"KGN Thawing人卵巢顆粒細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：該細(xì)胞株是顆粒細(xì)胞瘤。細(xì)胞在加入人體絨膜促性腺激素后可能產(chǎn)生孕酮。細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢。
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
KGN Thawing人卵巢顆粒細(xì)胞系
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中常見問題總結(jié)：１)一般客戶拿到細(xì)胞后，應(yīng)該注意什么？客戶收到細(xì)胞后先不開蓋，放在培養(yǎng)箱靜置若干小時(shí)后(看細(xì)胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議受收細(xì)胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細(xì)胞１００X，２００X各一張)，排除細(xì)胞本身污染的情況；收到細(xì)胞未開封，出現(xiàn)污染狀況我們負(fù)責(zé)免費(fèi)發(fā)送一株細(xì)胞。收到細(xì)胞時(shí)如無異常情況，請(qǐng)?jiān)陲@微鏡下觀察細(xì)胞密度，如為貼壁細(xì)胞，未超過８０%匯合度時(shí)，將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出，留下１０ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)；超過８０%匯合度時(shí)，請(qǐng)按細(xì)胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細(xì)胞，吸出培養(yǎng)液、１０００轉(zhuǎn)/分鐘離心２分鐘，吸出上清，管底細(xì)胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細(xì)胞后移回培養(yǎng)瓶。細(xì)胞消化液建議使用PBS配制，慎用Hanks液配制；２)快遞細(xì)胞多久能到，是寄凍存的細(xì)胞還是復(fù)蘇好的細(xì)胞？我們采用快遞發(fā)貨，一般外地２--３天，寄細(xì)胞前請(qǐng)確認(rèn)當(dāng)?shù)販囟龋绻麣鉁氐陀冢炊鹊?，則采用郵寄凍存細(xì)胞；３)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基？不能。每一細(xì)胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細(xì)胞培養(yǎng)基，若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基，細(xì)胞大都無法立即適應(yīng)，造成細(xì)胞無法存活；４)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類？不能。血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個(gè)極為重要的營(yíng)養(yǎng)來源，所以血清的種類和品質(zhì)對(duì)于細(xì)胞的生長(zhǎng)會(huì)產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清，在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同，血清使用錯(cuò)誤常會(huì)造成細(xì)胞無法存活。
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細(xì)胞復(fù)蘇后貼壁細(xì)胞較少的問題分析：總結(jié)１：復(fù)蘇過程沒有問題，是否是從液氮拿出直接放入溫水，還有培養(yǎng)箱，二氧化碳濃度，培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS １５-２０%，看看能否幫助貼壁，當(dāng)然也需要考慮血清問題，還有確信拿來的細(xì)胞沒問題?？偨Y(jié)２：首先應(yīng)該懷疑凍存，實(shí)際上復(fù)蘇出問題的可能非常小，因?yàn)椴僮骱?jiǎn)單，而且死板。１、你凍存的時(shí)候是不是消化的時(shí)間過長(zhǎng)，這是一般人所注意不到的，即使書上也不講這個(gè)問題，太長(zhǎng)的消化時(shí)間會(huì)讓細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)失去貼壁能力，表現(xiàn)為先貼后死，原因是在你復(fù)蘇的時(shí)候細(xì)胞已進(jìn)入凋亡程序，不可逆轉(zhuǎn)的死亡。２、你的凍存液好不好，是什么，甘油還是DMSO，質(zhì)量非常重要，否則也會(huì)死亡。３、你的凍存液的量加的是不是太多，ATCC推薦是不超過７%，大于５%，太多也不好。４、你在凍存的時(shí)候是不是把DMSO混均勻，這個(gè)有一些影響，但不算太大。５、你的凍存是否按部就班，就是所溫度梯度是不是把握嚴(yán)格，很多人容易忘卻這個(gè)事情，因?yàn)檫@個(gè)東西流程長(zhǎng)。６、如果你細(xì)胞污染，你是否能很快看到，我比我的導(dǎo)師能早一天看到污染。從這個(gè)角度講建議去除離心這步。７、你的細(xì)胞在凍存前是否過密。還有，不贊成孵箱污染這個(gè)概念的，所有在一個(gè)孵箱里的細(xì)胞都污染一個(gè)細(xì)菌的話，這個(gè)細(xì)菌是源于孵箱的，但這不代表孵箱污染，因?yàn)榉跸錈o論你如何處理都有大量的細(xì)菌，問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找，以后就不犯同樣的問題，這個(gè)很重要，不能靠猜，否則你就有可能細(xì)胞養(yǎng)絕最后換課題，這個(gè)見得太多了，別不當(dāng)會(huì)事。
