"HT-3 Adherent人子宮頸癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:詳見(jiàn)相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
貼壁消化難題:1,先用PBS 把細(xì)胞洗兩遍,使瓶?jī)?nèi)沒(méi)有血清了,減少對(duì)胰酶的中和,然后用新配的0.25%的胰酶加入3ml左右,放在37度,然后可以在細(xì)胞有些消化下來(lái)時(shí),拿著瓶口,運(yùn)用手腕的力量輕輕震蕩瓶?jī)?nèi)液體,這樣細(xì)胞很快就下來(lái)了,還不需要吹打,分散也均勻;2,成團(tuán)、絮狀:消化液里加入edta可以減少細(xì)胞成團(tuán)的現(xiàn)象,血清可以終止胰酶的作用,如果是進(jìn)口血清的話也能終止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉,也可以不倒,直接加血清終止,如果消化液中加入了edta的話,就要將消化液倒干凈,如果細(xì)胞貼壁要求不是很嚴(yán)格的話,一般不需要進(jìn)行離心。鼻咽癌細(xì)胞的貼壁能力很強(qiáng),用0.5%胰酶(含0.1%EDTA)一般要消化12~15min。用PBS洗滌時(shí)要洗凈殘余的培養(yǎng)基,加入胰酶后在培養(yǎng)箱中消化(避免細(xì)胞室溫下受損以及在此溫度時(shí)胰酶活性最強(qiáng))至細(xì)胞收縮變圓(可顯微鏡下觀察)且有少許細(xì)胞脫落(有流下來(lái)的趨勢(shì)),隨后立即棄去胰酶(如果脫落的細(xì)胞很多且需要大量細(xì)胞實(shí)驗(yàn),則不能棄去胰酶),加入培養(yǎng)基仔細(xì)吹打(不能用無(wú)血清培養(yǎng)基或者PBS替代,否則細(xì)胞聚集成團(tuán)塊或絮狀)。一般我都離心一次棄去上清(去除殘留的胰酶及漂浮的死細(xì)胞或細(xì)胞碎片);消化過(guò)度:馬上用培養(yǎng)基中和,用吸管吹打細(xì)胞,收集全部的細(xì)胞到以無(wú)菌的離心管中800RPM 3分鐘。棄上清,用全培重懸,換新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng),狀態(tài)不好的細(xì)胞在培養(yǎng)的過(guò)程中會(huì)死亡脫落,在換液的時(shí)候可以清除掉!
細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁
細(xì)胞物種來(lái)源:人源或鼠源等其它物種來(lái)源
HT-3 Adherent人子宮頸癌細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細(xì)胞的凍存:為避免污染造成的損失,最小化連續(xù)細(xì)胞系的遺傳改變和避免有限細(xì)胞系的老化和轉(zhuǎn)化,需要凍存哺乳細(xì)胞。凍存細(xì)胞前,細(xì)胞應(yīng)該特性化并檢查是否污染。有幾種普通培養(yǎng)基用來(lái)凍存細(xì)胞。對(duì)于包含有血清的培養(yǎng)基,成分可能如下:包含10%甘油的完全培養(yǎng)基;包含10%二甲基亞砜(DMSO)的完全培養(yǎng)基;50%細(xì)胞條件培養(yǎng)基和50%含有10%甘油的新鮮培養(yǎng)基或50%細(xì)胞條件培養(yǎng)基和50%含有10%二甲基亞砜的新鮮培養(yǎng)基。對(duì)于無(wú)血清培養(yǎng)基,一些普通的培養(yǎng)基成分可能是:50%細(xì)胞條件無(wú)血清培養(yǎng)基和50%包含有7.5%二甲基亞砜的新鮮的無(wú)血清培養(yǎng)基或包含有7.5%二甲基亞砜和10%細(xì)胞培養(yǎng)級(jí)BSA的新鮮無(wú)血清培養(yǎng)基。懸浮細(xì)胞凍存:計(jì)數(shù)將要凍存的活細(xì)胞。細(xì)胞應(yīng)該處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期。以大約200~400g離心5分鐘沉淀細(xì)胞,使用移液管移去上清到最小體積,不要攪亂細(xì)胞。以1×10(7)到5×10(7)細(xì)胞/ml密度,在包含有血清的冷凍培養(yǎng)基中再次懸浮細(xì)胞,或者以0.5×10(7)到1×10(7)在無(wú)血清培養(yǎng)基中,再次懸浮細(xì)胞。分裝進(jìn)凍存管,將凍存管置于濕冰上或放入4℃冰箱中,5分鐘內(nèi)開(kāi)始冷凍步驟。細(xì)胞以1℃/分鐘進(jìn)行冷凍,可以通過(guò)可編程序的冷凍器進(jìn)行或者把隔離盒中的凍存管放到-70℃到-90℃的冰箱中,然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。貼壁細(xì)胞凍存:使用分離試劑從基層分離細(xì)胞,分離時(shí)盡可能溫和,使對(duì)細(xì)胞的損傷減少到最小。在完全生長(zhǎng)培養(yǎng)基中,再次懸浮分離細(xì)胞,確定有活力細(xì)胞數(shù)。以大約200g離心5分鐘沉淀細(xì)胞。使用移液管移去上清到最小體積,不要攪亂細(xì)胞。以5×10(6)到1×10(6)細(xì)胞/ml密度,在凍存液中懸浮細(xì)胞。分裝進(jìn)凍存管,將凍存管置于濕的冰上或放入4℃冰箱中,5分鐘內(nèi)開(kāi)始冷凍步驟。細(xì)胞以1℃/分鐘進(jìn)行冷凍,可以通過(guò)可編程序的冷凍器進(jìn)行或者把隔離盒中的凍存管放到-70℃到-90℃的冰箱中,然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。
CP-70細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MHCC97-H細(xì)胞、SNU-5細(xì)胞、UMC-11細(xì)胞
B16-F1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Huh7.5.1細(xì)胞、PAN 02細(xì)胞、143B TK-細(xì)胞
