"LK-2 Thawing人肺癌細胞系
細胞背景資料：詳見相關文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
LK-2 Thawing人肺癌細胞系
細胞生長：貼壁
解凍細胞常見實驗問題分析及推薦解決方法：在解凍凍存細胞時，發(fā)現(xiàn)會出現(xiàn)存活率低、大量細胞碎片及生長緩慢等問題，究竟是什么原因導致，我們該怎么進行解決？以下是國內(nèi)外細胞培養(yǎng)專家針對解凍細胞實驗問題，總結的一些解決方案！出現(xiàn)低存活率的可能原因及推薦解決方案如下：１)解凍過程中細胞裂解，推薦的解決方案：可預期到一定量的細胞死亡，因此細胞的濃度應足夠高，考慮到這一損失。起始濃度為１*１０(６)至１*１０(７)細胞/毫升；２)解凍過程中的問題，推薦的解決方案：在-７０℃至-８０℃下保存冷凍的培養(yǎng)物，保存時間為１-５天，但這不是保存的方法。在３７℃充分解凍后應立即開始培養(yǎng)；３)對冷凍液過敏，推薦的解決方案：A.完全或部分更換培養(yǎng)基，減少培養(yǎng)基中冷凍液的量。在２４小時后更換培養(yǎng)液體可全部去除冷凍液。B.留出更多時間供培養(yǎng)物恢復。有時細胞需要幾周時間才能形成單層或密集的懸浮物，取決于冷凍時細胞的年齡或傳代次數(shù)或在生長階段中的位置。冷凍的條件在對數(shù)期；４)被冷凍的原種細胞的年齡或冷凍時培養(yǎng)物的年齡，推薦的解決方案：解凍最近冷凍的細胞。細胞處于冷凍狀態(tài)的時間越長，存活率越低。檢查冷凍細胞的時間和方法。在冷凍時細胞應處于對數(shù)期。
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
懸浮細胞不容易轉染：懸浮細胞是指細胞生長不依賴支持物表面，在培養(yǎng)液中呈懸浮狀態(tài)生長，如淋巴細胞。在實驗室經(jīng)常會遇到懸浮細胞的轉染，其和貼壁細胞轉染還是有很大不同的。目前大多數(shù)實驗室用的是脂質體類的轉染試劑，脂質體轉染是基于電荷吸引原理，先形成脂質體-DNA復合物，散布在細胞周圍，然后通過細胞的內(nèi)吞作用，將目的基因導入細胞內(nèi)，而脂質體復合物與貼壁細胞的接觸機會比懸浮細胞高出很多倍，所以，脂質體轉染時懸浮細胞的轉染效率要明顯低于貼壁細胞。其次，脂質體試劑的毒性較大，這就使得懸浮細胞的轉染更為困難了。另外，懸浮細胞不易培養(yǎng)，易死亡，也給細胞轉染造成了一定的困難。為了提高懸浮細胞的轉染效率，可以使用非脂質體的轉染試劑，如納米材料的。也可以使用電轉染方法，針對懸浮細胞等難轉染細胞還是挺不錯的，電擊對細胞有一定的損傷，選用具有細胞膜修復功能的電轉染試劑，可以將電擊對細胞的傷害降到最低，懸浮細胞不易轉染，選對試劑及良好的細胞培養(yǎng)環(huán)境才是關鍵。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
LK-2 Thawing人肺癌細胞系
細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分
我常看到一個比較復雜的四步消化法，這個挺有意思，我也是次聽說，應該是網(wǎng)友自己發(fā)展出來的方法，很有參考價值。但我估計這個方法可能對付少數(shù)非常怪異的細胞才需要這么復雜的程序。我目前養(yǎng)過的近３００株細胞里面，還沒遇到這么怪異的。比如Caco２其實是很好消化的細胞，不需要胰酶孵育即可，只是有點成片分布。不要以為成片分布是自己沒養(yǎng)好，這個視細胞而定。如果和標準形態(tài)不一致，那可能是自己沒消化好導致的，但如果消化方法正確，仍然成片分布，甚至完全吹打成單細胞懸液，貼壁后仍然成片分布，這是細胞的特性，是因為貼壁過程中重新聚集了。這個時候你拼了命要去讓它均勻分布，你的細胞之后會對你越來越不好；比較難消化的細胞(潤洗方法５min還不能消化)，就以colon cancer為例，比如HCT１５, LS４１１和KM１２，這樣的細胞一般需要用少量胰酶孵育，但也不需要很多，一般１００ mm dish，一次最多加入５００ul，就足夠了，一般我加３００ul。即使這樣難消化的細胞，一般不超過５min，即可見細胞成片移動，就應該停止消化。一些正常細胞也會有難消化的時候，比如tsDC細胞，但也只要用少量胰酶孵育，３min左右即可看到成片沙狀移動。
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
