"NCI-H748 Thawing人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
NCI-H748 Thawing人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系
細(xì)胞生長：貼壁
傳代培養(yǎng)及其操作步驟：原代細(xì)胞培養(yǎng)成功以后，需要進(jìn)行分離培養(yǎng)，否則細(xì)胞會因生存空間不足或密度過大，營養(yǎng)障礙，影響細(xì)胞生長。細(xì)胞由原培養(yǎng)瓶內(nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細(xì)胞允許培養(yǎng)的細(xì)胞擴(kuò)增(形成細(xì)胞株)，可以進(jìn)行細(xì)胞克隆，易于保存，但可能喪失一些特殊的細(xì)胞和分化特征。傳代細(xì)胞形成細(xì)胞株的利處在于提供了大量持久的實(shí)驗(yàn)材料，便于實(shí)驗(yàn)。【操作步驟】１)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液；２)向瓶內(nèi)加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜；３)置３７℃孵箱或室溫(２５℃溫度)下進(jìn)行消化，２~５min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)回縮、細(xì)胞間隙增大后，應(yīng)立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶內(nèi)加入Hanks液少量，輕輕轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶，把殘留消化液沖掉，然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液，終止消化；５)使用彎頭吸管，吸取瓶內(nèi)培養(yǎng)液，按順序反復(fù)輕輕吹打瓶壁細(xì)胞，使之從瓶壁脫離形成細(xì)胞懸液。吹打時(shí)動作要輕柔，以防用力過猛損傷細(xì)胞；６)用計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)后，分別接種于新的培養(yǎng)瓶中，置CO２培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)；７)細(xì)胞培養(yǎng)換液時(shí)間應(yīng)根據(jù)細(xì)胞生長的狀態(tài)和實(shí)驗(yàn)要求來確定。一般２～３d后應(yīng)換一次生長液。待細(xì)胞鋪滿器皿底面，即可使用；也可繼續(xù)傳代擴(kuò)大培養(yǎng)或換成維持液。【注意事項(xiàng)】１)掌握好細(xì)胞消化的時(shí)間，消化時(shí)間過短時(shí)，細(xì)胞不宜從瓶壁脫落，過長的消化會導(dǎo)致細(xì)胞脫落、損傷；２)掌握好消化濃度，當(dāng)消化液濃度過高時(shí)，消化時(shí)間應(yīng)縮短，過低時(shí)細(xì)胞消化時(shí)間相對延長。
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：３-４天換液１次。
懸浮細(xì)胞不容易轉(zhuǎn)染：懸浮細(xì)胞是指細(xì)胞生長不依賴支持物表面，在培養(yǎng)液中呈懸浮狀態(tài)生長，如淋巴細(xì)胞。在實(shí)驗(yàn)室經(jīng)常會遇到懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染，其和貼壁細(xì)胞轉(zhuǎn)染還是有很大不同的。目前大多數(shù)實(shí)驗(yàn)室用的是脂質(zhì)體類的轉(zhuǎn)染試劑，脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染是基于電荷吸引原理，先形成脂質(zhì)體-DNA復(fù)合物，散布在細(xì)胞周圍，然后通過細(xì)胞的內(nèi)吞作用，將目的基因?qū)爰?xì)胞內(nèi)，而脂質(zhì)體復(fù)合物與貼壁細(xì)胞的接觸機(jī)會比懸浮細(xì)胞高出很多倍，所以，脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染時(shí)懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率要明顯低于貼壁細(xì)胞。其次，脂質(zhì)體試劑的毒性較大，這就使得懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染更為困難了。另外，懸浮細(xì)胞不易培養(yǎng)，易死亡，也給細(xì)胞轉(zhuǎn)染造成了一定的困難。為了提高懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率，可以使用非脂質(zhì)體的轉(zhuǎn)染試劑，如納米材料的。也可以使用電轉(zhuǎn)染方法，針對懸浮細(xì)胞等難轉(zhuǎn)染細(xì)胞還是挺不錯(cuò)的，電擊對細(xì)胞有一定的損傷，選用具有細(xì)胞膜修復(fù)功能的電轉(zhuǎn)染試劑，可以將電擊對細(xì)胞的傷害降到最低，懸浮細(xì)胞不易轉(zhuǎn)染，選對試劑及良好的細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境才是關(guān)鍵。
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
NCI-H748 Thawing人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系
細(xì)胞生長特性：懸浮生長
常規(guī)的細(xì)胞實(shí)驗(yàn)(增殖，凋亡，遷移，分化之類的)，受消化影響不是很大，如果不用胰酶去孵育而使用潤洗的方法消化的話(難消化細(xì)胞例外)。但少數(shù)實(shí)驗(yàn)，比如病毒包裝，對細(xì)胞代數(shù)，對細(xì)胞狀態(tài)要求極高。這個(gè)時(shí)候，胰酶消化，就是潤洗，都會對細(xì)胞包裝病毒的能力有影響，傳代次數(shù)一多，細(xì)胞包裝能力就會逐漸下降(當(dāng)然也有其它因素影響包裝效率)。這個(gè)時(shí)候都不用胰酶消化，用一些鹽溶液(不是EDTA液)即可。這些鹽溶液通過影響ECM相關(guān)酶的活性，來使得細(xì)胞脫離基質(zhì)附著表面，但不切割任何蛋白；EDTA的作用。許多人不用胰酶，只用EDTA，或者用trypsin/EDTA聯(lián)合作用。這里要明白，trypsin切割ECM的一些負(fù)責(zé)粘連和附著的蛋白，而EDTA通過螯合Ca離子，作用于Integrin的活性，所以EDTA的作用更加溫和。有的人在trypsin里添加一些EDTA，或者對付特別難消化的細(xì)胞，添加多一些EDTA，就是這個(gè)道理。一般不要試圖延長消化時(shí)間(如果１０min還消化不徹底的話)，而應(yīng)該想其它辦法；PBS洗滌。消化之前用PBS洗滌，是常見的操作，因?yàn)镾erum含有抑制trypsin的蛋白。但這里面也有學(xué)問可以講，對于一些難消化細(xì)胞，那么可以配制不含Ca，Mg離子的PBS，因?yàn)檫@些離子也會抑制trypsin的活性。但對于絕大部分胰酶或者EDTA溶液潤洗即可消化的細(xì)胞，不需要配制如此溶液。
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書
KMBC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MKN-28細(xì)胞、TE 85 ClF-5細(xì)胞、Neukoplast細(xì)胞
HCT/Taxo1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NTERA2-D1細(xì)胞、RKN細(xì)胞、NW-MEL-38細(xì)胞
