"SK-MEL-2 Thawing人惡性黑色素瘤細胞系
細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
SK-MEL-2 Thawing人惡性黑色素瘤細胞系
細胞生長：貼壁
細胞凍存的步驟：１)選擇處于對數(shù)生長期的細胞，在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng)液去掉，用０.２５% 胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶，加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細胞，使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產(chǎn)細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(１０００r/min，１０分鐘)；２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培養(yǎng)基，于４℃預(yù)冷１５分鐘后，逐滴加入已無菌的DMSO或甘油，用吸管輕輕吹打使細胞均勻，細胞濃度為５×１０６～１×１０７/mL之間。(凍存培養(yǎng)液的配置是不是一定要用小牛血清呢？答案是不一定的，具體要看培養(yǎng)的細胞類型來選擇；３)將分裝上述細胞懸液于２ml凍存管中，每管０.２５ml。凍存管要將蓋子蓋緊，并標記好細胞名稱和凍存日期，同時作好登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數(shù))；４)將裝好細胞的凍存管放到凍存盒中，-８０℃冰箱過夜。；如果有程序降溫器(放在-８０℃冰箱過夜，放入液氮罐);或者可以在４℃，２h;然后轉(zhuǎn)到-２０℃，２h;-８０℃，２h;放入液氮罐；５)細胞凍存在液氮中可以長期保存，但為妥善起見，凍存半年后，取出一只凍存管細胞復(fù)蘇培養(yǎng)，觀察生長情況，然后再繼續(xù)凍存。
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：３-１：６傳代，２-３天換液１次。
細胞傳代培養(yǎng)實驗：體外培養(yǎng)的原代細胞或細胞株要在體外持續(xù)地培養(yǎng)就必須傳代，以便獲得穩(wěn)定的細胞株或得到大量的同種細胞，并維持細胞種的延續(xù)。培養(yǎng)的細胞形成單層匯合以后，由于密度過大生存空間不足而引起營養(yǎng)枯竭，將培養(yǎng)的細胞分散，從容器中取出，以１:２或１:３以上的比率轉(zhuǎn)移到另外的容器中進行培養(yǎng)，即為傳代培養(yǎng)；細胞“一代”指從細胞接種到分離再培養(yǎng)的一段期間，與細胞世代或倍增不同。在一代中，細胞培增３～６次。細胞傳代后，一般經(jīng)過三個階段：游離期、指數(shù)增生期和停止期。常用細胞分裂指數(shù)表示細胞增殖的旺盛程度，即細胞群的分裂相數(shù)/１００個細胞。一般細胞分裂指數(shù)介于０.２％～０.５％，腫瘤細胞可達３～５％；細胞接種２～３天分裂增殖旺盛，是活力時期，稱指數(shù)增生期(對數(shù)生長期)，適宜進行各種試驗。實驗步驟：１.將長成的培養(yǎng)細胞從二氧化碳培養(yǎng)箱中取出，在超凈工作臺中倒掉瓶內(nèi)的培養(yǎng)液，加入少許消化液。(以液面蓋住細胞為宜)，靜置５～１０分鐘。２.在倒置鏡下觀察被消化的細胞，如果細胞變圓，相互之間不再連接成片，這時應(yīng)立即在超凈臺中將消化液倒掉，加入３～５ml新鮮培養(yǎng)液，吹打，制成細胞懸液。３.將細胞懸液吸出２ml左右，加到另一個培養(yǎng)瓶中并向每個瓶中分別加３ml左右培養(yǎng)液，蓋好瓶塞，送回二氧化碳培養(yǎng)箱中，繼續(xù)進行培養(yǎng)。一般情況，傳代后的細胞在２小時左右就能附著在培養(yǎng)瓶壁上，２～４天就可在瓶內(nèi)形成單層，需要再次進行傳代。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
SK-MEL-2 Thawing人惡性黑色素瘤細胞系
細胞生長特性：貼壁生長
細胞的凍存：為避免污染造成的損失，最小化連續(xù)細胞系的遺傳改變和避免有限細胞系的老化和轉(zhuǎn)化，需要凍存哺乳細胞。凍存細胞前，細胞應(yīng)該特性化并檢查是否污染。有幾種普通培養(yǎng)基用來凍存細胞。對于包含有血清的培養(yǎng)基，成分可能如下：包含１０%甘油的完全培養(yǎng)基；包含１０%二甲基亞砜(DMSO)的完全培養(yǎng)基；５０%細胞條件培養(yǎng)基和５０%含有１０%甘油的新鮮培養(yǎng)基或５０%細胞條件培養(yǎng)基和５０%含有１０%二甲基亞砜的新鮮培養(yǎng)基。對于無血清培養(yǎng)基，一些普通的培養(yǎng)基成分可能是：５０%細胞條件無血清培養(yǎng)基和５０%包含有７.５%二甲基亞砜的新鮮的無血清培養(yǎng)基或包含有７.５%二甲基亞砜和１０%細胞培養(yǎng)級BSA的新鮮無血清培養(yǎng)基。懸浮細胞凍存：計數(shù)將要凍存的活細胞。細胞應(yīng)該處于對數(shù)生長期。以大約２００～４００g離心５分鐘沉淀細胞，使用移液管移去上清到最小體積，不要攪亂細胞。以１×１０(７)到５×１０(７)細胞/ml密度，在包含有血清的冷凍培養(yǎng)基中再次懸浮細胞，或者以０.５×１０(７)到１×１０(７)在無血清培養(yǎng)基中，再次懸浮細胞。分裝進凍存管，將凍存管置于濕冰上或放入４℃冰箱中，５分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細胞以１℃/分鐘進行冷凍，可以通過可編程序的冷凍器進行或者把隔離盒中的凍存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。貼壁細胞凍存：使用分離試劑從基層分離細胞，分離時盡可能溫和，使對細胞的損傷減少到最小。在完全生長培養(yǎng)基中，再次懸浮分離細胞，確定有活力細胞數(shù)。以大約２００g離心５分鐘沉淀細胞。使用移液管移去上清到最小體積，不要攪亂細胞。以５×１０(６)到１×１０(６)細胞/ml密度，在凍存液中懸浮細胞。分裝進凍存管，將凍存管置于濕的冰上或放入４℃冰箱中，５分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細胞以１℃/分鐘進行冷凍，可以通過可編程序的冷凍器進行或者把隔離盒中的凍存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。
細胞形態(tài)特性：多邊形的
KRCY細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDCK-II細胞、Ly18細胞、MDA231-LM2細胞
A2780/CP細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HGC-27細胞、Hs-746T細胞、SNU-601細胞
