"KMB-17 Adherent人二倍體細胞系
細胞背景資料：詳見相關文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
貼壁消化難題：１，先用PBS 把細胞洗兩遍，使瓶內(nèi)沒有血清了，減少對胰酶的中和，然后用新配的０.２５%的胰酶加入３ml左右，放在３７度，然后可以在細胞有些消化下來時，拿著瓶口，運用手腕的力量輕輕震蕩瓶內(nèi)液體，這樣細胞很快就下來了，還不需要吹打，分散也均勻；２，成團、絮狀：消化液里加入edta可以減少細胞成團的現(xiàn)象，血清可以終止胰酶的作用，如果是進口血清的話也能終止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉，也可以不倒，直接加血清終止，如果消化液中加入了edta的話，就要將消化液倒干凈，如果細胞貼壁要求不是很嚴格的話，一般不需要進行離心。鼻咽癌細胞的貼壁能力很強，用０.５%胰酶(含０.１%EDTA)一般要消化１２~１５min。用PBS洗滌時要洗凈殘余的培養(yǎng)基，加入胰酶后在培養(yǎng)箱中消化(避免細胞室溫下受損以及在此溫度時胰酶活性最強)至細胞收縮變圓(可顯微鏡下觀察)且有少許細胞脫落(有流下來的趨勢)，隨后立即棄去胰酶(如果脫落的細胞很多且需要大量細胞實驗，則不能棄去胰酶)，加入培養(yǎng)基仔細吹打(不能用無血清培養(yǎng)基或者PBS替代，否則細胞聚集成團塊或絮狀)。一般我都離心一次棄去上清(去除殘留的胰酶及漂浮的死細胞或細胞碎片)；消化過度：馬上用培養(yǎng)基中和，用吸管吹打細胞，收集全部的細胞到以無菌的離心管中８００RPM ３分鐘。棄上清，用全培重懸，換新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng)，狀態(tài)不好的細胞在培養(yǎng)的過程中會死亡脫落，在換液的時候可以清除掉！
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
KMB-17 Adherent人二倍體細胞系
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
血清必須貯存于–２０～-７０℃，若存放于４℃，請勿超過一個月。如果一次無法用完一瓶，可將４０～４５ml分裝于無菌５０ml離心管中，由于血清結凍時體積會增加約１０%，必須預留此膨脹體積之空間，否則易發(fā)生污染或容器凍裂之情形。一般廠商提供之血清為無菌，不需再無菌過濾。若發(fā)現(xiàn)血清有許多懸浮物，則可將血清加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾，勿直接過濾血清。瓶裝(５００ml)血清解凍步驟(逐步解凍法)：-２０℃或–７０℃至４℃冰箱溶解一天，至室溫下全溶后再分裝，一般以５０ml無菌離心管可分裝４０～４５ml。在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡)，使溫度與成分均一，減少沈淀的發(fā)生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解凍，因溫度改變太大，容易造成蛋白質(zhì)凝結而發(fā)生沈淀。勿將血清置于３７℃太久，若在３７℃放置太久，血清會變得混濁，同時血清中許多較不穩(wěn)定之成份亦會因此受到破壞，而影響血清之品質(zhì)。血清凝絮物：發(fā)生之原因有許多種，但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 變性及解凍后血清中存在之血纖維蛋白(fibrin) 造成，這些凝絮沈淀物不會影響血清本身之品質(zhì)。若欲減少這些凝絮沈淀物，可用離心３０００rpm，５min去除，或離心后上清液可以加入培養(yǎng)基中一起過濾。不建議用過濾步驟去除這些凝絮沈淀物，因為會阻塞過濾膜。顯微鏡下觀察之“小黑點”：通常經(jīng)過熱處理之血清，沈淀物的形成會顯著的增多。有些沈淀物在顯微鏡下觀察像是“小黑點”，常會誤認為血清遭受污染，而將血清放在３７℃中欲培養(yǎng)此“微生物”，但在３７℃環(huán)境下，又會使此沈淀物增多，更會誤認為微生物之增殖，但以培養(yǎng)細菌之培養(yǎng)基檢測，又沒有污染。一般而言，此小黑點應不會影響細胞之生長，但若懷疑此血清之品質(zhì)，應立即停用，更換另一批號的血清。