T-47D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：149 PT細(xì)胞、HT115細(xì)胞、BCaP-37細(xì)胞
SHG-44細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H4細(xì)胞、A253細(xì)胞、SF295細(xì)胞
LLC-WRC 256細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuNS1細(xì)胞、HEEpiC細(xì)胞、MHCC-LM3細(xì)胞
K 562細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Walker/LLC-WRC 256細(xì)胞、RPMI2650細(xì)胞、H-1568細(xì)胞
MES-23.5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3J.HR1K細(xì)胞、TMD-8細(xì)胞、RT4細(xì)胞
TE4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RKO_AS45細(xì)胞、SNB-19細(xì)胞、BrCL18細(xì)胞
CCD-1095Sk細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCC 9細(xì)胞、hFOB 1.19細(xì)胞、HCO細(xì)胞
HPF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：2B4-L細(xì)胞、SVHUC細(xì)胞、Hepatoma-22細(xì)胞
P3X63Ag8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK293A細(xì)胞、SCC-7細(xì)胞、SNU407細(xì)胞
NCI H716細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-Ly10細(xì)胞、NW-38細(xì)胞、SW 1990細(xì)胞
Hs 636 T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNG-M細(xì)胞、Hs.27細(xì)胞、A-101D細(xì)胞
DMS114細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LL/2細(xì)胞、Nb 2細(xì)胞、HCC-9204細(xì)胞
ME-1 [Human leukemia]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Murine Thymic Epithelial Cell line 1細(xì)胞、SUDHL10細(xì)胞、H1238細(xì)胞
NCI-SNU-668細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16-BL6細(xì)胞、NKT細(xì)胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-8細(xì)胞
143BTK-細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H9細(xì)胞、NCIH1770細(xì)胞、HCEC細(xì)胞
SMA 560細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPAF-II細(xì)胞、H2444細(xì)胞、I90細(xì)胞
NCIH2286細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IHH-4細(xì)胞、Roswell Park Memorial Institute 8402細(xì)胞、HCT/Taxo1細(xì)胞
C2BBe1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC3-M細(xì)胞、GT39細(xì)胞、HPAF2細(xì)胞
C3H/10T1/2-clone8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MSF細(xì)胞、SW-962細(xì)胞、NSC-34細(xì)胞
C3H/10T1/2-clone8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MSF細(xì)胞、SW-962細(xì)胞、NSC-34細(xì)胞
SK-NEP-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCL II細(xì)胞、Dunn LM8細(xì)胞、COLO-829細(xì)胞
Huh-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCM細(xì)胞、EAhy926細(xì)胞、MDAMB435S細(xì)胞
TE 32細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Pro-5 Lec1.3c細(xì)胞、T-ALL 1細(xì)胞、NCI-H23細(xì)胞
MADB-106細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MNNG/HOS Clone F-5細(xì)胞、MUTZ-1細(xì)胞、Caov-3細(xì)胞
NCI-H748 Thawing人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系
ARPE-19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CoCL3細(xì)胞、TMK-1細(xì)胞、MDA 1386細(xì)胞
PANC-03-27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：hTERT-HME-1細(xì)胞、G 401細(xì)胞、HEK.EBNA細(xì)胞
HuH7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL-120細(xì)胞、MeT 5A細(xì)胞、M 1細(xì)胞
Panc02-H0細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PANC-08-13細(xì)胞、Y-1細(xì)胞、VA-ES-BJ細(xì)胞
Det. 562細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H19-7細(xì)胞、SNU620細(xì)胞、MES 13細(xì)胞
LAN5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 1463細(xì)胞、293GP細(xì)胞、H295細(xì)胞
HNE2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKN-AS細(xì)胞、Panc-05.04細(xì)胞、HPAEC細(xì)胞
FLC7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM00346B細(xì)胞、OVCAR8細(xì)胞、Nb2細(xì)胞
74Int細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RT-BM細(xì)胞、H-1581細(xì)胞、H6c7細(xì)胞
CCRF SB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1355細(xì)胞、KTCTL-140細(xì)胞、A101D細(xì)胞
MLA 144細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ATDC-5細(xì)胞、CAL 51細(xì)胞、NCI-H1650細(xì)胞