COR L279細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LAN-1細胞、BLO 11細胞、MDA-157細胞
Hs 852.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IR 983F細胞、HS852.T細胞、NTC-200細胞
HeLa/DDP細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 320細胞、KATO 3細胞、L-6 myoblast細胞
SMMC 7721細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EBNA293細胞、NCIH1792細胞、H2347細胞
SUDHL1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GC-1 spg細胞、ZR7530細胞、Huh 7.5.1細胞
SGC-996細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 604.T細胞、HCET細胞、LAN1細胞
SNU869細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human Corneal Endothelial Cells-12細胞、MNNG/HOS細胞、A2780CP70細胞
U2-OS細胞系相關(guān)產(chǎn)品：bEnd3細胞、SK-RC-52細胞、OAW-42細胞
MN-9D細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mono Mac6細胞、BT549細胞、H-2405細胞
RPMI-7666細胞系相關(guān)產(chǎn)品：T HEECs細胞、NTERA-2/D1細胞、Hs281T細胞
HCC-1937細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RBMEC細胞、OE21細胞、MDAMB330細胞
MDA-MB-175細胞系相關(guān)產(chǎn)品：293T/17細胞、MDA-MB-453細胞、UCH-1細胞
NG-108-15細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TC-1 [Mouse lung]細胞、CAL62細胞、Primary Liver Carcinoma/Poliomyelitis Research Foundation/5細胞
H-774細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM00637細胞、HSC-3細胞、HPaSteC(HPSC)細胞
COLO 320 HSR細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DR2R1610細胞、E0771細胞、H-498細胞
HOP 62細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU886細胞、NCI-SNU-16細胞、H-1105細胞
U251細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human Lung Microvascular Endothelial Cell line-5a細胞、H-2444細胞、B16-F10-BL6細胞
RTMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PL 45細胞、J-111細胞、KMH-2細胞
PaTu 8988 S細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc 02細胞、PLC細胞、NCTC clone 929細胞
PaTu 8988 S細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc 02細胞、PLC細胞、NCTC clone 929細胞
ZR-75-30細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EBC-1/original細胞、SiHa細胞、EAC-E2G8細胞
ssMCF-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-SNU-C1細胞、NCI.H522細胞、AZ 521細胞
J774.A1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DMS114細胞、UMR 106細胞、RGC-6細胞
EAhy926細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs.27細胞、C-33 A細胞、NCI-322細胞
SK-MEL-2 Thawing人惡性黑色素瘤細胞系
A 2058細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-N-BE2C細胞、G-292, clone A141B1細胞、LS 174 T細胞
CTLL-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：M14細胞、CemT4細胞、KLM-1細胞
Centre Antoine Lacassagne-39細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mv 1 Lu (NBL-7)細胞、High 5細胞、CD 18細胞
A-172MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HLEpiC細胞、SKG IIIa細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-361細胞
McCoy B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU16細胞、NCIH1373細胞、BEL-7405細胞
H1385細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MM.1S細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-175-VIII細胞、HeLa229細胞
DMS114細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LL/2細胞、Nb 2細胞、HCC-9204細胞
BE(2)-M17細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-774細胞、A2780細胞、beta-TC6細胞
H841細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16 F1細胞、MonoMac1細胞、TE-671細胞
