"SK-MEL-3 Thawing人惡性黑色素瘤細胞系
細胞背景資料：詳見相關文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
SK-MEL-3 Thawing人惡性黑色素瘤細胞系
細胞生長：貼壁
細胞凍存的步驟：１)選擇處于對數(shù)生長期的細胞，在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng)液去掉，用０.２５% 胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶，加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復吹打瓶壁上的細胞，使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(１０００r/min，１０分鐘)；２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培養(yǎng)基，于４℃預冷１５分鐘后，逐滴加入已無菌的DMSO或甘油，用吸管輕輕吹打使細胞均勻，細胞濃度為５×１０６～１×１０７/mL之間。(凍存培養(yǎng)液的配置是不是一定要用小牛血清呢？答案是不一定的，具體要看培養(yǎng)的細胞類型來選擇；３)將分裝上述細胞懸液于２ml凍存管中，每管０.２５ml。凍存管要將蓋子蓋緊，并標記好細胞名稱和凍存日期，同時作好登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數(shù))；４)將裝好細胞的凍存管放到凍存盒中，-８０℃冰箱過夜。；如果有程序降溫器(放在-８０℃冰箱過夜，放入液氮罐);或者可以在４℃，２h;然后轉到-２０℃，２h;-８０℃，２h;放入液氮罐；５)細胞凍存在液氮中可以長期保存，但為妥善起見，凍存半年后，取出一只凍存管細胞復蘇培養(yǎng)，觀察生長情況，然后再繼續(xù)凍存。
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：３-１：５傳代，２-３天換液１次。
細胞傳代培養(yǎng)實驗：體外培養(yǎng)的原代細胞或細胞株要在體外持續(xù)地培養(yǎng)就必須傳代，以便獲得穩(wěn)定的細胞株或得到大量的同種細胞，并維持細胞種的延續(xù)。培養(yǎng)的細胞形成單層匯合以后，由于密度過大生存空間不足而引起營養(yǎng)枯竭，將培養(yǎng)的細胞分散，從容器中取出，以１:２或１:３以上的比率轉移到另外的容器中進行培養(yǎng)，即為傳代培養(yǎng)；細胞“一代”指從細胞接種到分離再培養(yǎng)的一段期間，與細胞世代或倍增不同。在一代中，細胞培增３～６次。細胞傳代后，一般經過三個階段：游離期、指數(shù)增生期和停止期。常用細胞分裂指數(shù)表示細胞增殖的旺盛程度，即細胞群的分裂相數(shù)/１００個細胞。一般細胞分裂指數(shù)介于０.２％～０.５％，腫瘤細胞可達３～５％；細胞接種２～３天分裂增殖旺盛，是活力時期，稱指數(shù)增生期(對數(shù)生長期)，適宜進行各種試驗。實驗步驟：１.將長成的培養(yǎng)細胞從二氧化碳培養(yǎng)箱中取出，在超凈工作臺中倒掉瓶內的培養(yǎng)液，加入少許消化液。(以液面蓋住細胞為宜)，靜置５～１０分鐘。２.在倒置鏡下觀察被消化的細胞，如果細胞變圓，相互之間不再連接成片，這時應立即在超凈臺中將消化液倒掉，加入３～５ml新鮮培養(yǎng)液，吹打，制成細胞懸液。３.將細胞懸液吸出２ml左右，加到另一個培養(yǎng)瓶中并向每個瓶中分別加３ml左右培養(yǎng)液，蓋好瓶塞，送回二氧化碳培養(yǎng)箱中，繼續(xù)進行培養(yǎng)。一般情況，傳代后的細胞在２小時左右就能附著在培養(yǎng)瓶壁上，２～４天就可在瓶內形成單層，需要再次進行傳代。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
SK-MEL-3 Thawing人惡性黑色素瘤細胞系
細胞生長特性：貼壁生長
