"RKO-E6 Cell:人結(jié)腸癌轉(zhuǎn)基因細胞系
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹
AtT-20細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1436細胞、HConEpic細胞、A-253細胞
Oka-C1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-719細胞、NCI-H322細胞、HHFK細胞
HL-60 clone15細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MLOY4細胞、Tn-5B1-4細胞、NIH-OVCAR-3細胞
NCIH1385細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P 815細胞、NCI H345細胞、Kobe university Oral Squamous Cell culture-2細胞
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
RKO-E6 Cell:人結(jié)腸癌轉(zhuǎn)基因細胞系
細胞的凍存：目前，細胞凍存最常用的技術(shù)是液氮冷凍保存法，主要采用加適量保護劑的緩慢冷凍法凍存細胞。主要操作步驟為：(１)選擇處于對數(shù)生長期的細胞，在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng)液去掉，用０.２５%胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶，加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細胞，使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產(chǎn)細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(１０００r/min，１０分鐘)。(２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培養(yǎng)基，于４℃預(yù)冷１５分鐘后，逐滴加入已無菌的DMSO或甘油，用吸管輕輕吹打使細胞均勻，細胞濃度為３×１０(６)～１×１０(７)/mL之間。(３)將上述細胞分裝于安瓿或?qū)Ｓ美鋬鏊芰瞎苤?，安瓿裝１～１.５mL在火焰噴燈上封口，封口處要完全封閉，圓滑無勾。冷凍管要將蓋子蓋緊，并標記好細胞名稱和凍存日期，同時作好登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數(shù))。(４)將裝好細胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內(nèi);置于液氮容器頸口處存放過夜，次日轉(zhuǎn)入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟：先將安瓿置入４℃冰箱中２～３小時，再移至冰箱冷凍室內(nèi)３～４小時，再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放２小時，最后沉入液氮中。細胞凍存在液氮中可以長期保存，但為妥善起見，凍存半年后，取出一只安瓿細胞復(fù)蘇培養(yǎng)，觀察生長情況，然后再繼續(xù)凍存。
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
造成實驗室細胞污染常見情況總結(jié)：細胞培養(yǎng)中最常見污染的是細菌、真菌和支原體污染。細胞一旦污染，大多數(shù)較難處理。那么，哪些情況我們不注意的話就會造成細胞污染呢？我們根據(jù)常見細胞培養(yǎng)實驗分析總結(jié)下。【違規(guī)操作】１)為節(jié)省時間，有人已經(jīng)用超凈臺四個多小時，不開紫外滅菌３０min,酒精擦拭后直接開始試驗；２)器材或者溶液很久沒用，未檢測是否污染而直接使用；離心管多次使用，槍頭為了方便交叉使用；３)超凈臺不點酒精燈；點了酒精燈放在右上角，而你在左下角做試驗；４)不帶手套，徒手操作；５)細胞培養(yǎng)間配備槍式移液器、手術(shù)器械、離心機、冰箱等專用儀器設(shè)備以及專用的實驗服和拖鞋，未定期消毒。專用物品被帶出傳代細胞使用。培養(yǎng)細胞過程中使用的所有實驗用具，如移液管、一次性槍頭、一次性塑料離心管、凍存管等未按要求滅菌使用(通常需１２１°C高壓滅菌２０分鐘后３７％烤干備用)。超凈臺和桌面，東西太多太亂：超凈臺不是儲物箱，什么培養(yǎng)皿、各種規(guī)格的板子、槍頭就不要堆在超凈臺！這樣就會有許多紫外線顧不到的衛(wèi)生死角。傳代細胞其他的桌面，切忌東西堆積如山，不要將酒精棉球、標簽紙、牛皮紙買來后全部堆在傳代細胞！一不小心“飄”進你的細胞培養(yǎng)板里，細胞就會養(yǎng)的不好，啥時候死了都不知道！【培養(yǎng)箱太久沒清潔】細胞污染了，并非直接扔了培養(yǎng)皿就不管了，首先你還得看看這個恒溫培養(yǎng)箱里其他培養(yǎng)皿或孔板里的細胞是否污染，如果有而且好幾個板子都有類似的污染塊，那很可能是培養(yǎng)箱中的水或者空氣污染了，得給培養(yǎng)箱做個大掃除，重新酒精消毒，照紫外；孵箱里的水，水沒了要記得加，還得記得十天半個月的就用酒精擦擦托盤?！緜鞔毎硕嗫陔s，難管理】在傳代細胞這種衛(wèi)生要求高，人多了，不確定因素多了，難以保證試驗在無菌條件下操作。出入試驗室，實驗服當風(fēng)衣穿，不扣紐扣，不戴，就容易造成細胞污染；超凈臺做實驗時，喜歡說話聊著做試驗，要是還不帶口罩，里面就有很多細菌等著去攻擊你的細胞呢！
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
HCC2185細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BEL-7402細胞、CCD-33Co細胞、B16/F0細胞
OVCA433_Bast細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AE 1201細胞、Bat lung細胞、T1-73細胞
SCL-II細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C41細胞、LL/2(LLc1)細胞、CCFSTTG1細胞
Hs895.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BMU-S1細胞、D10細胞、H1395細胞
MC-CAR細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NSH細胞、SKLU1細胞、BE2M17細胞
細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分
RKO-E6 Cell:人結(jié)腸癌轉(zhuǎn)基因細胞系
