"DU145 Thawing人前列腺癌細胞系
細胞背景資料：DU １４５ 是從一位有３年淋巴細胞白血病史的前列腺癌患者的腦部轉移灶中建立的。該細胞系未檢測到激素敏感性，酸性酶陽性，單個的細胞可在軟瓊脂中形成集落。對此細胞和原始腫瘤的亞顯微結構分析可見微絨毛、微絲、細胞橋粒、線粒體、發(fā)達的高爾基體和異質溶酶體。該細胞不表達前列腺抗原。
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
DU145 Thawing人前列腺癌細胞系
細胞生長：貼壁
為什么培養(yǎng)的細胞要及時傳代？體外培養(yǎng)的細胞大多具有生長接觸抑制的特性，也就是說當一個細胞被其他細胞包圍的時候，它就會停止生長，及時傳代后，細胞的生長得以繼續(xù)。培養(yǎng)細胞生長減慢的原因在哪些?其解決辦法有哪些？可能的原因有：更換了不同的培養(yǎng)液或血清；培養(yǎng)液中一些細胞生長必需成分如谷眈肢或生長因子等耗盡或缺乏或己被破壞；培養(yǎng)物中有少量細菌或真菌污染；試劑保存不當；比較新培養(yǎng)液與原培養(yǎng)液成分，比較新血清與舊血清等，找出其它可能的原因。解決辦法：增加起始培養(yǎng)細胞濃度；讓細胞逐漸適應新培養(yǎng)液；換入新鮮配制培養(yǎng)液；補加谷酷肢或生長因子等；用無抗生素培養(yǎng)液培養(yǎng)，如發(fā)現(xiàn)污染，去棄培養(yǎng)物，或用抗生素除菌；血清需保存在５℃到２０℃; 培養(yǎng)液需在２-８℃避光保存;含血清完全培養(yǎng)液在２-８℃保存，并在２周內(nèi)用完;分離培養(yǎng)物，檢測支原體。冷凍管應如何解凍？取出冷凍管后，須立即放入３７℃水槽中快速解凍，輕搖冷凍管使其在１-２分鐘內(nèi)大部分融化，特別注意，需殘留一小塊冰塊，就可拿到超凈工作臺操作細胞，用７５%酒精消毒凍存管，用新鮮培養(yǎng)基將細胞轉移至培養(yǎng)瓶。另外冷凍管由液氮桶中取出解凍時，必須注意安全，預防冷凍管爆裂。
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細胞凍存復蘇材料與方法步驟：常用的細胞冷凍貯存器為液氮貯存器，規(guī)格有３５L和５０L兩種。使用時要注意以下幾點：(１)一般兩周需充液氮一次，至少一個月充氮一次。液氮溫度達-１９６℃，使用時注意勿讓液氮濺到皮膚上，以免引起凍傷。(２)液氮容器為雙層結構，中間為真空層，瓶口有雙層焊接處，應防止焊接部裂開。(３)在裝入液氮時，要注意緩慢小心，并用厚紙卷筒或特制漏斗作引導，使液氮直達瓶底，如有專用液氮灌注裝置則更好。若為初次使用，加液氮時更要緩慢，以免溫度驟降而使容器損壞。細胞凍存時常備的材料有：０.２５%胰蛋白酶，含１０%～２０%的血清培養(yǎng)液，DMSO(分析純)或無色新鮮甘油(１２１°C蒸氣高壓消毒)，２mL安瓿(或專用細胞凍存管)、吸管、離心管、噴燈、紗布袋(或凍存管架)等。主要操作步驟為：(１)選擇處于對數(shù)生長期的細胞，在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng) 液去掉，用０.２５%胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶，加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復吹打瓶壁上的細胞，使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產(chǎn)細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(１０００r/min，１０分鐘)。(２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培養(yǎng)基，于４℃預冷１５分鐘后，逐滴加入已無菌的DMSO或甘油，用吸管輕輕吹打使細胞均勻，細胞濃度為３×１０６～１×１０７/mL之間。