"MBT-2 Adherent小鼠膀胱癌細胞系
細胞背景資料：膀胱移行細胞癌；C３H/He
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞復(fù)蘇后貼壁細胞較少的問題分析：總結(jié)１：復(fù)蘇過程沒有問題，是否是從液氮拿出直接放入溫水，還有培養(yǎng)箱，二氧化碳濃度，培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS １５-２０%，看看能否幫助貼壁，當然也需要考慮血清問題，還有確信拿來的細胞沒問題?？偨Y(jié)２：首先應(yīng)該懷疑凍存，實際上復(fù)蘇出問題的可能非常小，因為操作簡單，而且死板。１、你凍存的時候是不是消化的時間過長，這是一般人所注意不到的，即使書上也不講這個問題，太長的消化時間會讓細胞復(fù)蘇時失去貼壁能力，表現(xiàn)為先貼后死，原因是在你復(fù)蘇的時候細胞已進入凋亡程序，不可逆轉(zhuǎn)的死亡。２、你的凍存液好不好，是什么，甘油還是DMSO，質(zhì)量非常重要，否則也會死亡。３、你的凍存液的量加的是不是太多，ATCC推薦是不超過７%，大于５%，太多也不好。４、你在凍存的時候是不是把DMSO混均勻，這個有一些影響，但不算太大。５、你的凍存是否按部就班，就是所溫度梯度是不是把握嚴格，很多人容易忘卻這個事情，因為這個東西流程長。６、如果你細胞污染，你是否能很快看到，我比我的導師能早一天看到污染。從這個角度講建議去除離心這步。７、你的細胞在凍存前是否過密。還有，不贊成孵箱污染這個概念的，所有在一個孵箱里的細胞都污染一個細菌的話，這個細菌是源于孵箱的，但這不代表孵箱污染，因為孵箱無論你如何處理都有大量的細菌，問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找，以后就不犯同樣的問題，這個很重要，不能靠猜，否則你就有可能細胞養(yǎng)絕最后換課題，這個見得太多了，別不當會事。
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
MBT-2 Adherent小鼠膀胱癌細胞系
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
最近在培養(yǎng)細胞時，發(fā)現(xiàn)其狀態(tài)不是很好，很容易扎堆生長，用胰酶消化的時候也是一團一團地被消化下來，很難把它們吹散成一個一個細胞。而且長得也挺快也挺不均勻的，傳代的第二天，有些地方就長得滿滿的了。想請教一下這是為什么呢？你好，我養(yǎng)的細胞和你一樣，消化下來也是一團的，但吹打以后就沒有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻，分皿后在鏡下看一看，移動培養(yǎng)皿的時候盡量動作輕，避免晃動。細胞生長挺快，那么細胞的增殖能力應(yīng)該較強。胰酶消化成團的問題我覺得有以下幾種可能：一、細胞消化后吹打不均勻，造成細胞成團生長：二、細胞細化太過，細胞成片脫落，吹打時沒有受力點，細胞聚團生長。解決辦法：根據(jù)細胞生長的情況進行多次消化，將同次消化下來的細胞放在一個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)。貼壁細胞傳代培養(yǎng)：一般步驟為：真空泵吸走培養(yǎng)基，１XPBS漂洗兩次，加入１mlEDTA-Tripsin（１００mm皿為例），３７度放置數(shù)分鐘，輕拍培養(yǎng)瓶使細胞自瓶壁脫落，加入適量血清，以吸管上下吸放數(shù)次以打散細胞團塊，離心后加入新鮮培養(yǎng)基，按比例轉(zhuǎn)移至新皿。細胞的傳代最重要的是胰酶處理時間，若胰酶處理太久，容易造成細胞貼壁不緊，顯微鏡下觀察立體感不強，嚴重的時候甚至會造成細胞死亡。我談?wù)剛€人經(jīng)驗：HepG-２、A５４９、Hela、SGC-７９０１幾種癌細胞處理時間可適當放長，一般處理５-６min，C２C１２、COS-７、NIH-３T３比較容易脫落，２min足矣，P１９Cl６和２９３細胞貼壁不緊，可在PBS漂洗后，直接換新鮮培養(yǎng)基打散。
H28細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1618細胞、HOK細胞、V79-GalK1細胞
HCC1428細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P-388細胞、CTLL-2細胞、NR8383.1細胞
TERT-RPE1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT-55細胞、GM00637I細胞、H4-II-E細胞
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
Co-115細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RIN Cl-5F細胞、HCT-FET細胞、MDAMB415細胞
MGC803細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A2780-CP細胞、SK-GT-4細胞、CEM細胞
KYSE 30細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3HR1細胞、EA.Hy926細胞、PCI-04B細胞
細胞生長特性：貼壁
MBT-2 Adherent小鼠膀胱癌細胞系
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
細胞培養(yǎng)實驗中常見問題總結(jié)：１)一般客戶拿到細胞后，應(yīng)該注意什么？客戶收到細胞后先不開蓋，放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議受收細胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細胞１００X，２００X各一張)，排除細胞本身污染的情況；收到細胞未開封，出現(xiàn)污染狀況我們負責免費發(fā)送一株細胞。收到細胞時如無異常情況，請在顯微鏡下觀察細胞密度，如為貼壁細胞，未超過８０%匯合度時，將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出，留下１０ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)；超過８０%匯合度時，請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞，吸出培養(yǎng)液、１０００轉(zhuǎn)/分鐘離心２分鐘，吸出上清，管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。細胞消化液建議使用PBS配制，慎用Hanks液配制；２)快遞細胞多久能到，是寄凍存的細胞還是復(fù)蘇好的細胞？我們采用快遞發(fā)貨，一般外地２--３天，寄細胞前請確認當?shù)販囟?，如果氣溫低于４度的，則采用郵寄凍存細胞；３)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基？不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細胞培養(yǎng)基，若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基，細胞大都無法立即適應(yīng)，造成細胞無法存活；４)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類？不能。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源，所以血清的種類和品質(zhì)對于細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清，在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同，血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。
