實際工作中常需凍存一定數(shù)量的細(xì)胞,以備替換使用。細(xì)胞冷凍與復(fù)蘇是細(xì)胞培養(yǎng) 室的常規(guī)工作和通用技術(shù)。目前,細(xì)胞凍存最常用的技術(shù)是液氮冷凍保存法,主要采用加適量保護(hù)劑的緩慢冷凍法凍存細(xì)胞。細(xì)胞在不加任何保護(hù)劑的情況下直接冷凍,細(xì)胞內(nèi)外的水分會很快形成冰晶,從而引起一系列不良反應(yīng)。如細(xì)胞脫水使局部電解質(zhì)濃度增高,pH值改變,部分蛋白質(zhì)由于上述原因而變性,引起細(xì)胞內(nèi)部空間結(jié)構(gòu)紊亂,溶酶體膜由此遭到損傷而釋放出溶酶體酶,使細(xì)胞內(nèi)結(jié)構(gòu)成分造成破壞,線粒體腫脹,功能丟失,并造成能量代謝障礙。胞膜上的類脂蛋白復(fù)合體也易破壞引起細(xì)胞膜通透性的改變,使細(xì)胞內(nèi)容物丟失。如果細(xì)胞內(nèi)冰晶形成較多,隨冷凍溫度的降低,冰晶體積膨脹造成細(xì)胞核DNA空間構(gòu)型發(fā)生不可逆的損傷,而致細(xì)胞死亡。因此,細(xì)胞冷凍技術(shù)的關(guān)鍵是盡可能地減少細(xì)胞內(nèi)水分,減少細(xì)胞內(nèi)冰晶的形成。采用甘油或二甲基亞砜作保護(hù)劑,這兩種物質(zhì)分子量小,溶解度大,易穿透細(xì)胞,可以使冰點下降,提高細(xì)胞膜對水的通透性,且對細(xì)胞無明顯毒性。慢速冷凍方法又可使細(xì)胞內(nèi)的水分滲出細(xì)胞外,減少胞內(nèi)形成冰結(jié)晶的機(jī)會,從而減少冰晶對細(xì)胞的損傷。
細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
FRhK-4 Thawing恒河猴胚腎細(xì)胞系
細(xì)胞生長特性:貼壁
細(xì)胞的凍存:為避免污染造成的損失,最小化連續(xù)細(xì)胞系的遺傳改變和避免有限細(xì)胞系的老化和轉(zhuǎn)化,需要凍存哺乳細(xì)胞。凍存細(xì)胞前,細(xì)胞應(yīng)該特性化并檢查是否污染。有幾種普通培養(yǎng)基用來凍存細(xì)胞。對于包含有血清的培養(yǎng)基,成分可能如下:包含10%甘油的完全培養(yǎng)基;包含10%二甲基亞砜(DMSO)的完全培養(yǎng)基;50%細(xì)胞條件培養(yǎng)基和50%含有10%甘油的新鮮培養(yǎng)基或50%細(xì)胞條件培養(yǎng)基和50%含有10%二甲基亞砜的新鮮培養(yǎng)基。對于無血清培養(yǎng)基,一些普通的培養(yǎng)基成分可能是:50%細(xì)胞條件無血清培養(yǎng)基和50%包含有7.5%二甲基亞砜的新鮮的無血清培養(yǎng)基或包含有7.5%二甲基亞砜和10%細(xì)胞培養(yǎng)級BSA的新鮮無血清培養(yǎng)基。懸浮細(xì)胞凍存:計數(shù)將要凍存的活細(xì)胞。細(xì)胞應(yīng)該處于對數(shù)生長期。以大約200~400g離心5分鐘沉淀細(xì)胞,使用移液管移去上清到最小體積,不要攪亂細(xì)胞。以1×10(7)到5×10(7)細(xì)胞/ml密度,在包含有血清的冷凍培養(yǎng)基中再次懸浮細(xì)胞,或者以0.5×10(7)到1×10(7)在無血清培養(yǎng)基中,再次懸浮細(xì)胞。分裝進(jìn)凍存管,將凍存管置于濕冰上或放入4℃冰箱中,5分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細(xì)胞以1℃/分鐘進(jìn)行冷凍,可以通過可編程序的冷凍器進(jìn)行或者把隔離盒中的凍存管放到-70℃到-90℃的冰箱中,然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。貼壁細(xì)胞凍存:使用分離試劑從基層分離細(xì)胞,分離時盡可能溫和,使對細(xì)胞的損傷減少到最小。在完全生長培養(yǎng)基中,再次懸浮分離細(xì)胞,確定有活力細(xì)胞數(shù)。以大約200g離心5分鐘沉淀細(xì)胞。使用移液管移去上清到最小體積,不要攪亂細(xì)胞。以5×10(6)到1×10(6)細(xì)胞/ml密度,在凍存液中懸浮細(xì)胞。分裝進(jìn)凍存管,將凍存管置于濕的冰上或放入4℃冰箱中,5分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細(xì)胞以1℃/分鐘進(jìn)行冷凍,可以通過可編程序的冷凍器進(jìn)行或者把隔離盒中的凍存管放到-70℃到-90℃的冰箱中,然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。
細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書
HCC2218細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 819.T細(xì)胞、rHSC-99細(xì)胞、HCC-78細(xì)胞
NCI-H889細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3 88 D1細(xì)胞、MCF.10A細(xì)胞、BCAP37細(xì)胞
KMM-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF12F細(xì)胞、RPMI 2650細(xì)胞、CCRFCEM細(xì)胞
Hs840T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BTI-Tn5B14細(xì)胞、NCI H548細(xì)胞、HT-55細(xì)胞
MiaPaca.2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MGHU1細(xì)胞、L-428細(xì)胞、MDA-MB-330細(xì)胞
Anip973細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WI-38細(xì)胞、COLO-320-DM細(xì)胞、MDCKII細(xì)胞
K-1735細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:786.O細(xì)胞、Calu 6細(xì)胞、HSAS3細(xì)胞
TE15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:N-Tera-2細(xì)胞、PAEC細(xì)胞、4T1-LUC細(xì)胞
38C-13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MAVER細(xì)胞、HT-3細(xì)胞、U343細(xì)胞
LC-1Sq細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2172細(xì)胞、Hs 281.T細(xì)胞、Ramos G6.C10細(xì)胞
