"NCI-H1417 Adherent人小細胞肺癌細胞系
細胞背景資料:小細胞肺癌;女性
細胞形態(tài):上皮細胞樣
正確的細胞復蘇需知事項:細胞凍存好了,接下來要注意什么問題呢?沒錯,就是記得到時間了,拿出來復蘇。那么,細胞復蘇的過程中又有哪些該注意的事項呢?細胞活力和形態(tài)檢查的作用何在?活力檢查——千萬不要使用不健康的細胞,可能有污染(真菌、支原體等),如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細胞的固有形態(tài)和生長行為。凍存細胞:補充新的培養(yǎng)液——在您開始凍存細胞的前一天補充新的培養(yǎng)液。在細胞長至70%單層時收獲細胞,計數(shù)活細胞數(shù),用凍存液調整細胞密度~5 x106 Cell s/ml (根據(jù)不同的細胞類型調整);凍存液——用凍存液洗細胞并用凍存液重懸細胞,有不同類型的凍存液,根據(jù)細胞類型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有):5-10% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質;5-15%甘油;如果細胞在無血清培養(yǎng)基內生長,應在50%條件培養(yǎng)基內(細胞在無血清培養(yǎng)基內生長24小時)內凍存和復蘇。在凍存管上標記好細胞類型,日期,凍存人等信息,并保證每凍存管不超過1.5ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數(shù)量和位置。以最快的速度轉移凍存管知液氮罐內,因此,此步驟使用干冰,或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內。此外還要注意,在凍存管上沒有足夠的空間記錄細胞的詳細信息,做好記錄是非常非常重要的!還有一個最重要的,一定要在異地的液氮罐內保存同樣的一份細胞,以免其中的一個液氮罐出現(xiàn)問題!細胞正確的復蘇方式和正確的凍存方式同樣重要,熟記以下要點:當從液氮罐內取出細胞時,有可能會出現(xiàn)凍存管破裂的情況,使用保護面罩和防護服十分必要;其實,細胞復蘇只是一個簡單的實驗,不過這其中卻不可避免有一些需要注意的細節(jié),不然,也不一定會盡如人意。例如說,人身健康方面:一定要記得做好防凍工作,戴上護目鏡;盡量降低DMSO對細胞的損傷等等。
細胞生長:貼壁
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
NCI-H1417 Adherent人小細胞肺癌細胞系
細胞產品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
最近在培養(yǎng)細胞時,發(fā)現(xiàn)其狀態(tài)不是很好,很容易扎堆生長,用胰酶消化的時候也是一團一團地被消化下來,很難把它們吹散成一個一個細胞。而且長得也挺快也挺不均勻的,傳代的第二天,有些地方就長得滿滿的了。想請教一下這是為什么呢?你好,我養(yǎng)的細胞和你一樣,消化下來也是一團的,但吹打以后就沒有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻,分皿后在鏡下看一看,移動培養(yǎng)皿的時候盡量動作輕,避免晃動。細胞生長挺快,那么細胞的增殖能力應該較強。胰酶消化成團的問題我覺得有以下幾種可能:一、細胞消化后吹打不均勻,造成細胞成團生長:二、細胞細化太過,細胞成片脫落,吹打時沒有受力點,細胞聚團生長。解決辦法:根據(jù)細胞生長的情況進行多次消化,將同次消化下來的細胞放在一個細胞培養(yǎng)瓶內。貼壁細胞傳代培養(yǎng):一般步驟為:真空泵吸走培養(yǎng)基,1XPBS漂洗兩次,加入1mlEDTA-Tripsin(100mm皿為例),37度放置數(shù)分鐘,輕拍培養(yǎng)瓶使細胞自瓶壁脫落,加入適量血清,以吸管上下吸放數(shù)次以打散細胞團塊,離心后加入新鮮培養(yǎng)基,按比例轉移至新皿。細胞的傳代最重要的是胰酶處理時間,若胰酶處理太久,容易造成細胞貼壁不緊,顯微鏡下觀察立體感不強,嚴重的時候甚至會造成細胞死亡。我談談個人經驗:HepG-2、A549、Hela、SGC-7901幾種癌細胞處理時間可適當放長,一般處理5-6min,C2C12、COS-7、NIH-3T3比較容易脫落,2min足矣,P19Cl6和293細胞貼壁不緊,可在PBS漂洗后,直接換新鮮培養(yǎng)基打散。
SK-RC-52細胞系相關產品:SC細胞、H4IIE細胞、HT 1080.T細胞
MD Anderson-Metastatic Breast-175-VIII細胞系相關產品:LM TK negative細胞、MDAMB175細胞、OVCAR 5細胞
KYSE 150 KYSE150 Kyse150 KY150
細胞系相關產品:NCIH1299細胞、SUP-B15細胞、C6細胞
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
H-35 Reuber細胞系相關產品:COLO 394細胞、SHSY5Y細胞、HCC1569細胞
UK Pan-1細胞系相關產品:HPMEC細胞、DAN-G細胞、RBE4細胞