(３)將上述細胞分裝于安瓿或專用冷凍塑料管中，安瓿裝１～１.５mL在火焰噴燈上封口，封口處要完全封閉，圓滑無勾。冷凍管要將蓋子蓋緊，并標記好細胞名稱和凍存日期，同時作好登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數(shù))。(４)將裝好細胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內(nèi);置于液氮容器頸口處存放過夜，次日轉入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟：先將安瓿置入４℃冰箱中２～３小時，再移至冰箱冷凍室內(nèi)３～４小時，再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放２小時，最后沉入液氮中。細胞凍存在液氮中可以長期保存，但為妥善起見，凍存半年后，取出一只安瓿細胞復蘇培養(yǎng)，觀察生長情況，然后再繼續(xù)凍存。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
DU145 Thawing人前列腺癌細胞系
細胞生長特性：貼壁
最近在培養(yǎng)細胞時，發(fā)現(xiàn)其狀態(tài)不是很好，很容易扎堆生長，用胰酶消化的時候也是一團一團地被消化下來，很難把它們吹散成一個一個細胞。而且長得也挺快也挺不均勻的，傳代的第二天，有些地方就長得滿滿的了。想請教一下這是為什么呢？你好，我養(yǎng)的細胞和你一樣，消化下來也是一團的，但吹打以后就沒有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻，分皿后在鏡下看一看，移動培養(yǎng)皿的時候盡量動作輕，避免晃動。細胞生長挺快，那么細胞的增殖能力應該較強。胰酶消化成團的問題我覺得有以下幾種可能：一、細胞消化后吹打不均勻，造成細胞成團生長：二、細胞細化太過，細胞成片脫落，吹打時沒有受力點，細胞聚團生長。解決辦法：根據(jù)細胞生長的情況進行多次消化，將同次消化下來的細胞放在一個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)。貼壁細胞傳代培養(yǎng)：一般步驟為：真空泵吸走培養(yǎng)基，１XPBS漂洗兩次，加入１mlEDTA-Tripsin（１００mm皿為例），３７度放置數(shù)分鐘，輕拍培養(yǎng)瓶使細胞自瓶壁脫落，加入適量血清，以吸管上下吸放數(shù)次以打散細胞團塊，離心后加入新鮮培養(yǎng)基，按比例轉移至新皿。細胞的傳代最重要的是胰酶處理時間，若胰酶處理太久，容易造成細胞貼壁不緊，顯微鏡下觀察立體感不強，嚴重的時候甚至會造成細胞死亡。我談談個人經(jīng)驗：HepG-２、A５４９、Hela、SGC-７９０１幾種癌細胞處理時間可適當放長，一般處理５-６min，C２C１２、COS-７、NIH-３T３比較容易脫落，２min足矣，P１９Cl６和２９３細胞貼壁不緊，可在PBS漂洗后，直接換新鮮培養(yǎng)基打散。
細胞形態(tài)特性：上皮細胞樣
BT 20細胞系相關產(chǎn)品：NCI-HUT-460細胞、NE-4C細胞、NCI-H2122細胞
KM-12細胞系相關產(chǎn)品：T8細胞、MZCRC1細胞、U-251 MG細胞
P3 NS1 Ag4/1細胞系相關產(chǎn)品：OLN93細胞、Panc 2.03細胞、H-740細胞
PCI-4M細胞系相關產(chǎn)品：hTERT RPE1細胞、52PE細胞、WM451Lu細胞
Hs746-T細胞系相關產(chǎn)品：DU 4475細胞、NCI-H2126細胞、KY-270細胞
H1417細胞系相關產(chǎn)品：Jiyoye細胞、GM03671C細胞、GM2131細胞
RCC-10細胞系相關產(chǎn)品：SKCO-1細胞、OCI-Ly 18細胞、NCIH1355細胞
