"RKO-E6 Adherent人結(jié)腸癌轉(zhuǎn)基因細胞系
細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
正確的細胞復蘇需知事項：細胞凍存好了，接下來要注意什么問題呢？沒錯，就是記得到時間了，拿出來復蘇。那么，細胞復蘇的過程中又有哪些該注意的事項呢？細胞活力和形態(tài)檢查的作用何在？活力檢查——千萬不要使用不健康的細胞，可能有污染(真菌、支原體等)，如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細胞的固有形態(tài)和生長行為。凍存細胞：補充新的培養(yǎng)液——在您開始凍存細胞的前一天補充新的培養(yǎng)液。在細胞長至７０%單層時收獲細胞，計數(shù)活細胞數(shù)，用凍存液調(diào)整細胞密度~５ x１０６ Cell s/ml (根據(jù)不同的細胞類型調(diào)整)；凍存液——用凍存液洗細胞并用凍存液重懸細胞，有不同類型的凍存液，根據(jù)細胞類型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有)：５-１０% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質(zhì)；５-１５%甘油；如果細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長，應(yīng)在５０%條件培養(yǎng)基內(nèi)(細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長２４小時)內(nèi)凍存和復蘇。在凍存管上標記好細胞類型，日期，凍存人等信息，并保證每凍存管不超過１.５ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數(shù)量和位置。以最快的速度轉(zhuǎn)移凍存管知液氮罐內(nèi)，因此，此步驟使用干冰，或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內(nèi)。此外還要注意，在凍存管上沒有足夠的空間記錄細胞的詳細信息，做好記錄是非常非常重要的！還有一個最重要的，一定要在異地的液氮罐內(nèi)保存同樣的一份細胞，以免其中的一個液氮罐出現(xiàn)問題！細胞正確的復蘇方式和正確的凍存方式同樣重要，熟記以下要點：當從液氮罐內(nèi)取出細胞時，有可能會出現(xiàn)凍存管破裂的情況，使用保護面罩和防護服十分必要；其實，細胞復蘇只是一個簡單的實驗，不過這其中卻不可避免有一些需要注意的細節(jié)，不然，也不一定會盡如人意。例如說，人身健康方面：一定要記得做好防凍工作，戴上護目鏡；盡量降低DMSO對細胞的損傷等等。
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
RKO-E6 Adherent人結(jié)腸癌轉(zhuǎn)基因細胞系
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
最近在培養(yǎng)細胞時，發(fā)現(xiàn)其狀態(tài)不是很好，很容易扎堆生長，用胰酶消化的時候也是一團一團地被消化下來，很難把它們吹散成一個一個細胞。而且長得也挺快也挺不均勻的，傳代的第二天，有些地方就長得滿滿的了。想請教一下這是為什么呢？你好，我養(yǎng)的細胞和你一樣，消化下來也是一團的，但吹打以后就沒有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻，分皿后在鏡下看一看，移動培養(yǎng)皿的時候盡量動作輕，避免晃動。細胞生長挺快，那么細胞的增殖能力應(yīng)該較強。胰酶消化成團的問題我覺得有以下幾種可能：一、細胞消化后吹打不均勻，造成細胞成團生長：二、細胞細化太過，細胞成片脫落，吹打時沒有受力點，細胞聚團生長。解決辦法：根據(jù)細胞生長的情況進行多次消化，將同次消化下來的細胞放在一個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)。貼壁細胞傳代培養(yǎng)：一般步驟為：真空泵吸走培養(yǎng)基，１XPBS漂洗兩次，加入１mlEDTA-Tripsin（１００mm皿為例），３７度放置數(shù)分鐘，輕拍培養(yǎng)瓶使細胞自瓶壁脫落，加入適量血清，以吸管上下吸放數(shù)次以打散細胞團塊，離心后加入新鮮培養(yǎng)基，按比例轉(zhuǎn)移至新皿。細胞的傳代最重要的是胰酶處理時間，若胰酶處理太久，容易造成細胞貼壁不緊，顯微鏡下觀察立體感不強，嚴重的時候甚至會造成細胞死亡。我談?wù)剛€人經(jīng)驗：HepG-２、A５４９、Hela、SGC-７９０１幾種癌細胞處理時間可適當放長，一般處理５-６min，C２C１２、COS-７、NIH-３T３比較容易脫落，２min足矣，P１９Cl６和２９３細胞貼壁不緊，可在PBS漂洗后，直接換新鮮培養(yǎng)基打散。
P3.times.63 Ag8.653細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE-520細胞、NCI.H460細胞、MM1-S細胞
NCIH2135細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MES-SA-Dx5細胞、OE-21細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-468細胞
CHL細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc-03.27細胞、MALME.3M細胞、SUDHL-8細胞
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
HTR-8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2330細胞、MDA-157細胞、V 79細胞
LOUNH91細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD-112 CoN細胞、HSC-T6細胞、Vx-2細胞
Merwin Plasma Cell tumor-11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PAI細胞、SUM 190細胞、MCF12A細胞
細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分
RKO-E6 Adherent人結(jié)腸癌轉(zhuǎn)基因細胞系
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