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
KGN Thawing人卵巢顆粒細(xì)胞系
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁
血清必須貯存于–２０～-７０℃，若存放于４℃，請(qǐng)勿超過一個(gè)月。如果一次無法用完一瓶，可將４０～４５ml分裝于無菌５０ml離心管中，由于血清結(jié)凍時(shí)體積會(huì)增加約１０%，必須預(yù)留此膨脹體積之空間，否則易發(fā)生污染或容器凍裂之情形。一般廠商提供之血清為無菌，不需再無菌過濾。若發(fā)現(xiàn)血清有許多懸浮物，則可將血清加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾，勿直接過濾血清。瓶裝(５００ml)血清解凍步驟(逐步解凍法)：-２０℃或–７０℃至４℃冰箱溶解一天，至室溫下全溶后再分裝，一般以５０ml無菌離心管可分裝４０～４５ml。在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡)，使溫度與成分均一，減少沈淀的發(fā)生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解凍，因溫度改變太大，容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沈淀。勿將血清置于３７℃太久，若在３７℃放置太久，血清會(huì)變得混濁，同時(shí)血清中許多較不穩(wěn)定之成份亦會(huì)因此受到破壞，而影響血清之品質(zhì)。血清凝絮物：發(fā)生之原因有許多種，但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 變性及解凍后血清中存在之血纖維蛋白(fibrin) 造成，這些凝絮沈淀物不會(huì)影響血清本身之品質(zhì)。若欲減少這些凝絮沈淀物，可用離心３０００rpm，５min去除，或離心后上清液可以加入培養(yǎng)基中一起過濾。不建議用過濾步驟去除這些凝絮沈淀物，因?yàn)闀?huì)阻塞過濾膜。顯微鏡下觀察之“小黑點(diǎn)”：通常經(jīng)過熱處理之血清，沈淀物的形成會(huì)顯著的增多。有些沈淀物在顯微鏡下觀察像是“小黑點(diǎn)”，常會(huì)誤認(rèn)為血清遭受污染，而將血清放在３７℃中欲培養(yǎng)此“微生物”，但在３７℃環(huán)境下，又會(huì)使此沈淀物增多，更會(huì)誤認(rèn)為微生物之增殖，但以培養(yǎng)細(xì)菌之培養(yǎng)基檢測(cè)，又沒有污染。一般而言，此小黑點(diǎn)應(yīng)不會(huì)影響細(xì)胞之生長(zhǎng)，但若懷疑此血清之品質(zhì)，應(yīng)立即停用，更換另一批號(hào)的血清。
細(xì)胞形態(tài)特性：上皮細(xì)胞樣
SK-RC-52細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SC細(xì)胞、H4IIE細(xì)胞、HT 1080.T細(xì)胞
RPMI 8402細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs-611-T細(xì)胞、AML-2細(xì)胞、HT-1197細(xì)胞
WC00059細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM01232細(xì)胞、LTEPa2細(xì)胞、NCI H157細(xì)胞
HS-294-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSAEC1-KT細(xì)胞、TC-1[JHU-1]細(xì)胞、TALL1細(xì)胞
NBLS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CEF細(xì)胞、RT-BM 1細(xì)胞、RK 13細(xì)胞
RH35細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs606T細(xì)胞、SK-N-BE(2)C細(xì)胞、HCE-T細(xì)胞
Hs 746.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK_N_BE2C細(xì)胞、U87 MG細(xì)胞、Pt K2 (NBL-5)細(xì)胞
RBL-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RBVEC細(xì)胞、Hs 604.T細(xì)胞、GM00215細(xì)胞
RBE4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B95-8細(xì)胞、MCF-12F細(xì)胞、NCIH522細(xì)胞
GM07404A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU407細(xì)胞、HTori-3細(xì)胞、CTLL(2)細(xì)胞
CORL26細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM-239A細(xì)胞、KMS11細(xì)胞、MDAPC2B細(xì)胞
MAEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH820細(xì)胞、TF1細(xì)胞、RBL細(xì)胞
bEnd.3[BEND3]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1819細(xì)胞、FL83B細(xì)胞、BC3 H1細(xì)胞
Det 562細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Loucy細(xì)胞、G402細(xì)胞、NCI-H1882細(xì)胞
TCC Sup細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 695.T細(xì)胞、NCI H226細(xì)胞、IGR.OV1細(xì)胞