TE-1細胞系相關產(chǎn)品：OC316細胞、Sf-21細胞、HCC-1395細胞
SW 48細胞系相關產(chǎn)品：HCe-8693細胞、MFHL-2細胞、Detroit-562細胞
NK-92 MI細胞系相關產(chǎn)品：H2291細胞、GP293細胞、BE(2)M17細胞
NCI-H2198細胞系相關產(chǎn)品：Ca761細胞、OVCAR5細胞、DSL6A/C1細胞
ARO81細胞系相關產(chǎn)品：SN12C細胞、Y3-Ag1,2,3細胞、Baby Hamster Kidney from litter No. 21細胞
SKMEL-2細胞系相關產(chǎn)品：M-20細胞、GC-2spd(ts)細胞、BAC1.2F5細胞
B 95-8細胞系相關產(chǎn)品：DHL-4細胞、HR8348細胞、OCI-Ly 8細胞
SNU354細胞系相關產(chǎn)品：NCI522細胞、Rat 2細胞、OCI-AML5細胞
NOMO1細胞系相關產(chǎn)品：Keio University-19-19細胞、HEK293A細胞、ATN-1細胞
BNL-CL.2細胞系相關產(chǎn)品：NW-MEL-38細胞、HSF細胞、P31-FUJ細胞
CTSC-3細胞系相關產(chǎn)品：HFF細胞、Nb2-11細胞、SU-DHL-5細胞
MDA.MB.435細胞系相關產(chǎn)品：B-cell with DC Morphology細胞、PCI-4.2細胞、Liver-02細胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-5細胞系相關產(chǎn)品：MeWo細胞、HCC-9724細胞、H-520細胞
MPP 89細胞系相關產(chǎn)品：KY180細胞、Sp 2/0-Ag 14細胞、INS1細胞
MPP 89細胞系相關產(chǎn)品：KY180細胞、Sp 2/0-Ag 14細胞、INS1細胞
SNU-601細胞系相關產(chǎn)品：NT2/D1細胞、PANC-03-27細胞、DSL-6A-C1細胞
CV1細胞系相關產(chǎn)品：OVISE細胞、HSC細胞、H-2110細胞
Hx-147細胞系相關產(chǎn)品：PLB 985細胞、MES-23.5細胞、PG-4細胞
ARIP細胞系相關產(chǎn)品：AR4-2J細胞、H1666細胞、CFSC-2G細胞
DU145 Thawing人前列腺癌細胞系
RT4-D6P2T細胞系相關產(chǎn)品：Jiyoye(P-2003)細胞、IAR 20細胞、QSG-7701細胞
GM05862細胞系相關產(chǎn)品：H-1404細胞、Hs695T細胞、OVCA-433細胞
VERO76細胞系相關產(chǎn)品：AN3CA細胞、SCC090細胞、CAKI.1細胞
WEHI-279細胞系相關產(chǎn)品：P31FUJ細胞、LICCF細胞、PC14細胞
KP-N-YN細胞系相關產(chǎn)品：SW-954細胞、Bovine ENDometrial cells細胞、COV504細胞
NCI-H1404細胞系相關產(chǎn)品：THP-1細胞、159PT細胞、XWLC-05細胞
RPMI1788細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H1436細胞、UM-UC14細胞、NCI-H1436細胞
CCC-HIE-2細胞系相關產(chǎn)品：HEK293EBNA細胞、293 H細胞、Gejiu Lung Carcinoma-82細胞
U-87細胞系相關產(chǎn)品：LLC-WRC 256細胞、TE-12細胞、McArdle RH-7777細胞
U-138 MG細胞系相關產(chǎn)品：NCIH196細胞、A549/DDP細胞、VMRCRCZ細胞
HGBEC細胞系相關產(chǎn)品：BEAS-2B細胞、MGH-U1 (EJ)細胞、LNCaP C4-2B細胞