NCI-H2228細胞系相關產(chǎn)品：HEM細胞、CaES-17細胞、Jiyoye(P-2003)細胞
ECC12細胞系相關產(chǎn)品：HEK-EBNA細胞、U-118 MG細胞、Tadarida brasiliensis 1 lung細胞
EBC-1細胞系相關產(chǎn)品：HCMEC細胞、Institute for Medical Research-32細胞、NCI-H650細胞
SKUT-1細胞系相關產(chǎn)品：H-498細胞、Kit225細胞、Ra #1細胞
BHT-101細胞系相關產(chǎn)品：MSTO211H細胞、DV-90細胞、JeKo 1細胞
NIH 3T6細胞系相關產(chǎn)品：CP70細胞、H1373細胞、SKNBE(2c)細胞
HOS-MNNG細胞系相關產(chǎn)品：GB1細胞、HUC細胞、H187細胞
HRC-99細胞系相關產(chǎn)品：CW-2細胞、HA1800細胞、MO59J細胞
NCI-H1703細胞系相關產(chǎn)品：LC1sq細胞、NH-6細胞、OVCAR3細胞
HCT 15細胞系相關產(chǎn)品：COV 434細胞、NCIH2170細胞、MSTO211H細胞
CAL78細胞系相關產(chǎn)品：MFE-296細胞、Hs 737.T細胞、OEC19細胞
USMC細胞系相關產(chǎn)品：UT7細胞、Hs 840.T細胞、HEK-293-F細胞
FOXNY細胞系相關產(chǎn)品：B16/F1細胞、P815細胞、251 MG細胞
SK 1細胞系相關產(chǎn)品：Colo-206F細胞、SW 756細胞、Hep 3B2細胞
SK-MEL-MeWo細胞系相關產(chǎn)品：SP2-0-Ag14細胞、SKBr3細胞、SKNEP-1細胞
Y79細胞系相關產(chǎn)品：CHL-1細胞、HCC2185細胞、FF-WT-BJ細胞
H-295R細胞系相關產(chǎn)品：SNU-182細胞、HCMEC細胞、UCH1細胞
H-838細胞系相關產(chǎn)品：CCLP-1細胞、ACC3細胞、IMR 90細胞
CG-4細胞系相關產(chǎn)品：Panc 4.03細胞、K562/ADP細胞、H647ell細胞
BNL-CL.2細胞系相關產(chǎn)品：NW-MEL-38細胞、HSF細胞、P31-FUJ細胞
Hs 888Lu細胞系相關產(chǎn)品：Ramos 2G6 4C10細胞、KP2細胞、KYSE70細胞
Hs 888Lu細胞系相關產(chǎn)品：Ramos 2G6 4C10細胞、KP2細胞、KYSE70細胞
KMBC細胞系相關產(chǎn)品：MKN-28細胞、TE 85 ClF-5細胞、Neukoplast細胞
P30-OHKUBO細胞系相關產(chǎn)品：BALB/3T3 (clone A31)細胞、SW13細胞、Renal Carcinoma細胞
Pro-Lec1.3C細胞系相關產(chǎn)品：3T3 clone A31細胞、UACC 812細胞、NCI-H1770細胞
BC3 H1細胞系相關產(chǎn)品：Hs-27細胞、Los Angeles Prostate Cancer-4細胞、LAC細胞
LK-2 Thawing人肺癌細胞系
H2227細胞系相關產(chǎn)品：ARPE19細胞、TW01細胞、COLO 741細胞
PLB985細胞系相關產(chǎn)品：Pro-5WgaRI3C細胞、P30-OHKUBO細胞、Panc-05.04細胞
CHO K1細胞系相關產(chǎn)品：CAL 78細胞、NCIH1623細胞、NCI-H82細胞
CA-OV-3細胞系相關產(chǎn)品：HIT T15細胞、VK2 (E6/E7)細胞、L6565細胞
Murine Carcinoma-38細胞系相關產(chǎn)品：SNU-739細胞、95-D細胞、87MG細胞
HCC0095細胞系相關產(chǎn)品：Ha Fe細胞、L-1210細胞、VMRCLCD細胞
NCI N87細胞系相關產(chǎn)品：MGC-803細胞、MV4-11細胞、NCIH208細胞
MCF-7B細胞系相關產(chǎn)品：Jurkat E6.1細胞、TFK-1細胞、NCIH1703細胞
RMG-1細胞系相關產(chǎn)品：V79-GalK1細胞、LOU-NH-91細胞、OSC-19細胞
SUIT-2細胞系相關產(chǎn)品：K1735細胞、GalK 1細胞、HLCL9B10細胞