MKN-1細胞系相關產(chǎn)品：SNB-19細胞、SUM-159-PT細胞、HDLM-2細胞
NCIH1781細胞系相關產(chǎn)品：Jijoye細胞、NRK52E細胞、Sarcoma OSteogenic-2細胞
343 MG細胞系相關產(chǎn)品：SUD6細胞、alpha-TC1.6細胞、H-747細胞
細胞傳代方法：１：２傳代
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
KU 19-19細胞系相關產(chǎn)品：Bovine Turbinate細胞、NCIH2141細胞、Caco-2BBe細胞
M14細胞系相關產(chǎn)品：SK MEL-28細胞、T1-73細胞、Douglas Foster-1細胞
H-23細胞系相關產(chǎn)品：L 363細胞、SK-N-BE(2C)細胞、NCI-H187細胞
細胞生長特性：貼壁生長
KMB-17 Adherent人二倍體細胞系
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
細胞接收后的操作流程與注意事項：１)如果細胞為貼壁細胞，而收到時呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài)，請將懸浮的細胞即時離心，加１５%血清的完全培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)３天；同時原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細胞更換為１５%血清的完全培養(yǎng)基培養(yǎng)３天。３天后若原瓶或者新瓶中的細胞都沒有出現(xiàn)增值而是繼續(xù)脫落死亡，請及時聯(lián)系實驗室技術人員會跟進解決；２)貼壁細胞生長緩慢；適當提高血清濃度(最高不能超過２０%)，或可根據(jù)該細胞生長密度，考慮胰酶消化后，轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng)；３)生長不均：貼壁細胞若出現(xiàn)分布不均，成島狀生長，可將細胞進行消化，重懸打散細胞，加入新鮮培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。
H865細胞系相關產(chǎn)品：HEK 293FT細胞、B16F0細胞、R-1059-D細胞
SKMES-1細胞系相關產(chǎn)品：PCI-04B細胞、MDBK細胞、GES1細胞
S37細胞系相關產(chǎn)品：HBE135-E6E7細胞、Jurkat, Clone E6-1細胞、NCIH716細胞
HMSC細胞系相關產(chǎn)品：A2780CP細胞、SNU-387細胞、KU.812細胞
NCIH740細胞系相關產(chǎn)品：95C細胞、NCI-H3255細胞、CCC-HHM-2細胞
SW-403細胞系相關產(chǎn)品：TF-1a細胞、HSC5細胞、Lewis-Lung細胞
CCD841CoTr細胞系相關產(chǎn)品：A-72細胞、MFM223細胞、U-343細胞
SNU668細胞系相關產(chǎn)品：Malme-3M細胞、H-446細胞、DU 4475細胞
OVCAR 433細胞系相關產(chǎn)品：COLO394細胞、SMMC7721細胞、RPMI 8226細胞
SUM102PT細胞系相關產(chǎn)品：H-920細胞、TE 354.T細胞、Chang liver細胞
HPC-Y5細胞系相關產(chǎn)品：GM02131A細胞、H1694細胞、IEC 6細胞
FU-MMT-1細胞系相關產(chǎn)品：KG-1a細胞、H-522細胞、SK-Mel 2細胞
GC-1spg細胞系相關產(chǎn)品：SK.MEL.2細胞、NCI-H1299細胞、YES 2細胞
KMB-17 Adherent人二倍體細胞系
RSMC細胞系相關產(chǎn)品：SU-DH-L5細胞、TKB1細胞、UWB1.289細胞
Doubling time: ~50 hours (ATCC).細胞系相關產(chǎn)品：OV1/P細胞、HFL細胞、RBSMC細胞