BRL3A細胞系相關產(chǎn)品：WEHI-164細胞、NTera-2D1細胞、COLO-205細胞
Panc02-H0細胞系相關產(chǎn)品：PANC-08-13細胞、Y-1細胞、VA-ES-BJ細胞
4T1-LUC細胞系相關產(chǎn)品：HEL-92.1.7細胞、BT-325細胞、H650細胞
OCILY3細胞系相關產(chǎn)品：Madison細胞、mouse Inner Medullary Collecting Duct-3細胞、HEK AD293細胞
TALL1細胞系相關產(chǎn)品：VERO76細胞、293-H細胞、SHZ-88細胞
HEp-2細胞系相關產(chǎn)品：Jurkat-E6細胞、HCC38細胞、beta TC6細胞
Kit-225細胞系相關產(chǎn)品：PLC8024細胞、ST486細胞、NCIH209細胞
HPAF細胞系相關產(chǎn)品：Hs 729細胞、SKMEL-24細胞、SNK1細胞
SCC7細胞系相關產(chǎn)品：Douglas Foster-1細胞、ASH3細胞、Balb/3T3-4-Cl31細胞
H69/P細胞系相關產(chǎn)品：Mo 59J細胞、SNU-1040細胞、HFT-8810細胞
293 H細胞系相關產(chǎn)品：RGC5細胞、NCI-H2291細胞、H-125細胞
HCC-9724細胞系相關產(chǎn)品：LN299細胞、L-6 myoblast細胞、697細胞
JROECL 33細胞系相關產(chǎn)品：HOCF細胞、BHK細胞、C3H10T1/2CL8細胞
HSCT6細胞系相關產(chǎn)品：LSECs細胞、BI-Mel細胞、SVGp12細胞
SNK-1細胞系相關產(chǎn)品：CCD 966SK細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-453細胞、H-2085細胞
BN-CL2細胞系相關產(chǎn)品：SW-1271細胞、OCI/AML-4細胞、Calu-3細胞
L-132細胞系相關產(chǎn)品：CAL851細胞、EVSA/T細胞、OCI/AML5細胞
U373細胞系相關產(chǎn)品：ASPC1細胞、BIC1細胞、Y-79細胞
FHCRC-11細胞系相關產(chǎn)品：Metastatic Variant-522細胞、SupT1細胞、NCI-H2227細胞
JeKo 1細胞系相關產(chǎn)品：HPAF-2細胞、TE-8細胞、hOMF細胞
PC-14細胞系相關產(chǎn)品：SW 982細胞、DV90細胞、C33A細胞
A375-MEL細胞系相關產(chǎn)品：Hs 746.T細胞、SKLU-1細胞、Porcine Kidney-15細胞
DU145 Thawing人前列腺癌細胞系
SW480E細胞系相關產(chǎn)品：MDA-361細胞、NCI-H650細胞、SU-DH-L5細胞
AC16 [Human hybrid]細胞系相關產(chǎn)品：SU86.86細胞、L2細胞、L23/P細胞
HIEC6細胞系相關產(chǎn)品：JeKo-1細胞、Ramos-RA1細胞、LNCaP FGC細胞
Jiyoye (P-2003)細胞系相關產(chǎn)品：H-1299細胞、COS1細胞、HMCB細胞
HPMC細胞系相關產(chǎn)品：FF-WT-BJ細胞、HEL-92_1_7細胞、RFL6細胞
LIPF178C細胞系相關產(chǎn)品：NEC8細胞、GM04154細胞、C41細胞
CF-PAC1細胞系相關產(chǎn)品：NCIH2452細胞、P30/Ohkubo細胞、NCC-IT細胞
NPA細胞系相關產(chǎn)品：Rabbit Kidney 13細胞、JB-6細胞、GM16136細胞
HuP-T4細胞系相關產(chǎn)品：LAN-6細胞、OCI/AML-2細胞、EL4細胞
HCT-FET細胞系相關產(chǎn)品：KYSE 50細胞、H3255細胞、HCT-8細胞
K562/ADR細胞系相關產(chǎn)品：LCMS細胞、PG-4細胞、HSC-I細胞
"