貼壁細胞的消化方法介紹：１、胰酶。這是用得最多的。一般濃度在０.２５-０.５%。作用時間根據(jù)細胞種類、作用溫度等因素而變化很大，從幾分鐘到幾十分鐘不等。０.２５%的胰酶作用于單層貼壁的細胞，在３７度條件下，一般消化１-５分鐘就足夠了。終止是用血清。主要作用于細胞間。配制時不能用含、鎂的平衡液，否則影響活性。保存于-２０度。２、膠原酶。這種方法比較少，一般是用原代培養(yǎng)時，從組織消化下細胞。這種方法作用溫和，對細胞損傷較小，但是，價格也較貴。中止同樣是用血清。３、EDTA。用得也是非常多。一般濃度在０.０２%左右。作用于細胞與間質(zhì)，對細胞間也有一定作用。注意，它能顯著影響pH值，而且在弱堿性條件下才易溶。因此，配制時應(yīng)調(diào)節(jié)好酸堿度。它不能被終和。因此，消化下來的細胞要洗一遍。４、商品化的無酶消化液。個人的使用經(jīng)常覺得對細胞的損傷比較大，但是分離成單細胞懸液的能力確實比較強。５、物理法。直接吹打或用細胞刮子將細胞刮下來。６、冷凍法。此方法僅能用于細胞傳代時。無法使組織上的細胞脫落下來。本方法的原理，我想是因細胞冷凍后收縮，從而從培養(yǎng)瓶上脫落下來。優(yōu)點是：對細胞損傷小，不需要中止或洗細胞，方便，不需要另外配制消化液。特別適用那些貼壁不是特別緊，又特別嬌氣的細胞。不足是細胞常成小片脫落。此種方法曾用于因用其它方法傳代導(dǎo)致大量細胞死亡操作的間充質(zhì)干細胞、DC細胞的培養(yǎng)，效果非常滿意。具體過程是：１、用較多的４度的PBS 洗滌一遍細胞(以６孔板為例，加１.５ml/孔)，２、再加０.５毫升４度的PBS，靜置操作臺上，很快細胞就小片脫落，３、輕輕吹打，細胞即完全脫落，４、按一定比例傳代。
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
NCI-H460細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK Mel28細胞、NCI-H1793細胞、SW 480細胞
L6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKCO 1細胞、DU4475細胞、Michigan Cancer Foundation-12F細胞
OCI-Ly 19細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-HEP-1細胞、UCLA RO-81-A-1細胞、J 82細胞
Tu177細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CMT64細胞、Mhh-Call 2細胞、HPDE細胞
H-1734細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JM-1細胞、3T3NIH細胞、HBL-100細胞
RPMI7951細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-N-BE(2)-C細胞、HT144細胞、TGW-nu細胞
Namalwa細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A 253細胞、CV-1 in Origin Simian-7細胞、Mc Ardle 7777細胞
RKO-E6 Cell:人結(jié)腸癌轉(zhuǎn)基因細胞系
CWR22Rv1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2110細胞、Det 562細胞、HME-1細胞
DV90細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SRA01/04 (HLE)細胞、RenCa細胞、373 MG細胞
MD Anderson-Metastatic Breast-415細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM17219細胞、UACC-812細胞、D-324 Med細胞
NCIH716細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM03573A細胞、3D4/21細胞、AMJ2C8細胞
LC2/Ad細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RCM1細胞、McG-1細胞、Hep II細胞
Colo-678細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SupB15WT細胞、Hela-mock細胞、Biopsy xenograft of Pancreatic Carcinoma line-3細胞
Metastatic Variant-522細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2291細胞、GH 3細胞、Granta 519細胞
EC-GI細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MV-3細胞、PK13細胞、293-GP細胞
QSG7701細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKUT-1細胞、CCRF-SB細胞、PGBE1細胞
QSG7701細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKUT-1細胞、CCRF-SB細胞、PGBE1細胞
MNNGHOS細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BIC1細胞、V 79細胞、H28細胞
Hs-729-T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI8226細胞、OCILY-10細胞、MM96L細胞
SGC-7901/DDP細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD-841CoTr細胞、DHL5細胞、LLCPK1細胞
VMM-5A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CC-LP-I細胞、AtT20細胞、PL-9細胞
SNU-407細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-44細胞、SK UT 1細胞、TE-1細胞
L5178Y細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Transformed Human Liver Epithelial-3細胞、J774.A1細胞、PL-5細胞
HEK-A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LTPA細胞、VAESBJ細胞、NCIH747細胞
SDBMSC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：hSCC-25細胞、HSAS4細胞、VMM39細胞
J774A.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：32D:cl3細胞、UCLA-SO-14細胞、U-138-MG細胞