NCI-SNU-398細胞系相關產品:SCC-9細胞、MDA 231-LM2-4175細胞、SNU423細胞
細胞生長特性:貼壁
NCI-H1417 Adherent人小細胞肺癌細胞系
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
常見細胞培養(yǎng)中一些問題總結:1)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適?血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的含量多少會對細胞的生長會產生極大的影響。血清的含量一般為5%-15%,不要低于5%或高過20%,因為含量過低會導致細胞營養(yǎng)不足,過高則會破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為10%,可以適量加減;2)何時須更換培養(yǎng)基?視細胞生長密度而定,或遵照細胞株基本數(shù)據(jù)上的更換時間,按時更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進行更換;3)購買的復蘇細胞,為何會有脫落?因為運輸?shù)倪^程中不可避免的會有震蕩,收到后可以離心收集;4)購買的細胞冷凍管經解凍后,為何會發(fā)生細胞數(shù)目太少之情形?研究人員在冷凍細胞之培養(yǎng)時出現(xiàn)細胞數(shù)目太少,大都是因為離心過程操作上的失誤,造成細胞的物理性損傷,以及細胞流失。建議細胞解凍后不要立刻離心,應待細胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可;5)購買的細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因?研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質不佳。血清使用錯誤或血清的品質不佳。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后,加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于–80°C太久;6)收到的冷凍管瓶身破裂,瓶蓋有裂紋,或瓶蓋脫落之原因?冷凍管瓶蓋裂紋,或瓶身破裂,可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當,造成冷凍管裂損,建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫,乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象,冷凍管有可能因此而造成細胞污染,故冷凍管于放入和取出液氮桶時,均應立刻將冷凍管再一次扭緊。
SF-539細胞系相關產品:SCCVII細胞、HCC4006細胞、UMR 106細胞
Hs 888Lu細胞系相關產品:Ramos 2G6 4C10細胞、KP2細胞、KYSE70細胞
ROS 17/2.8細胞系相關產品:HLFa細胞、293 Ad5細胞、UMNSAH-DF 1細胞
WML2細胞系相關產品:UMR-106細胞、BCP1細胞、K7M2細胞
SW 839細胞系相關產品:EL 4細胞、TT細胞、FU-97細胞
3 LL細胞系相關產品:UM-UC14細胞、NCI-H1954細胞、GM03671細胞
L-363細胞系相關產品:H2342細胞、MCF-7細胞、SK ES 01細胞
NCI-H441-4細胞系相關產品:H1975細胞、BNL.1ME A.7R.1細胞、Human Corneal Endothelial Cells-12細胞
373MG細胞系相關產品:624 MEL細胞、ARPE19細胞、HMEL細胞
MFM223細胞系相關產品:TMD8細胞、Hepatoma 22細胞、P3J-HR-1細胞
C3H 10T1/2細胞系相關產品:CA 46細胞、H2126細胞、HCC44細胞
HEC-251細胞系相關產品:GM17346細胞、SV40-MES13細胞、MDA-MB361細胞
373MG細胞系相關產品:624 MEL細胞、ARPE19細胞、HMEL細胞
NCI-H1417 Adherent人小細胞肺癌細胞系
HPC-Y5細胞系相關產品:GM02131A細胞、H1694細胞、IEC 6細胞
Caov-4細胞系相關產品:IR983F細胞、Cor L51細胞、SW13細胞
Emory University-3細胞系相關產品:NCI747細胞、CHP100細胞、Capan-2細胞
Emory University-3細胞系相關產品:NCI747細胞、CHP100細胞、Capan-2細胞
RA 1細胞系相關產品:NCTC 1469細胞、A549 ATCC細胞、A-704細胞
L-Wnt-3A細胞系相關產品:MC3T3-E細胞、A-172細胞、RPMI-1788細胞
OCI AML2細胞系相關產品:MKN-45細胞、SUNE1細胞、GM00346B細胞
Panc 04.03細胞系相關產品:Mono-Mac-1細胞、T2(174 x CEM.T2)細胞、L428細胞
BLO 11細胞系相關產品:COR-L105細胞、HEK-2細胞、MKN28細胞