H-1436細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PNT1/A細(xì)胞、SUM-52-PE細(xì)胞、Hca-F細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法:1:2傳代
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明:細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
EL-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NHDF細(xì)胞、16HBE14o-細(xì)胞、MHCC-97細(xì)胞
ARH77細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-9細(xì)胞、SNU407細(xì)胞、P19細(xì)胞
HIBEpiC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK 293A細(xì)胞、Normal Rat Kidney-52E細(xì)胞、H2107細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng)特性:貼壁生長(zhǎng)
HT-3 Adherent人子宮頸癌細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)特性:詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū)
細(xì)胞接收后的操作流程與注意事項(xiàng):1)如果細(xì)胞為貼壁細(xì)胞,而收到時(shí)呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài),請(qǐng)將懸浮的細(xì)胞即時(shí)離心,加15%血清的完全培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)3天;同時(shí)原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細(xì)胞更換為15%血清的完全培養(yǎng)基培養(yǎng)3天。3天后若原瓶或者新瓶中的細(xì)胞都沒(méi)有出現(xiàn)增值而是繼續(xù)脫落死亡,請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系實(shí)驗(yàn)室技術(shù)人員會(huì)跟進(jìn)解決;2)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢;適當(dāng)提高血清濃度(最高不能超過(guò)20%),或可根據(jù)該細(xì)胞生長(zhǎng)密度,考慮胰酶消化后,轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng);3)生長(zhǎng)不均:貼壁細(xì)胞若出現(xiàn)分布不均,成島狀生長(zhǎng),可將細(xì)胞進(jìn)行消化,重懸打散細(xì)胞,加入新鮮培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)。
WI-38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RD細(xì)胞、LMTK-細(xì)胞、OCI-AML3細(xì)胞
Mevo細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Sci-1細(xì)胞、BxPC-3細(xì)胞、MDA2B細(xì)胞
Immortal Pig Intestinal-2I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHO Lec1細(xì)胞、LM TK negative細(xì)胞、Centre Antoine Lacassagne-27細(xì)胞
OCILY19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:hFOB 1.19細(xì)胞、NCIH2029細(xì)胞、Walker-256細(xì)胞
TE671細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AU-Mel細(xì)胞、SK.MEL.28細(xì)胞、Y3.AG.1.2.3細(xì)胞
WRL68細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:D-283細(xì)胞、H-2107細(xì)胞、LC-2/ad細(xì)胞
Hs 578T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-N-AS細(xì)胞、F98細(xì)胞、WM 239-A細(xì)胞
NCI-H735細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCA433細(xì)胞、MES-SA Dx5細(xì)胞、OsACL細(xì)胞
BC-023細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PL5細(xì)胞、COLO320HSR細(xì)胞、Gingival carcinoma Neck Metastasis細(xì)胞
Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-869細(xì)胞、SK-Col-1細(xì)胞、D341細(xì)胞
OVCAR-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:R 1610細(xì)胞、Lieming Xu-2細(xì)胞、VSC4.1細(xì)胞
Asian Medical Center-Head and Neck cancer-8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L 540細(xì)胞、RMC細(xì)胞、P3-X63-Ag8-653細(xì)胞