VMRC-LCD細胞系相關(guān)產(chǎn)品：M059K細胞、NBL-S細胞、NCI-H1522細胞
Pro-Lec1.3C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：3T3 clone A31細胞、UACC 812細胞、NCI-H1770細胞
H650細胞系相關(guān)產(chǎn)品：K1細胞、SK HEP 01細胞、RLE-6TN細胞
CTLL(2)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KU-19-19細胞、SLMT-1細胞、MC9細胞
HEL92.1.7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MLMEC細胞、MDA157細胞、GM05372細胞
SCL2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MD Anderson-Metastatic Breast-415細胞、4175細胞、TFK-1細胞
SNU398細胞系相關(guān)產(chǎn)品：G 401細胞、SKUT-1細胞、SK-N-BE(2)-C細胞
HEC-1B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPB/ALL細胞、SW-982細胞、H226細胞
PC615.3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC827細胞、LIM1215細胞、BEL7402細胞
YES-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H889細胞、OCI-LY-18細胞、BNL 1MEA.7R.1細胞
AC29細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEC-1-B細胞、H8細胞、GM3190細胞
SUM-102細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1651細胞、NRK 49F細胞、SKN-AS細胞
NCIH841細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C33-A細胞、HARAB細胞、NCI-SNU-761細胞
Jurkat FHCRC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCC-1395細胞、KMY1022細胞、SNK6細胞
P-36細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCT_116細胞、Chinese Hamster Ovary細胞、VM-CUB-1細胞
526-mel細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MMAc-Serum Free細胞、LLC-MK2細胞、JROECL 19細胞
SUP-T1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：N-2a細胞、A-431細胞、SN12C細胞
Tn5 B1-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CORL51細胞、UCLA-RO 81細胞、B-3細胞
B6Tert-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CEM-0細胞、EL4細胞、SNT8細胞
H341細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MTEC1細胞、Radiation Effects Research Foundation-Lung Cancer-MS細胞、MDAMB435細胞
751-NA-15細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SMA-560細胞、SW 480細胞、KYSE 70細胞
GM04671細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HONE-1細胞、Karpas-299細胞、H735細胞
RDES細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RC-4B/C細胞、CD 18細胞、BT 549細胞
HFL-I細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tregs細胞、HT1376細胞、H-295細胞
RKO-E6 Cell:人結(jié)腸癌轉(zhuǎn)基因細胞系
H22細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE 70細胞、Y3Ag1.2.3細胞、Glioma 261細胞
Ku812細胞系相關(guān)產(chǎn)品：VK-2/E6E7細胞、HTh 74細胞、EFM192細胞
RAW264.7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK MEL 5細胞、U-266細胞、Panc02-H0細胞
RetroPack PT67細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MAD109細胞、CAL78細胞、T84細胞
HT144mel細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDAMB435細胞、HPAF細胞、CHL1細胞
HT clone H9細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AsPC-1細胞、KU-19-19細胞、NCI-H2081細胞
MSB-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WEHI3細胞、MC57細胞、NBL-5細胞
EU-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FUOV1細胞、ZYM-DIEC02細胞、HEK-293F細胞
Kit 225-K6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：3T3-F442A細胞、PIEC細胞、SK-MEL-3細胞
BEL 7402細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HTR-8/SVneo細胞、SW403細胞、NT-2細胞
MDAMB361細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuH-6細胞、SW1783細胞、HT1080細胞
MGc80-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hep 3B細胞、IOSE-29細胞、Vero-E6細胞
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