"Super Tube Thawing狗腎細胞系
細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
Super Tube Thawing狗腎細胞系
細胞生長：貼壁
為什么培養(yǎng)的細胞要及時傳代？體外培養(yǎng)的細胞大多具有生長接觸抑制的特性，也就是說當(dāng)一個細胞被其他細胞包圍的時候，它就會停止生長，及時傳代后，細胞的生長得以繼續(xù)。培養(yǎng)細胞生長減慢的原因在哪些?其解決辦法有哪些？可能的原因有：更換了不同的培養(yǎng)液或血清；培養(yǎng)液中一些細胞生長必需成分如谷眈肢或生長因子等耗盡或缺乏或己被破壞；培養(yǎng)物中有少量細菌或真菌污染；試劑保存不當(dāng)；比較新培養(yǎng)液與原培養(yǎng)液成分，比較新血清與舊血清等，找出其它可能的原因。解決辦法：增加起始培養(yǎng)細胞濃度；讓細胞逐漸適應(yīng)新培養(yǎng)液；換入新鮮配制培養(yǎng)液；補加谷酷肢或生長因子等；用無抗生素培養(yǎng)液培養(yǎng)，如發(fā)現(xiàn)污染，去棄培養(yǎng)物，或用抗生素除菌；血清需保存在５℃到２０℃; 培養(yǎng)液需在２-８℃避光保存;含血清完全培養(yǎng)液在２-８℃保存，并在２周內(nèi)用完;分離培養(yǎng)物，檢測支原體。冷凍管應(yīng)如何解凍？取出冷凍管后，須立即放入３７℃水槽中快速解凍，輕搖冷凍管使其在１-２分鐘內(nèi)大部分融化，特別注意，需殘留一小塊冰塊，就可拿到超凈工作臺操作細胞，用７５%酒精消毒凍存管，用新鮮培養(yǎng)基將細胞轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶。另外冷凍管由液氮桶中取出解凍時，必須注意安全，預(yù)防冷凍管爆裂。
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細胞凍存復(fù)蘇材料與方法步驟：常用的細胞冷凍貯存器為液氮貯存器，規(guī)格有３５L和５０L兩種。使用時要注意以下幾點：(１)一般兩周需充液氮一次，至少一個月充氮一次。液氮溫度達-１９６℃，使用時注意勿讓液氮濺到皮膚上，以免引起凍傷。(２)液氮容器為雙層結(jié)構(gòu)，中間為真空層，瓶口有雙層焊接處，應(yīng)防止焊接部裂開。(３)在裝入液氮時，要注意緩慢小心，并用厚紙卷筒或特制漏斗作引導(dǎo)，使液氮直達瓶底，如有專用液氮灌注裝置則更好。若為初次使用，加液氮時更要緩慢，以免溫度驟降而使容器損壞。細胞凍存時常備的材料有：０.２５%胰蛋白酶，含１０%～２０%的血清培養(yǎng)液，DMSO(分析純)或無色新鮮甘油(１２１°C蒸氣高壓消毒)，２mL安瓿(或?qū)Ｓ眉毎麅龃婀?、吸管、離心管、噴燈、紗布袋(或凍存管架)等。主要操作步驟為：(１)選擇處于對數(shù)生長期的細胞，在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng) 液去掉，用０.２５%胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶，加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細胞，使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產(chǎn)細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(１０００r/min，１０分鐘)。(２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培養(yǎng)基，于４℃預(yù)冷１５分鐘后，逐滴加入已無菌的DMSO或甘油，用吸管輕輕吹打使細胞均勻，細胞濃度為３×１０６～１×１０７/mL之間。(３)將上述細胞分裝于安瓿或?qū)Ｓ美鋬鏊芰瞎苤校碴逞b１～１.５mL在火焰噴燈上封口，封口處要完全封閉，圓滑無勾。冷凍管要將蓋子蓋緊，并標記好細胞名稱和凍存日期，同時作好登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數(shù))。(４)將裝好細胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內(nèi);置于液氮容器頸口處存放過夜，次日轉(zhuǎn)入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟：先將安瓿置入４℃冰箱中２～３小時，再移至冰箱冷凍室內(nèi)３～４小時，再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放２小時，最后沉入液氮中。細胞凍存在液氮中可以長期保存，但為妥善起見，凍存半年后，取出一只安瓿細胞復(fù)蘇培養(yǎng)，觀察生長情況，然后再繼續(xù)凍存。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
Super Tube Thawing狗腎細胞系
細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分
細胞傳代的一般方法：開始細胞傳代前，仔細檢查細胞傳代所需的儀器和試劑是否齊全：一般主要有：細胞(單層細胞，鏡檢適合)、培養(yǎng)液(MEM-０.２%LH培養(yǎng)液或MEM培養(yǎng)液或１９９等適合細胞有要求的培養(yǎng)液)、滅活小牛血清、慶大霉素溶液（１萬單位）、７.５％NaHC０３溶液、０.２５％胰蛋白酶、PBS洗液。用具：小方瓶(１００m１)、克氏瓶、膠塞、吸管(１０ml、１m１）、細胞吹打管（２０ml）(以上用具需經(jīng)１２１℃至少１５分鐘高壓滅菌)、C０２ 孵箱、超凈臺、倒置顯微鏡、４℃、-２０℃冰箱；操作步驟：鏡檢細胞，挑選生長狀態(tài)良好，細胞界限清晰，具有立體感，形態(tài)好無污染、無異常及可疑病變細胞。配制細胞培養(yǎng)液：按以下配比配制MEM-０.２%LH培養(yǎng)液１００ml內(nèi)，加入滅活小牛血清１０m１，慶大霉素溶液０.３m１，７.５%碳酸鈉溶液３ml。（僅供一般參考）。消化細胞；先用PBS洗液沖洗細胞表面１-２次，每次１０m１，棄去洗液，向細胞瓶內(nèi)加入０.２５％胰蛋白酶溶液，每瓶１m１，細胞瓶平放，使消化液完全覆蓋細胞表面。至細胞完全脫落到胰酶中。每瓶加入１０m１細胞培養(yǎng)液吹打分散細胞，按所需的傳代比例分裝于小方瓶(１００m１)中，再加入１０m１細胞培養(yǎng)液重復(fù)吹打一次后分裝，然后補加至所需培養(yǎng)量。加塞，置于３７±１℃孵箱培養(yǎng)。約２～４天成片。(由細胞接種濃度決定)；填寫傳代記錄。
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
DiFi細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUDHL10細胞、MLM細胞、8305C細胞