Hs737T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KLN 205細(xì)胞、MDAMB468細(xì)胞、HA細(xì)胞
HT-3 Adherent人子宮頸癌細(xì)胞系
Rat-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KMS18細(xì)胞、Kit225-K6細(xì)胞、526細(xì)胞
SUIT 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:K562/ADR細(xì)胞、P-3J細(xì)胞、SUDHL5細(xì)胞
C-4-I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Capan2細(xì)胞、beta-TC6細(xì)胞、Jijoye細(xì)胞
C-4-I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Capan2細(xì)胞、beta-TC6細(xì)胞、Jijoye細(xì)胞
COLO-699細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LI7細(xì)胞、CMT-64細(xì)胞、BSC-1細(xì)胞
Hx-147細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PLB 985細(xì)胞、MES-23.5細(xì)胞、PG-4細(xì)胞
NCIH2066細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL-62細(xì)胞、hTERT-HME-1細(xì)胞、SUDHL10細(xì)胞
H-1963細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CTX TNA2細(xì)胞、OCI-AML-4細(xì)胞、SK-MEL24細(xì)胞
DKMG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NR8383.1細(xì)胞、ECC 12細(xì)胞、Hs821T細(xì)胞
HEC-251細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM17346細(xì)胞、SV40-MES13細(xì)胞、MDA-MB361細(xì)胞
SW13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1436細(xì)胞、WERI-Rb1細(xì)胞、hTERT-HME-1細(xì)胞
Chang liver細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COS-7細(xì)胞、IB-RS2細(xì)胞、L-6TG細(xì)胞
H719細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL-78細(xì)胞、MV411細(xì)胞、HuT 78細(xì)胞
High 5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC 327細(xì)胞、MA104細(xì)胞、MKN7細(xì)胞
G 292 Clone A 141B1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:T-HEECs細(xì)胞、COV504細(xì)胞、X63-AG 8.653細(xì)胞
Hi-five細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HTh-74細(xì)胞、CAL851細(xì)胞、NCIH211細(xì)胞
NK-10A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:X63細(xì)胞、EFO 27細(xì)胞、LL/2(LLc1)細(xì)胞
WISH細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OLN 93細(xì)胞、OVCA433細(xì)胞、SW-1116細(xì)胞
MKN45細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE-671細(xì)胞、MCMEC細(xì)胞、SVG(P12)細(xì)胞
WEHI 3B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tca-8113細(xì)胞、4T1.2細(xì)胞、Nb2-11細(xì)胞
RAEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC2279細(xì)胞、NCIH2122細(xì)胞、HM06.A1細(xì)胞
IHH4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCTC929細(xì)胞、NCI-H1836細(xì)胞、VP267細(xì)胞
IPAM-WT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mink細(xì)胞、Hs 822.T細(xì)胞、BEND細(xì)胞
RGC-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI7666細(xì)胞、RKO-AS45-1細(xì)胞、RCC10 RGB細(xì)胞
HS5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:huH 1細(xì)胞、PLB985細(xì)胞、COLO829細(xì)胞
HeLa 229細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NTERA-2cl.D1細(xì)胞、LS 180細(xì)胞、FRTL5細(xì)胞
M-NFS-60細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ACC-2細(xì)胞、EOL1細(xì)胞、Caco-2 BBe細(xì)胞