NCI-H2107細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF-7/ADR-RES細(xì)胞、COLO206F細(xì)胞、K422細(xì)胞
D407細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NIH:OVCAR-3細(xì)胞、IB-RS-2細(xì)胞、Panc5.04細(xì)胞
SNU423細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCILY-10細(xì)胞、GOTO細(xì)胞、EFM192A細(xì)胞
Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HFB細(xì)胞、PL-5細(xì)胞、MCF 7B細(xì)胞
PANC 327細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HepG2/C3A細(xì)胞、LS174細(xì)胞、RCC-4細(xì)胞
NCI-H2066細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc_08_13細(xì)胞、EFM192C細(xì)胞、TGBC-11-TKB細(xì)胞
IMCD-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2009細(xì)胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-2細(xì)胞、LIM 1215細(xì)胞
IPAM-WT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mink細(xì)胞、Hs 822.T細(xì)胞、BEND細(xì)胞
LMH細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SAOS 2細(xì)胞、Madin-Darby Canine Kidney細(xì)胞、NCI-H920細(xì)胞
MPC-11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U2OS細(xì)胞、SJSA細(xì)胞、HIT.T15細(xì)胞
CAL 85-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Intestinal Epithelioid Cell line No. 18細(xì)胞、HIBEpiC細(xì)胞、SCC-7細(xì)胞
CAL 85-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Intestinal Epithelioid Cell line No. 18細(xì)胞、HIBEpiC細(xì)胞、SCC-7細(xì)胞
NCI-H102細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KHYG1細(xì)胞、B/C3T3細(xì)胞、WIL2 S細(xì)胞
PSN-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BJ1細(xì)胞、NB-19細(xì)胞、293E細(xì)胞
MKN 45細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:hRPTC細(xì)胞、SK-MEL-2-LUC細(xì)胞、T2細(xì)胞
NCI-H2342細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:174xCEM.T2細(xì)胞、NCIH889細(xì)胞、hEEC細(xì)胞
FRhK-4 Thawing恒河猴胚腎細(xì)胞系
WRL-68細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LS411細(xì)胞、MeT-5A細(xì)胞、SUDHL-5細(xì)胞
OC-3-VGH細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUDHL-6細(xì)胞、PJ34細(xì)胞、SUD-4細(xì)胞
T47-D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L 1210細(xì)胞、EFM-19細(xì)胞、CAL 33細(xì)胞
SW480細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPAEpiC細(xì)胞、SK-LMS-1細(xì)胞、TK-1細(xì)胞
H-226細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RSC96細(xì)胞、CAL 62細(xì)胞、NCI-H28細(xì)胞
CAL 39細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MM1S細(xì)胞、NCI-H1522細(xì)胞、MMAc.SF細(xì)胞
TF-1a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Karpas299細(xì)胞、KYSE-140細(xì)胞、S37細(xì)胞
KYSE 450細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Med 283細(xì)胞、WM239細(xì)胞、SNU354細(xì)胞
NCIH1694細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GC1-SPG細(xì)胞、S3-HeLa細(xì)胞、Hs 636 T細(xì)胞
IR983F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NK-92細(xì)胞、32D clone 3細(xì)胞、EL-4細(xì)胞
32Dc3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L-M(TK-)細(xì)胞、BMSCs(mBMSCs)細(xì)胞、BE(2)M-17細(xì)胞
Duck embryo細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ECC12細(xì)胞、SCLC21H細(xì)胞、Sp 2817細(xì)胞
HET-1A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM3190細(xì)胞、Caco2-BBE細(xì)胞、LX-2細(xì)胞
ND7/23細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BA/F3細(xì)胞、LN229細(xì)胞、P3X63 Ag8細(xì)胞