細胞復蘇基本方法：１．從液氮罐中取出安剖；有時因安剖未封嚴，浸入了液氮，取出后因安剖內液氮迅速氣化而發(fā)生爆炸，因此應帶有防護眼睛和手套。２．迅速放入盛有３６℃～３７℃水的搪瓷罐中，扣上蓋并不時搖動，盡快解凍。３．剪開紗布口袋，取出安剖，用７０％酒精擦拭消毒后，凈化臺上打開蓋，用吸管吸出細胞懸液，裝入離心管中，再補加１０ml培養(yǎng)液，吹打使細胞懸浮。４．低速離心（５００～１０００轉/分）５分鐘，取上清后再重復用培養(yǎng)液漂洗、離心。５．加入培養(yǎng)液適當稀釋后，再移裝入培養(yǎng)瓶中，置溫箱培養(yǎng)，次日更換一次培養(yǎng)液后再繼續(xù)培養(yǎng)。收到T２５ flask細胞時，處理方式為：在寄送過程中，為避免起泡造成細胞脫落死亡，T２５ flask均加滿培養(yǎng)基。請檢查flask外觀，并于顯微鏡下觀察細胞生長狀況和有無污染現(xiàn)象，若有任何問題，不要打開蓋子，請立即通知細胞實驗室。將原封之T２５ flask靜置于３７°C，５%CO２培養(yǎng)箱中，使細胞回溫至３７°C，并讓運送過程中少數(shù)脫落的細胞可再附著生長。隔天后，于無菌操作箱內取出flask內之培養(yǎng)基(取出之培養(yǎng)基可以再使用)，僅留約５-１０ml培養(yǎng)基于flask內，依一般培養(yǎng)方式再將細胞置入培養(yǎng)箱中，或細胞已長滿盤，則將細胞做傳代培養(yǎng)。
細胞形態(tài)特性：成纖維細胞
NCI-157細胞系相關產品：KP-N-RT細胞、NCIH378細胞、HCC0038細胞
HR1K細胞系相關產品：JB6 Cl 30-7b細胞、TM-4細胞、IB-RS2細胞
SK-RC-52細胞系相關產品：SC細胞、H4IIE細胞、HT 1080.T細胞
Hs 606細胞系相關產品：L132細胞、NCI-H2081細胞、NTERA-2 clone D1細胞
NCIH841細胞系相關產品：C33-A細胞、HARAB細胞、NCI-SNU-761細胞
U118-MG細胞系相關產品：SV-HUC細胞、brain-derived Endothelial cells.3細胞、GH 3細胞
BALL-1細胞系相關產品：HepG2細胞、SACC-LM細胞、LCLC-103H細胞
NCI-H23細胞系相關產品：HEL-92細胞、H676細胞、VSMC細胞
WEHI164細胞系相關產品：RMS 13細胞、BL2141細胞、HCC0202細胞
WM-239-A細胞系相關產品：Daudi細胞、Jurkat (clone E6-1)細胞、MKN-28細胞
P30-OHKUBO細胞系相關產品：BALB/3T3 (clone A31)細胞、SW13細胞、Renal Carcinoma細胞
NSH細胞系相關產品：THC-8307細胞、LA-N-6細胞、HEK 293 EBNA細胞
Loucy細胞系相關產品：Hep G2/C3A細胞、Mc Ardle 7777細胞、Hs294T細胞
AML 12細胞系相關產品：Kit225 K6細胞、NCI-H1882細胞、NCIN87細胞
McA-RH 7777細胞系相關產品：H157細胞、Eca-109細胞、SW1222細胞
UM-UC-14細胞系相關產品：CF-1 MEF細胞、NIH 3T3細胞、HCC1500細胞
HPB/ALL細胞系相關產品：SP-2/0-AG14細胞、H-1299細胞、HGBEC細胞
Doubling time: ~50 hours (ATCC).細胞系相關產品：OV1/P細胞、HFL細胞、RBSMC細胞
NCIH1299細胞系相關產品：H1650_CO細胞、JS1細胞、Swiss 3T6細胞
Bat lung細胞系相關產品：LTEP-sm細胞、SHI1細胞、H-187細胞
AM38細胞系相關產品：RPMI8226/S細胞、VMRCLCD細胞、Co 205細胞
AM38細胞系相關產品：RPMI8226/S細胞、VMRCLCD細胞、Co 205細胞
COLO-680N細胞系相關產品：HEK-293FT細胞、KP 4細胞、HGSMC細胞
MSTO211H細胞系相關產品：NFS-60細胞、SUM-159PT細胞、CATH-a細胞
NCI-522細胞系相關產品：SR細胞、He La細胞、TE14細胞
BLO 11細胞系相關產品：COR-L105細胞、HEK-2細胞、MKN28細胞
SK-MEL-3 Thawing人惡性黑色素瘤細胞系
SACC-LM細胞系相關產品：HIEC6細胞、HCC-1187細胞、Tu-177細胞
University of Arizona Cell Culture-812細胞系相關產品：WEHI 231細胞、HCC-1143細胞、NCIH460細胞
C4-2 B細胞系相關產品：AR41P細胞、EB-3細胞、Panc-813細胞
U-373 MG細胞系相關產品：L-132細胞、Huh7.5.1細胞、GS9L細胞