253J-BV細胞系相關產(chǎn)品：VK2/E6E7細胞、RPE-1細胞、Michigan Cancer Foundation-7細胞
GM03569B細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H1819細胞、HCC1588細胞、MOLT 3細胞
H-1734細胞系相關產(chǎn)品：JM-1細胞、3T3NIH細胞、HBL-100細胞
T98-G細胞系相關產(chǎn)品：H-28細胞、D341 Med細胞、OV1/P細胞
DLD-1細胞系相關產(chǎn)品：HCC1419細胞、BGC-823細胞、LS1034細胞
NCIH847細胞系相關產(chǎn)品：SUPM2細胞、Pa16C細胞、H23細胞
NCTC-929細胞系相關產(chǎn)品：SW1417細胞、HGSMC細胞、HO8910PM細胞
Dunn LM8細胞系相關產(chǎn)品：343MG細胞、Fortner's melanotic melanoma #3細胞、BMSCs（mBMSCs）細胞
WEHI 164 TC細胞系相關產(chǎn)品：Hs683T細胞、OVCA 432細胞、MARC 145細胞
Human Liver-7702細胞系相關產(chǎn)品：JiyoyeP-2003細胞、ATDC5細胞、LICR-HN-6細胞
WM 239A細胞系相關產(chǎn)品：WEHI 164 TC細胞、NCI-H1672細胞、JHH-2細胞
b.End3細胞系相關產(chǎn)品：Calu 6細胞、C1498細胞、8305-C細胞
CZ-1細胞系相關產(chǎn)品：ST細胞、EFO-27細胞、HMC細胞
SCC 25細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H1650細胞、hESC細胞、PAN 02細胞
HSC-5 [Human skin squamous cell carcinoma]細胞系相關產(chǎn)品：Y3M細胞、HPAF2細胞、MLM細胞
SGC-7901細胞系相關產(chǎn)品：NCIH596細胞、NK-92細胞、V-79-4細胞
GM637A細胞系相關產(chǎn)品：HO-8910 PM細胞、686LN-M4e細胞、Hs 746.T細胞
L-M (TK-)細胞系相關產(chǎn)品：Sp2/0細胞、SKGT2細胞、SKG IIIa細胞
Hs 729T細胞系相關產(chǎn)品：MDA175細胞、3T3-F442A細胞、SW1463細胞
CCF-STTG1細胞系相關產(chǎn)品：MT-2J細胞、ME 180細胞、NCI-H1184細胞
PLA802細胞系相關產(chǎn)品：CaES-17細胞、HS-5細胞、CCD-19Lu細胞
Karpas-299細胞系相關產(chǎn)品：HCM細胞、SHIN-3細胞、Rat Lung Epithelial-6-T-antigen Negative細胞
brain-derived Endothelial cells.3細胞系相關產(chǎn)品：NH-6細胞、RPMI 7951細胞、OCI-Ly 3細胞
LK-2 Thawing人肺癌細胞系
QBC-939細胞系相關產(chǎn)品：RC13細胞、TSUpr1細胞、P31/Fujioka細胞
OVCAR-10細胞系相關產(chǎn)品：IAR20細胞、NK-92MI細胞、Hs 895.T細胞
OVCAR-10細胞系相關產(chǎn)品：IAR20細胞、NK-92MI細胞、Hs 895.T細胞
NCI-SNU-761細胞系相關產(chǎn)品：293細胞、KM12細胞、SNU-182細胞
KBM-7細胞系相關產(chǎn)品：KY-50細胞、GS-9L細胞、SK-N-MC細胞
KY180細胞系相關產(chǎn)品：SW1353細胞、SW 1088細胞、RKO-E6細胞
SUM 102細胞系相關產(chǎn)品：Swiss-3T3細胞、ID8/MOSEC細胞、NFS60細胞
IM-95細胞系相關產(chǎn)品：A-204細胞、AMJ2-C8細胞、JB6 Cl 30-7b細胞
NCI-BL2141細胞系相關產(chǎn)品：UO31細胞、H3255_DA細胞、HO8910/PM細胞
H-1915細胞系相關產(chǎn)品：S180細胞、NPC-TW039細胞、Pt-K2細胞
SF763細胞系相關產(chǎn)品：H510A細胞、MONO-MAC 6細胞、PBMC細胞
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