EL-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NHDF細(xì)胞、16HBE14o-細(xì)胞、MHCC-97細(xì)胞
LOUNH91細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD-112 CoN細(xì)胞、HSC-T6細(xì)胞、Vx-2細(xì)胞
Medical Research Council cell strain-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SupT1細(xì)胞、G 292 Clone A 141B1細(xì)胞、IR983F細(xì)胞
2PK3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIH 3T6細(xì)胞、Lewis-Lung細(xì)胞、NTERA2D1細(xì)胞
NIH3T3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MGH-U1細(xì)胞、266 Bl細(xì)胞、TE-4細(xì)胞
UCLA SO M21細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MAVER-1細(xì)胞、Mono Mac 6細(xì)胞、SF-295細(xì)胞
BA/F3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DSL-6A-C1細(xì)胞、HEP-3B2細(xì)胞、MDA-MB468細(xì)胞
CD-18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16 melanoma F10細(xì)胞、NCIH1573細(xì)胞、RAEC細(xì)胞
Centre Antoine Lacassagne-33細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Det. 562細(xì)胞、MV522細(xì)胞、MAC1細(xì)胞
D562細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MIA-PaCa-2細(xì)胞、HFT8810細(xì)胞、SHSY5Y細(xì)胞
NS1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-889細(xì)胞、OVCAR-5細(xì)胞、AN3細(xì)胞
WEHI164細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RMS 13細(xì)胞、BL2141細(xì)胞、HCC0202細(xì)胞
SO-Rb 50細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：293/EBNA細(xì)胞、H-1385細(xì)胞、RASMC細(xì)胞
Pan02細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR.5細(xì)胞、JTC-28細(xì)胞、EHEB細(xì)胞
LC-2 ad細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C17.2細(xì)胞、IMR-32細(xì)胞、SMA 560細(xì)胞
NCIH2030細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DoHH-2細(xì)胞、RH-30細(xì)胞、GP2-293細(xì)胞
B16 F10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A-704細(xì)胞、253JBV細(xì)胞、LNCaP subline C4-2細(xì)胞
3T3-F442A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：rRTEC細(xì)胞、SK-LU-1細(xì)胞、Panc 05.04細(xì)胞
NCI-HUT-69細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKUT1細(xì)胞、Karpas 299細(xì)胞、H596細(xì)胞
Suzhou Human Glioma-44細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：52PE細(xì)胞、H-157細(xì)胞、B16 melanoma F10細(xì)胞
NCI-SNU-387細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Scott and White No. 13細(xì)胞、SK-BR-3細(xì)胞、Y1細(xì)胞
L-363細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2342細(xì)胞、MCF-7細(xì)胞、SK ES 01細(xì)胞
NCI-H748 Thawing人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系
CORL23細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DoTc2細(xì)胞、Madin Darby Bovine Kidney細(xì)胞、RF/6A細(xì)胞
HeLa-229細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK 293T/17細(xì)胞、HSC-5 [Human skin squamous cell carcinoma]細(xì)胞、SP2/0 Ag-14細(xì)胞
AMC-HN8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs746T細(xì)胞、LTEP-a-2細(xì)胞、PC3M細(xì)胞
NTERA-2 cl.D1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM02219細(xì)胞、HMC3細(xì)胞、B16/F1細(xì)胞
H-2330細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Soleus clone 8細(xì)胞、RL-952細(xì)胞、HEK293FT細(xì)胞
OCIAML3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BetaTC6細(xì)胞、GM2132細(xì)胞、HS-5細(xì)胞
DMS-114細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDAMB-231細(xì)胞、253J細(xì)胞、293AD細(xì)胞
WI 38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM-346細(xì)胞、MOLT-4細(xì)胞、Okayama University Medical School-27細(xì)胞
H28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1618細(xì)胞、HOK細(xì)胞、V79-GalK1細(xì)胞
FL 62891細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HL60細(xì)胞、NCI-SNU-216細(xì)胞、KPL-1細(xì)胞
RBMEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：mRTEC細(xì)胞、Hs 729細(xì)胞、Ramos(RA1)細(xì)胞
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