常見細胞培養(yǎng)中一些問題總結(jié)：１)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適？血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源，所以血清的含量多少會對細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。血清的含量一般為５%-１５%，不要低于５%或高過２０%，因為含量過低會導致細胞營養(yǎng)不足，過高則會破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為１０%，可以適量加減；２)何時須更換培養(yǎng)基？視細胞生長密度而定，或遵照細胞株基本數(shù)據(jù)上的更換時間，按時更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進行更換；３)購買的復蘇細胞，為何會有脫落？因為運輸?shù)倪^程中不可避免的會有震蕩，收到后可以離心收集；４)購買的細胞冷凍管經(jīng)解凍后，為何會發(fā)生細胞數(shù)目太少之情形？研究人員在冷凍細胞之培養(yǎng)時出現(xiàn)細胞數(shù)目太少，大都是因為離心過程操作上的失誤，造成細胞的物理性損傷，以及細胞流失。建議細胞解凍后不要立刻離心，應(yīng)待細胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可；５)購買的細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因？研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳，常見原因可歸納為：培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后，加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于–８０°C太久；６)收到的冷凍管瓶身破裂，瓶蓋有裂紋，或瓶蓋脫落之原因？冷凍管瓶蓋裂紋，或瓶身破裂，可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當，造成冷凍管裂損，建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫，乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象，冷凍管有可能因此而造成細胞污染，故冷凍管于放入和取出液氮桶時，均應(yīng)立刻將冷凍管再一次扭緊。
RS4:11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC-3/M細胞、Ramos (RA 1)細胞、COLO-394細胞
TE-85 clone 5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE6細胞、MRC-5細胞、FT-293細胞
rHSC-99細胞系相關(guān)產(chǎn)品：624細胞、Onda 11細胞、Panc327細胞
PANC0203細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-BR3細胞、SNU423細胞、HeLa 229細胞
H-2330細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Soleus clone 8細胞、RL-952細胞、HEK293FT細胞
SNB19細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TOV21細胞、PFSK-1細胞、H748細胞
PANC0813細胞系相關(guān)產(chǎn)品：293c18細胞、P3/ag細胞、BRL-3A細胞
G292細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Nb 2細胞、HS940細胞、Lymph Node Carcinoma of the prostate細胞
SKM-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HGMC細胞、GM00637H細胞、L cells細胞
HCC1143細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Biopsy xenograft of Pancreatic Carcinoma line-3細胞、NL-20細胞、MDCK-II細胞
Colon 38細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKMEL-31細胞、Ls-174-T細胞、SkMel31細胞
H378細胞系相關(guān)產(chǎn)品：McA-RH 8994細胞、H-929細胞、293H細胞
MOLT-16細胞系相關(guān)產(chǎn)品：T-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細胞、HT 144細胞、NCIH1437細胞
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L-363細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2342細胞、MCF-7細胞、SK ES 01細胞
CFPAC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH524細胞、HEL9217細胞、DMS-153細胞
LLC-PK-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KHYG細胞、INS-1細胞、HEK293EBNA細胞
LLC-PK-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KHYG細胞、INS-1細胞、HEK293EBNA細胞
HSC-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2081細胞、Nb2細胞、HUCEC細胞
V-79-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HBZY 1細胞、C3H/10T1/2 clone 8細胞、A204細胞
SR786細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NOR-10細胞、NCIH1944細胞、639-V細胞
TCMK-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L-02細胞、LM1細胞、NCIH28細胞
SKLU1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BTI-Tn-5B1-4細胞、H2085細胞、CNE2細胞
P3-X63Ag8.653細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PL-11細胞、RMS1598細胞、MUTZ-1細胞
E0771細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human Corneal Epithelial cells-Transformed細胞、BC-3-H-I細胞、kms 11細胞
Hs940T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A549/ATCC細胞、OCI AML5細胞、SGC-996細胞
Reuber H-35細胞系相關(guān)產(chǎn)品：STO細胞、Hs940-T細胞、PL 5細胞
RGE細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 683.T細胞、L615細胞、NOZC-1細胞
L5178YR細胞系相關(guān)產(chǎn)品：D10細胞、L M (TK-)細胞、NCIH748細胞
NCIH128細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC3T3, E1 subgroup-4 clone細胞、EBTr (NBL-4)細胞、G361mel細胞