ES-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI/AML-2細(xì)胞、H-2135細(xì)胞、GM 2132細(xì)胞
hTERT-RPE-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SAS細(xì)胞、MASMC細(xì)胞、TE32細(xì)胞
SIRC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：YD-15細(xì)胞、RPE-hTERT細(xì)胞、NIH 3T3細(xì)胞
SW837細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MRC 5細(xì)胞、293AD細(xì)胞、EBC-1細(xì)胞
LED-WiDr細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SVOG細(xì)胞、H1404細(xì)胞、ARO-81細(xì)胞
C4I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：V 79-4細(xì)胞、SL-1細(xì)胞、MUM2B細(xì)胞
HBE135-E6E7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WERIRb1細(xì)胞、NFS 60細(xì)胞、GalK1細(xì)胞
HEK;293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC1954 BL細(xì)胞、B16/F1細(xì)胞、PaTu 8988 S細(xì)胞
PASMCS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：138MG細(xì)胞、P3 88 D1細(xì)胞、DLD1細(xì)胞
3T3 clone A31細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EC-109細(xì)胞、NB-4細(xì)胞、BDCM細(xì)胞
CW2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Epstein-Barr-2細(xì)胞、MJ細(xì)胞、HS 683T細(xì)胞
KGN Thawing人卵巢顆粒細(xì)胞系
MCA-205細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK-293 c18細(xì)胞、NCI-SNU-1040細(xì)胞、Nb2a細(xì)胞
NCIH1341細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L5178-R細(xì)胞、WRL68細(xì)胞、HCC-827細(xì)胞
Sp2/O-Ag14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MUVEC細(xì)胞、SJ-RH30細(xì)胞、H-87細(xì)胞
NOR10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-SNU-387細(xì)胞、SL-29細(xì)胞、UM-UC14細(xì)胞
KYSE 450細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Med 283細(xì)胞、WM239細(xì)胞、SNU354細(xì)胞
LTPA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH244細(xì)胞、HT-55細(xì)胞、NCIH1299細(xì)胞
S3 HeLa細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB 231細(xì)胞、MPVECs細(xì)胞、Melan-a細(xì)胞
WiDr/S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WERI-Rb1細(xì)胞、MDCK (NBL-2)細(xì)胞、Hs-343-T細(xì)胞
H1963細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK Col 1細(xì)胞、GA-10 clone 4細(xì)胞、MCF-7/ADR細(xì)胞
D-341 Med細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR8/ADR細(xì)胞、EOC-20細(xì)胞、HuCC-T1細(xì)胞
HepG2-luc細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKNO1細(xì)胞、TE 671細(xì)胞、NRK clone 49F細(xì)胞
MIA PaCa-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI H82細(xì)胞、SP2細(xì)胞、DoTc2-4510細(xì)胞
TE-85 clone 5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE6細(xì)胞、MRC-5細(xì)胞、FT-293細(xì)胞
huH 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Lewis lung carcinoma細(xì)胞、D283 Med細(xì)胞、343MG細(xì)胞
PC10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MIMVEC細(xì)胞、BNCL2細(xì)胞、NCI-H2106細(xì)胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EFM19細(xì)胞、DHL-2細(xì)胞、U937細(xì)胞
Factor Dependent Continuous-Paterson 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Capan-1細(xì)胞、HIT.T15細(xì)胞、MB 157細(xì)胞