NCI-H1618細胞系相關產品：3396細胞、H-1417細胞、SNU-1細胞
SW-756細胞系相關產品：CD-18細胞、H250細胞、PTK2細胞
CAL27細胞系相關產品：MDA MB 231細胞、R.K.13細胞、TO175T細胞
NBL-2細胞系相關產品：NPC-039細胞、Farage Original Line細胞、EFM192B細胞
F442-A細胞系相關產品：MOLT-16細胞、DH 82細胞、UCLA-SO-M14細胞
HCT8細胞系相關產品：P3 NS1 Ag4細胞、G361mel細胞、MDA MB231細胞
BNCL2細胞系相關產品：H647細胞、IGR.OV1細胞、U-251_MG細胞
HBVSMC細胞系相關產品：CAL-27細胞、Kelly細胞、OCI AML4細胞
Centre Antoine Lacassagne-85-1細胞系相關產品：CHP-212細胞、Caco2BBe細胞、MDA330細胞
RPMI no 8226細胞系相關產品：NCIH82細胞、KYSE-450細胞、ARH77細胞
HT 1376.T細胞系相關產品：U138細胞、hADSCs細胞、OVCA432細胞
U-343MG細胞系相關產品：NCI-SNU-601細胞、SW480E細胞、DB細胞
NRK-49F細胞系相關產品：SK-MEL 28細胞、SK-N-BE細胞、MCCAR細胞
Pro-5WgaRI3C細胞系相關產品：NCI-SNU-423細胞、NCIH69細胞、Hs 934.T細胞
Line 870 Emory University-4細胞系相關產品：CCD841CoTr細胞、U343細胞、Wien-133細胞
HO-8910細胞系相關產品：H2081細胞、LA-795細胞、SUM159PT細胞
NK92細胞系相關產品：HSC5細胞、PC-9/S1細胞、N1S1細胞
BJA-B-1細胞系相關產品：GES1細胞、OVCAR-10細胞、SLMT-1細胞
CMT 167細胞系相關產品：LLC-PK(1)細胞、VERO76細胞、RL95-2細胞
UO.31細胞系相關產品：MDA-MB-134 VI細胞、GB-1細胞、NBL-1細胞
IGROV細胞系相關產品：HCT8細胞、NFHIOSE-80細胞、PA-1細胞
JIMT-1細胞系相關產品：TFK1細胞、H-1568細胞、BJA-B細胞
PLC PRF 5細胞系相關產品：RLE-6TN細胞、U-2932細胞、DMS-53細胞
CCRF-CEM C7細胞系相關產品：1301細胞、Colon 26細胞、Alexander細胞
HCC-1954BL細胞系相關產品：Walker256-TC細胞、WSUDLCL2細胞、MEF細胞
HET1A細胞系相關產品：COR-L279細胞、Mv 1 Lu細胞、HAVSMC細胞
Swiss-3T3細胞系相關產品：H-1688細胞、Capan2細胞、HCC1395細胞
A172細胞系相關產品：OCI-Ly 8細胞、SN12C-PM6細胞、RPMI-7951細胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-4細胞系相關產品：MDA-MB361細胞、SW-837細胞、Cloudman M3細胞
SK-MEL-3 Thawing人惡性黑色素瘤細胞系
10T1/2細胞系相關產品：BGC-823細胞、MT2細胞、NTERA2細胞
HCC-202細胞系相關產品：RT4細胞、NB1-RGB細胞、ND7/23細胞
RIMEC細胞系相關產品：AKR細胞、H-2081細胞、H8細胞
NK92MI細胞系相關產品：KYSE 450細胞、Biologics Standards-Cercopithecus-1細胞、Lu99A細胞
EST81細胞系相關產品：HCC-1954細胞、WB-F344細胞、OVCAR.3細胞
MES23.5細胞系相關產品：NCI-SNU-1040細胞、L Wnt-3A細胞、SN12CPM6細胞
CAL 78細胞系相關產品：SNU-387細胞、U138-MG細胞、MB49細胞
RAW-264.7細胞系相關產品：HCC1937細胞、G361細胞、NCIH2029細胞
MDA-MB-468細胞系相關產品：V79-4細胞、H82細胞、Ra No. 1細胞
H1915細胞系相關產品：MNNG/HOS細胞、AD293細胞、SCC 25細胞
Evsa T細胞系相關產品：SF-539細胞、U138細胞、IOSE 80細胞
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