NPA87細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DU 145細胞、Sc-1細胞、SHEP1細胞
M 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：32D.cl3細胞、NCIH187細胞、639 V細胞
OCI-AML4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-94細胞、F36P細胞、Colo320細胞
DoTc2-4510細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MS-751細胞、RPMI no. 8226細胞、SG231細胞
GM05372細胞系相關(guān)產(chǎn)品：J 774A.1細胞、HF-91細胞、FaDu細胞
HCV29細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GS9L細胞、HCC-1171細胞、WEHI 164細胞
Simpson細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RERFLCMS細胞、TE-9細胞、UMRC-2細胞
SGC7901/DDP細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MHCC 97-H細胞、SUM190PT細胞、Co-115細胞
GH3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UPCI-SCC090細胞、HCT15細胞、293T細胞
H1184細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OV-CA 432細胞、KCL22S細胞、YAC細胞
SK-MEL-MeWo細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SP2-0-Ag14細胞、Ly8細胞、NEC細胞
LSC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1703細胞、NIH 3T3細胞、CF-1 MEF細胞
SKMEL-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：M-20細胞、GC-2spd(ts)細胞、BAC1.2F5細胞
EBC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc 04.03細胞、NK 10a細胞、KNS-62細胞
HCC1143細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Biopsy xenograft of Pancreatic Carcinoma line-3細胞、NL-20細胞、MDCK-II細胞
OP9細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU354細胞、P3X63 Ag8細胞、HCC-1187細胞
DH-82細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PANC-03-27細胞、CMT167細胞、BC-009細胞
H1838細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DCS細胞、P3.NS-1/1.Ag4.1細胞、MDAMB157細胞
H6c7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Y-1細胞、253JB-V細胞、LL/2細胞
NCI-157細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KP-N-RT細胞、NCIH378細胞、HCC0038細胞
NS1-Ag4/1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MHH-CALL2細胞、MDA-MB-175細胞、BHK細胞
U266BL細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HP615細胞、RMG1細胞、NOZ細胞
DanG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：207細胞、TGW細胞、T2(174 x CEM.T2)細胞
Ramos.2G6.4C10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hepa1-6細胞、NCI-H1915細胞、GC-1 spg細胞
J774 A1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 895.T細胞、C-26細胞、OCIAML3細胞
SN12-PM6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc08.13細胞、CNE-1細胞、108CC15細胞
RKO-E6 Adherent人結(jié)腸癌轉(zhuǎn)基因細胞系
HC11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MM6細胞、HEC-251細胞、NUGC4細胞
Panc 2.03細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CC-LP-1細胞、SNU-368細胞、SKML-28細胞
NCIADRRES細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RWPE-1細胞、CEL細胞、Mesothelial cells transfected with pRSV-T 5A細胞
MOLM16細胞系相關(guān)產(chǎn)品：16-HBE14o細胞、CEM-CCRF細胞、HSF細胞
L5178Y-R細胞系相關(guān)產(chǎn)品：mIMCD3細胞、RT-BM細胞、HK2細胞
ECC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：3T3 Swiss Albino細胞、Neuro2a細胞、H2126細胞
HET1A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COR-L279細胞、Mv 1 Lu細胞、HAVSMC細胞
HCV29細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GS9L細胞、HCC-1171細胞、WEHI 164細胞
McA-RH 8994細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A-375細胞、Baby Hamster Kidney-21細胞、SCL II細胞
HSAEC1-KT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-403細胞、MCF10-A細胞、SKNEP1細胞
Hep-G2/C3A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：alpha TC1-6細胞、SNU-16細胞、HUSMC細胞
rHSC-99細胞系相關(guān)產(chǎn)品：624細胞、PANC 203細胞、MCMEC細胞
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