RKO-AS-45-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SGC996細胞、SuDHL 5細胞、Vero 76 clone E6細胞
OV2008細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NS1-Ag4/1細胞、HRC-99細胞、NCI-H727細胞
hADSCs細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CLONE M3細胞、MESSA Dx5細胞、J82COT細胞
BT 20細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-HUT-460細胞、NE-4C細胞、NCI-H2122細胞
UMC11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-373-MG細胞、KRC/Y細胞、NTERA-2 cl.D1細胞
GM-637細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BL1339細胞、CHAGOK1細胞、AsPC-1細胞
MEL細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RS411細胞、QGP1細胞、TE 85 ClF-5細胞
PL 45細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RK 13細胞、HC-11細胞、Human Embryo Lung-1細胞
OV1-P細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H740細胞、SK-ChA-1細胞、UPCI:SCC154細胞
PANC-03-27細胞系相關(guān)產(chǎn)品：hTERT-HME-1細胞、G 401細胞、HEK.EBNA細胞
38C13細胞系相關(guān)產(chǎn)品：YH細胞、P31-FUJ細胞、Tn5 B1-4細胞
NCI-H1876細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-647細胞、RBL細胞、RKO細胞
NKT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MASMC細胞、Tca8113細胞、SKMEL5細胞
CCD-966SK細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3X63Ag8653細胞、H-1836細胞、PJ34細胞
HuTu 80細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BT483細胞、MPC-83細胞、Nakata-1細胞
HEK 293A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ESC-410細胞、LC-1/sq細胞、RGC5細胞
Hs934T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Kit-225-K6細胞、hRPTC細胞、HEK293F細胞
NCI-H2141細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KTA-7細胞、Ca9-22細胞、BIC-1細胞
HS852.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEL-299細胞、NCIH1915細胞、Fetal Rhesus Kidney-4細胞
VM-CUB-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BT-483細胞、SF-126細胞、AU565細胞
MFE-296細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PIG1細胞、H-747細胞、A375mel細胞
Tb 1 Lu (NBL-12)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：VMM-5A細胞、SU-DHL-2細胞、RASMCs細胞
KLE細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Chinese Hamster Ovary細胞、T-CAM2細胞、Madison lung細胞
OS-732細胞系相關(guān)產(chǎn)品：6T-CEM細胞、H-EMC-SS細胞、M-1細胞
SK-MEL-2 Thawing人惡性黑色素瘤細胞系
U266BL細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HP615細胞、RMG1細胞、NOZ細胞
CHP 100細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PANC3.27細胞、RWPE-1細胞、Hs-611-T細胞
NCTC clone 1469細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 729T細胞、Centre Antoine Lacassagne-27細胞、WM 239細胞
Neukoplast細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HKF細胞、Laboratory of Allergic Diseases 2細胞、TOV21G細胞
NCI-H2141細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KTA-7細胞、Ca9-22細胞、BIC-1細胞
NCI H23細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-747細胞、C4-2B細胞、SCCVII細胞
OSC19細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BL-6細胞、SEG-1細胞、SU86_86細胞
GM06141細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RBL-I細胞、THP 1細胞、NCI N87細胞
Hs819T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS-766-T細胞、U2OS細胞、INS1-E細胞
NCI-SNU-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-78細胞、MGSMC細胞、MH7A細胞
OsACL細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Instituto Biologico-Rim Suino-2細胞、LU65細胞、SUM-159-PT細胞
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