NK92MI細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE 450細胞、Biologics Standards-Cercopithecus-1細胞、Lu99A細胞
Lu-165細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEY A8細胞、HuO9細胞、HCC 70細胞
U-87 MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LAC細胞、L-6TG細胞、ST 486細胞
P3-X63-Ag8-653細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H250細胞、JKT1細胞、SJSA細胞
SNU-739細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A-498細胞、HGBEC細胞、AM-38細胞
PL-12細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOLT-3細胞、NCIH747細胞、NIE-115細胞
SNU-668細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mac-1細胞、EU-4細胞、NCI-H660細胞
P19細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE140細胞、LN-18細胞、L 363細胞
L-5178-Y細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Clone 929細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-330細胞、GM03569D細胞
Hs-600-T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1781細胞、TMK1細胞、FM88細胞
COR-L 105細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHP212細胞、MDCKII細胞、HCCLM3細胞
AML193細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH146細胞、MOLP2細胞、GM01232E細胞
CL 1-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PANC-1細胞、H-1563細胞、IBMF-7細胞
T-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 766細胞、WPE-int細胞、CCD966SK細胞
3T3-442A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-MEL-MeWo細胞、H-4-II-E細胞、MN 60細胞
ACC-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：4T1-LUC細胞、HRA 19細胞、SUM-149細胞
SKG3A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IOSE29細胞、B-3細胞、SW-48細胞
NCI-H676B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：J82細胞、CPAE細胞、A-427細胞
U118MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2141細胞、TCCSUP細胞、SNU-878細胞
Colo-678細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SupB15WT細胞、Hela-mock細胞、Biopsy xenograft of Pancreatic Carcinoma line-3細胞
Colo-678細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SupB15WT細胞、Hela-mock細胞、Biopsy xenograft of Pancreatic Carcinoma line-3細胞
A7r5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKCol1細胞、HuH6細胞、NCI-H64細胞
PLC/PRF5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE 510細胞、SUPB15細胞、LC1sq細胞
RCC4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KM933細胞、NCI-SNU-423細胞、HEK 293-F細胞
MDA-MB-436細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCRF/CEM/0細胞、MRASMC細胞、SCC090細胞
Super Tube Thawing狗腎細胞系
MC-3T3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CESS細胞、A-172MG細胞、RFL 6細胞
Mono Mac 6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD-841CoN細胞、Walker-Ca.256細胞、Hs 578Bst細胞
CHL-IU細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KU-812-F細胞、SK-BR3細胞、QGY-7703細胞
HS-294-T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSAEC1-KT細胞、TC-1[JHU-1]細胞、TALL1細胞
UMUC14細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mono Mac 1細胞、CT26-clone 25細胞、MNNG-HOS細胞
GM05887A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDCK Type II細胞、H2196細胞、CORL51細胞
B16/F1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H345細胞、HEK293E細胞、NCIH1648細胞
SK N SH細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDCC MSB1細胞、Hopkins-92細胞、H-1341細胞
HPAF2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EB-2細胞、NCI-H1373細胞、NCIH358細胞