MESSA/Dx5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KM12-SM細(xì)胞、HLEC-B3細(xì)胞、MEG01細(xì)胞
SK Hep1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:D-324MED細(xì)胞、Murine Lung Epithelial-12細(xì)胞、CCD841CoTr細(xì)胞
SW1990細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU1040細(xì)胞、CACO2細(xì)胞、C-4I細(xì)胞
SW837細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MRC 5細(xì)胞、293AD細(xì)胞、EBC-1細(xì)胞
Hs 840.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUIT-2細(xì)胞、HCC-2279細(xì)胞、Human Liver-7702細(xì)胞
TE-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK MEL 28細(xì)胞、MFC細(xì)胞、REC-1細(xì)胞
EFM19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC78細(xì)胞、MC3T3細(xì)胞、SKRC-52細(xì)胞
Det 562細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Loucy細(xì)胞、G402細(xì)胞、NCI-H1882細(xì)胞
451-LU細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-138 MG細(xì)胞、LY-R細(xì)胞、HOP92細(xì)胞
CHP126細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HC-11細(xì)胞、HCC2935細(xì)胞、LS174細(xì)胞
MiaPaCa-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TW-039細(xì)胞、FET細(xì)胞、Potorous tridactylus Kidney 1細(xì)胞
Ramos 2G6.4C10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NSI/1-Ag4-1細(xì)胞、Hx147細(xì)胞、no.11細(xì)胞
BEL/FU細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KOSC-2 cl3-43細(xì)胞、HBL1細(xì)胞、RT-BM細(xì)胞
74Int細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RT-BM細(xì)胞、H-1581細(xì)胞、H6c7細(xì)胞
KYSE140細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1573細(xì)胞、BJ1細(xì)胞、H1299細(xì)胞
HT-3 Adherent人子宮頸癌細(xì)胞系
TGW-nu-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hep2細(xì)胞、SW 626細(xì)胞、SF-539 BT細(xì)胞
H-510A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HUT28細(xì)胞、Line 207細(xì)胞、McCoy細(xì)胞
HEMCSS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:STTG1細(xì)胞、SKCO 1細(xì)胞、RL95細(xì)胞
NCTC-929細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW1417細(xì)胞、HGSMC細(xì)胞、HO8910PM細(xì)胞
D341細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:hFOB1.19細(xì)胞、CAL-120細(xì)胞、KASUMI6細(xì)胞
HN 4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NTERA2細(xì)胞、EFM-192A細(xì)胞、NCI-H1915細(xì)胞
KYSE-150細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BJA-B細(xì)胞、74Int細(xì)胞、Ly1細(xì)胞
U2OS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hela-Ap-1細(xì)胞、BIU-87細(xì)胞、KLN-205細(xì)胞
OAC-P4C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hut292細(xì)胞、Karpas 422細(xì)胞、AG06814-M細(xì)胞
CCD-1112sk細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Renal Carcinoma細(xì)胞、NCI-H102細(xì)胞、SW954細(xì)胞
KMS-18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MALME.3M細(xì)胞、343 MG細(xì)胞、GM637細(xì)胞
IMCD3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P560細(xì)胞、H1975細(xì)胞、U373細(xì)胞
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