HCM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK-AD293細胞、AG 9細胞、WIL2-S細胞
COLO-699細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LI7細胞、CMT-64細胞、BSC-1細胞
SACC83細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BMSCs（mBMSCs）細胞、MLMA細胞、SF17細胞
BC-023細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PL5細胞、COLO320HSR細胞、Gingival carcinoma Neck Metastasis細胞
HET1A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COR-L279細胞、Mv 1 Lu細胞、HAVSMC細胞
Nakata-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2172細胞、JVM-2細胞、NCIADRRES細胞
Tu-686細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK-AD 293細胞、Tohoku Hospital Pediatrics-1細胞、ROS 17/2.8細胞
H-35細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KP 4細胞、SUDHL2細胞、BSC1細胞
ARPE-19細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CoCL3細胞、TMK-1細胞、MDA 1386細胞
hTERT RPE-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：QGY-7703細胞、CCRFCEM細胞、G519細胞
SVHUC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2052細胞、Factor Dependent Cell-Paterson 1細胞、NCI-H716細胞
University of Michigan-Urothelial Carcinoma-14細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Fortner's melanotic melanoma #3細胞、3T3-442A細胞、HCCC9810細胞
CAL-12T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BEL-7404細胞、RF/6A細胞、NCI-HUT-292細胞
MBT-2 Adherent小鼠膀胱癌細胞系
LS 513細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H292細胞、Molm14細胞、XuanWei Lung Cancer-05細胞
HPAEpiC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Colon-38細胞、IMR-90細胞、hRPTC細胞
MDA-MB436細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LA-795細胞、X63Ag8.653細胞、Colon 38細胞
MDA-MB436細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LA-795細胞、X63Ag8.653細胞、Colon 38細胞
PLA802細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CaES-17細胞、HS-5細胞、CCD-19Lu細胞
MHCC97-L細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKCO1細胞、SACC83細胞、NCI-H2126細胞
Caco2BBe細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tn-5B1-4細胞、OVCAR4細胞、LS174T細胞
CMT 93細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FaDu細胞、Hs445細胞、P3/NS-1細胞
Embryonic Bovine Tracheal cells細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCM460細胞、HNE2細胞、DMS 153細胞
U373 MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：D-341細胞、NUGC-4細胞、H-1395細胞
TH1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A9(Hamprecht)細胞、Large Cell Lung Cancer-103H細胞、SC1細胞
MFHL-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Normal fibroblast-10細胞、KLN205細胞、H-2198細胞
Nb-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C666-1細胞、SK MEL 5細胞、CL40細胞
NCI-H1155細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-146細胞、MDCK-II細胞、RSMC細胞
Hk-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B5537SKIN細胞、BT20細胞、PC-10細胞
PANC 203細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE4細胞、WEHI-3細胞、L-WRN細胞
EOMA細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3/NSI/1-AG4-1細胞、OB2細胞、H-548細胞
Tca-83細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Centre Antoine Lacassagne-33細胞、NCI-H1648細胞、NCI-H1355細胞