SC細胞系相關產品:DU145細胞、HT 115細胞、H87細胞
NHLF細胞系相關產品:149PT細胞、A-1847細胞、Anglne細胞
C4-I細胞系相關產品:BpRc1細胞、D-341 Med細胞、Hs 888.Lu細胞
Panc_04_03細胞系相關產品:YD38細胞、J 111細胞、SNU-739細胞
OsA-CL細胞系相關產品:TE11細胞、TE6細胞、NRK 52E細胞
THEECs細胞系相關產品:SK-N-BE2細胞、NTC200細胞、L-5178-Y-R細胞
H-2172細胞系相關產品:B16-F10--RED細胞、H341細胞、GM04671細胞
HS688AT細胞系相關產品:OPM2細胞、COV 504細胞、Adeno 293細胞
LIXC-002細胞系相關產品:B4G12細胞、MRC9細胞、M059J細胞
D-341Med細胞系相關產品:MT2細胞、hTERT-HPNE細胞、RPMI #8226細胞
HeLa細胞系相關產品:Panc2_03細胞、SK-N-SH細胞、PC-9S1細胞
alphaTC clone 6細胞系相關產品:L細胞、PK(15)細胞、Hs 683.T細胞
SCC25細胞系相關產品:Hs-940細胞、Intestinal Epithelioid Cell line No. 6細胞、P3-Jiyoye細胞
HCC1806細胞系相關產品:OVCA420細胞、GM03569細胞、COV-434細胞
SP2/0 Ag-14細胞系相關產品:Cloudman S91 melanoma細胞、KTA7細胞、Psi-2-DAP細胞
RCC10細胞系相關產品:LAPC4細胞、H2108細胞、P116細胞
BHT101細胞系相關產品:NBL-7細胞、MB231細胞、UMUC-3細胞
RH-30細胞系相關產品:IAR-20細胞、SK-N-BE2C細胞、CMT 93細胞
Hu-P-T4細胞系相關產品:COV362細胞、697細胞、Menschliche Und Tierische Zellkulture-3細胞
BHK-21細胞系相關產品:QGP 1細胞、U266-B1細胞、SUM-190細胞
Hs604T細胞系相關產品:TSCCa細胞、P3X63細胞、GA-10 clone 4細胞
HPDE細胞系相關產品:PC2細胞、CTSC-3細胞、P3X63 AG 8.653細胞
NCI-H2196細胞系相關產品:MA-104細胞、6-10B細胞、H-1915細胞
NCI-H2170細胞系相關產品:Intestinal Porcine Epithelial Cell line-J2細胞、BHT101細胞、COLO-824細胞
H4-II-E-C3細胞系相關產品:Mel-624細胞、CESS細胞、THEECs細胞
C2-C12細胞系相關產品:AQ-Mel細胞、WEHI3細胞、KYSE-450細胞
HEK293-FT細胞系相關產品:SVEC 4-10細胞、LM2-4175細胞、PL12細胞
SP-2細胞系相關產品:FBHE細胞、U-226AR1細胞、BNL 1ME A.7R.1細胞
SP-2細胞系相關產品:FBHE細胞、U-226AR1細胞、BNL 1ME A.7R.1細胞
HCGC細胞系相關產品:BC3H-1細胞、PG-BE1細胞、OCUM-1細胞
NCI-SNU-407細胞系相關產品:CAMA1細胞、UC-3細胞、H-2009細胞
EM3細胞系相關產品:WISH細胞、BRL3A細胞、Mino細胞
C-4-I細胞系相關產品:Capan2細胞、beta-TC6細胞、Jijoye細胞
NCI-H1417 Adherent人小細胞肺癌細胞系
HuNS1細胞系相關產品:HHFK細胞、MPASMC細胞、ACHN細胞
Human Fetal Thymocyte-8810細胞系相關產品:HCC-1569細胞、H-69細胞、KATO III細胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-6細胞系相關產品:Tsup-1細胞、P3X63Ag8細胞、HTori-3.1細胞
A375S2細胞系相關產品:H1341細胞、PANC 1005細胞、PNT1-a細胞
EFM192B細胞系相關產品:COLO-394細胞、NCI-H2227細胞、Helacyton gartleri細胞
J-774細胞系相關產品:IMR 90細胞、A9細胞、Rat-1細胞
KOSC-2 cl3-43細胞系相關產品:Calu6細胞、MDCC-MSB1細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-175-VIII細胞
H1876細胞系相關產品:22Rv-1細胞、Mo7e細胞、GC9811-P細胞
HM06.A1細胞系相關產品:NCI-H847細胞、H2029細胞、Calf Pulmonary Artery Endothelial細胞
AHH1細胞系相關產品:GOTO細胞、Jurkat-FHCRC細胞、RD-2細胞
SW 839細胞系相關產品:EL 4細胞、L cells細胞、KMS-26細胞
ROS 17/2.8細胞系相關產品:HLFa細胞、Potorous tridactylus Kidney 2細胞、TK-10細胞
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