Hela-Ap-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LC-2/ad細(xì)胞、HSKMC細(xì)胞、MKN1細(xì)胞
WM115F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WIL2S細(xì)胞、KPL-1細(xì)胞、LLC PK1細(xì)胞
HUT-28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P-815細(xì)胞、Hut292細(xì)胞、NMCG1細(xì)胞
CL MC/9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HFL 1細(xì)胞、Walker256-TC細(xì)胞、NOR-10細(xì)胞
SCL1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCTC clone 1469細(xì)胞、HTR-8細(xì)胞、RWPE1細(xì)胞
HCT.116細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SO-Rb 50細(xì)胞、P3-X63-Ag8-653細(xì)胞、SHSY-5Y細(xì)胞
LS 513細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H292細(xì)胞、Molm14細(xì)胞、XuanWei Lung Cancer-05細(xì)胞
AR41P細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW527細(xì)胞、P3/X63/Ag8.653細(xì)胞、EC-GI-10細(xì)胞
CT26.WT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1341細(xì)胞、SCC-25細(xì)胞、SN-12C細(xì)胞
NCI-H378細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WRL-68細(xì)胞、RC-4B細(xì)胞、KHYG細(xì)胞
H740細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Neuro2a細(xì)胞、SUM-190細(xì)胞、IOSE80細(xì)胞
16HBE14o-細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc 3.27細(xì)胞、SGC7901細(xì)胞、HeLa/S3細(xì)胞
JB6Cl30細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MLO-Y4細(xì)胞、H661細(xì)胞、DHL4細(xì)胞
CL11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuH6細(xì)胞、P3-X63.Ag8.653細(xì)胞、HL7702細(xì)胞
LC-1/sq細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc 10.05細(xì)胞、Scott細(xì)胞、EC-GI細(xì)胞
HTori-3.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BEL-7405細(xì)胞、TEC細(xì)胞、P3HR-1細(xì)胞
KGN Thawing人卵巢顆粒細(xì)胞系
SRA01/04細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM-149PT細(xì)胞、MAEC細(xì)胞、Colo-201細(xì)胞
MCF-12A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LSC-1細(xì)胞、SKHEP-1細(xì)胞、EB-2細(xì)胞
OVCAR5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-NSH細(xì)胞、C3H10T1/2 clone8細(xì)胞、H524細(xì)胞
ACC2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUDHL-8細(xì)胞、GM637細(xì)胞、EFO27細(xì)胞
OCI-Ly3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C8166細(xì)胞、WERI-Rb-1細(xì)胞、PLA801D細(xì)胞
LLC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JHH-7細(xì)胞、MDA-MB435細(xì)胞、JROECL33細(xì)胞
SUP-M2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW1271細(xì)胞、D283MED細(xì)胞、Baby Hamster Kidney-21細(xì)胞
RPMI 8402細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs-611-T細(xì)胞、AML-2細(xì)胞、HT-1197細(xì)胞
CCD-33Co細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HMC細(xì)胞、SKNEP-1細(xì)胞、SBC3細(xì)胞
OCI Ly10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCL-1細(xì)胞、HD-LM-2細(xì)胞、A2780-CP細(xì)胞
P3X63-Ag8.653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：8226/S細(xì)胞、PC14細(xì)胞、OV3121細(xì)胞
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