JB6 Cl 30-7b細胞系相關(guān)產(chǎn)品：T-ALL-1細胞、Jurkat-77細胞、NCI-H2030細胞
HCC4006細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KAT-5細胞、HCC-94細胞、H-1184細胞
KLN205細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HeLa S 3細胞、ES-2細胞、H9c2 (2-1)細胞
SW-954細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HB 611細胞、KG1細胞、PC 12細胞
SHEE細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO320/DM細胞、SBC5細胞、Jurkat (clone E6-1)細胞
RFL6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT-1197細胞、CAKI.1細胞、COLO 738細胞
MC38細胞系相關(guān)產(chǎn)品：QG56細胞、H-1238細胞、OCM1A細胞
MC38細胞系相關(guān)產(chǎn)品：QG56細胞、H-1238細胞、OCM1A細胞
Kobe university Oral Squamous Cell culture-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SHEE細胞、NCI-H660細胞、NS-1-Ag4-1細胞
SNU-878細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HR8348細胞、OCI-Ly 1細胞、NCI-SNU-878細胞
NCIH1568細胞系相關(guān)產(chǎn)品：THEECs細胞、118 MG細胞、RPMC細胞
OV2008細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NS1-Ag4/1細胞、HRC-99細胞、NCI-H727細胞
Det. 562細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H19-7細胞、SNU620細胞、MES 13細胞
SW-962細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2126細胞、Jiyoye (P-2003)細胞、CFPAC1細胞
AE1201細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 357細胞、WM-266-mel細胞、MM1S細胞
UMRC-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RBL細胞、NCI-H740細胞、CMT-93細胞
PBL細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H35細胞、RAW 264.7細胞、MA-782細胞
AMC-HN-8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BEL7405細胞、HMSC細胞、SKMES-1細胞
GM06141細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RBL-I細胞、THP 1細胞、NCI N87細胞
CNLMG-B5537SKIN細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UPCI:SCC90細胞、L 540細胞、SK-N-BE2細胞
MC3T3-E1(C4)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FHCRC subclone 11細胞、PC 61.5.3細胞、P388D1細胞
MDAMB134細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HIT.T15細胞、Panc-10.05細胞、Nittby-Salford 1細胞
Kit-225細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PLC8024細胞、ST486細胞、NCIH209細胞
SCCVII/St細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc-327細胞、LNCaP-ATCC細胞、LS 180細胞
Super Tube Thawing狗腎細胞系
B16 F10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A-704細胞、253JBV細胞、LNCaP subline C4-2細胞
Hs27F細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LWnt3A細胞、IPLB-Sf21-AE細胞、HLEpiC細胞
UPCI-SCC090細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L M (TK-)細胞、Panc 1細胞、NCI.H460細胞
National Medical Center-Glioma 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HBE 135-E6E7細胞、HSCT6細胞、KYSE 410細胞
Biopsy xenograft of Pancreatic Carcinoma line-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FU-97細胞、OCM-1細胞、WM-451Lu細胞
NCIH226細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-524細胞、LTPA細胞、COLO320DM細胞
UMNSAH/DF#1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM 149細胞、HELF細胞、IEC-18細胞
C643細胞系相關(guān)產(chǎn)品：VCaP細胞、CL1細胞、Hepa1-6細胞
SUM-159-PT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Sp2/0-Ag-14細胞、SW1271細胞、OVCAR4細胞
3 LL細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UM-UC14細胞、NCI-H1954細胞、GM03671細胞
GB1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 680N細胞、HL1細胞、rUCMSCs細胞
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