H2291細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RGC-6細胞、H841細胞、HCV-29細胞
EFM192A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：X63-Ag8-653細胞、HSC（Human Schwann）細胞、SU-DHL-8細胞
7860細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPAF II細胞、IMR90細胞、RS411細胞
U-343細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3HR1-BL細胞、HCCC9810細胞、786-0細胞
H22-H8D8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHL1細胞、NCI-H69C細胞、HS-294-T細胞
SF-763細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCRF SB細胞、RH8994細胞、L cell line細胞
EoL-1-cell細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BRL細胞、H-1048細胞、SPCA-1細胞
T-98細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKml2細胞、MKN-28細胞、MDCK Type II細胞
KP 4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Saos2細胞、D341Med細胞、CCD 19Lu細胞
Metastatic Variant-522細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2291細胞、GH 3細胞、Granta 519細胞
BHP10-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A375-SM細胞、MES23.5細胞、SKGT2細胞
KMS-26細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ARH-77細胞、H-2110細胞、HME1細胞
H-358細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC-3M細胞、H-2126細胞、MG-63細胞
H-2195細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-226細胞、Hs683細胞、D324 Med細胞
SH-SY5Y Parental細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE-70細胞、YD38細胞、Calu6細胞
BL-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL62細胞、Hs729細胞、HemECs細胞
GC-1 spg細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H3255細胞、CHL-CL-11細胞、NMC-G1細胞
KRCY細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDCK-II細胞、Ly18細胞、MDA231-LM2細胞
PMVEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BC3H1細胞、FM-88細胞、RMS1598細胞
PMVEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BC3H1細胞、FM-88細胞、RMS1598細胞
ZR751細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PK (15)細胞、DI TNC1細胞、CHP-212細胞
BCP1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：M4e細胞、SK-CO-1細胞、IOSE29細胞
CNE-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPBALL細胞、SUSM1細胞、IA-LM細胞
SNU886細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Huh 7.5細胞、SNU-719細胞、Hu-P-T3細胞
MBT-2 Adherent小鼠膀胱癌細胞系
H-1869細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tb 1-Lu細胞、ES2細胞、EoL-1細胞
BAR-T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK-293F細胞、H22-H8D8細胞、CWR-22rv1細胞
MCF 10A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-Ly01細胞、HBdSMC細胞、University of Michigan-Renal Carcinoma-2細胞
NCI-H1792細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MA 104細胞、COLO 678細胞、A-375SM細胞
HuT-78細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LLC-PK1細胞、University of Arizona Cell Culture-812細胞、LS-513細胞
OV3121細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BCP-1細胞、NCI-BL1339細胞、Hs294細胞
PK15細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM 2664細胞、HEC151細胞、Mel RM細胞
H2023細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUPT-1細胞、Hmy.2 CIR細胞、H1651細胞
SW-527細胞系相關(guān)產(chǎn)品：293E細胞、Capan-1細胞、PASMCS細胞
HPDLF細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC2935細胞、H322細胞、Tb 1 Lu細胞
MUTZ-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKM1細胞、BC-009細胞、KPL-1細胞
SACC83細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BMSCs（mBMSCs）細胞、Fortner's melanotic melanoma #3細胞、SW962細胞
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