Hs839T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-87MG ATCC細(xì)胞、PANC0203細(xì)胞、SK-Hep1細(xì)胞
H19-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM07404細(xì)胞、OCI AML2細(xì)胞、SCL-II細(xì)胞
B16BL6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEI193細(xì)胞、Rat Basophilic Leukemia-1細(xì)胞、MSF細(xì)胞
NCIH1793細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:D-324 Med細(xì)胞、GM04154B細(xì)胞、NCIH82細(xì)胞
NCI-H2591細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AML 12細(xì)胞、MC38細(xì)胞、Tu 212細(xì)胞
KAT-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2030細(xì)胞、NCIH1993細(xì)胞、CMT93細(xì)胞
MV4II細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Asian Medical Center-Head and Neck cancer-8細(xì)胞、KYSE520細(xì)胞、HFLS-RA細(xì)胞
TE7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1417細(xì)胞、CPA 47細(xì)胞、UM-UC-14細(xì)胞
NS-1-Ag4-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H661細(xì)胞、Tb1Lu細(xì)胞、OUMS27細(xì)胞
SK-MES細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:624-mel細(xì)胞、BBE細(xì)胞、MPP 89細(xì)胞
VMRCRCZ細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BE(2)-C細(xì)胞、SL1細(xì)胞、NU-GC-3細(xì)胞
P-19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPAF/CD18細(xì)胞、184A1細(xì)胞、Spodoptera frugiperda clone 9細(xì)胞
MDA231細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JURKAT E-61細(xì)胞、Panc813細(xì)胞、KU-812細(xì)胞
OV 1063細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Pt K2 (NBL-5)細(xì)胞、B6Tert-1細(xì)胞、RL細(xì)胞
HCC0202細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:B-CPAP細(xì)胞、HT-29/CX-1細(xì)胞、OV-1063細(xì)胞
NCI-H1869細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LS-1034細(xì)胞、ssMCF7細(xì)胞、TGHAVSMC細(xì)胞
ROS17/28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Immortalized Human Hepatocytes細(xì)胞、MC57G細(xì)胞、IGROV-1細(xì)胞
AR4IP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:D341 Med細(xì)胞、IEC 6細(xì)胞、SUDHL-16細(xì)胞
PLB-985細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H676細(xì)胞、CAL 12細(xì)胞、KMH2細(xì)胞
FRhK-4 Thawing恒河猴胚腎細(xì)胞系
NCI-H1666細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mouse Bladder Tumor line-2細(xì)胞、MDA-MB-435 S細(xì)胞、GM02131細(xì)胞
HELA-GFP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:251MG細(xì)胞、NCI-128細(xì)胞、HuPT4細(xì)胞
A498細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-196細(xì)胞、C2-C12細(xì)胞、OSC19細(xì)胞
Hs343T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Colon 26細(xì)胞、HPDLF細(xì)胞、FAO-1細(xì)胞
NCI-H524細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DHL8細(xì)胞、IMR32細(xì)胞、UPCI-SCC090細(xì)胞
Co 115細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO829細(xì)胞、JHH7細(xì)胞、NCIH1688細(xì)胞
PASMCS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:138MG細(xì)胞、P3 88 D1細(xì)胞、DLD1細(xì)胞
D-324MED細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SF 539細(xì)胞、A-875細(xì)胞、OE-33細(xì)胞
3D4/21細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:32D CL3細(xì)胞、MNNG/HOS Cl #5細(xì)胞、TFH細(xì)胞
A-427細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:D407細(xì)胞、Centre Antoine Lacassagne-62細(xì)胞、SL-1細(xì)胞
SKMES細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:THLE2細(xì)胞、HcerEpic細(xì)胞、hFOB1.19細(xì)胞
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