IM95細胞系相關產(chǎn)品：CORL279細胞、Nakata-1細胞、Panc_04_03細胞
IM95細胞系相關產(chǎn)品：CORL279細胞、Nakata-1細胞、Panc_04_03細胞
KU 19-19細胞系相關產(chǎn)品：Bovine Turbinate細胞、NCIH2141細胞、Caco-2BBe細胞
CCC-ESF-1細胞系相關產(chǎn)品：H1781細胞、Namalwa細胞、MB231細胞
BL1339細胞系相關產(chǎn)品：L363細胞、OVISE細胞、H-358細胞
JROECL 19細胞系相關產(chǎn)品：BI-Mel細胞、KRC Y細胞、HBSMC細胞
RKO-AS-45-1細胞系相關產(chǎn)品：SGC996細胞、SuDHL 5細胞、Vero 76 clone E6細胞
SCC25細胞系相關產(chǎn)品：Hs-940細胞、Intestinal Epithelioid Cell line No. 6細胞、P3-Jiyoye細胞
C918細胞系相關產(chǎn)品：BNL CL.2細胞、HCT-15細胞、MDA435細胞
MCM細胞系相關產(chǎn)品：P-36細胞、C3H 10T1/2細胞、MFE280細胞
SBC-3細胞系相關產(chǎn)品：HCC4006細胞、NCIH716細胞、RM-1細胞
A549-Taxol細胞系相關產(chǎn)品：MLM細胞、KYSE410細胞、LNCaP-Clone-FGC細胞
NCI-H647細胞系相關產(chǎn)品：HCCLM6細胞、SPC-A-1細胞、Intestinal Epithelioid Cell line No. 6細胞
PC 61 5.3細胞系相關產(chǎn)品：NE1-E6E7細胞、ST2細胞、HT 1197細胞
HCT 116細胞系相關產(chǎn)品：H1694細胞、MOLT-16細胞、Metastatic Variant-522細胞
95C細胞系相關產(chǎn)品：BT474細胞、Lu-99A細胞、UO.31細胞
R 1610細胞系相關產(chǎn)品：E0771細胞、PA1細胞、MLE12細胞
AE 1201細胞系相關產(chǎn)品：Ly10細胞、L-5178-Y細胞、SNU-1040細胞
SU 86.86細胞系相關產(chǎn)品：UWB1.289細胞、HEK-293 c18細胞、Hs840_T細胞
CEM細胞系相關產(chǎn)品：Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-4細胞、HEK-293H細胞、H740細胞
DOK細胞系相關產(chǎn)品：GM12878細胞、Nthy ori 3.1細胞、NB-19細胞
Clone 166細胞系相關產(chǎn)品：CCD-33Co細胞、COLO 320F細胞、SV40 MES 13細胞
NBL_S細胞系相關產(chǎn)品：KCL22細胞、HEK.EBNA細胞、Ocular Choroidal Melanoma-1細胞
NCIH1666細胞系相關產(chǎn)品：MDCK (NBL-2)細胞、SUDHL10細胞、Murine Lung Epithelial-12細胞
My-La 2059細胞系相關產(chǎn)品：U-266 AR1細胞、H345細胞、MIMVEC細胞
NCTC-1469細胞系相關產(chǎn)品：COLO-357細胞、Jeko1細胞、FRhK4細胞
Pa16C細胞系相關產(chǎn)品：F9細胞、Panc02-H0細胞、HO-8910 PM細胞
RWPE-1細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H2073細胞、EFM192A細胞、TE3細胞
SKBr3細胞系相關產(chǎn)品：Hs-281-T細胞、HFTF細胞、OAW 42細胞
SF-295細胞系相關產(chǎn)品：HSMC細胞、SUM-149PT細胞、Ly8細胞
P3X63 Ag8.653細胞系相關產(chǎn)品：Factor Dependent Cell-Paterson 1細胞、HHL-5細胞、MDA231-LM2-4175細胞
SPC-A-1細胞系相關產(chǎn)品：CEM.C1細胞、BC-024細胞、751細胞
Colo16細胞系相關產(chǎn)品：HBMEC細胞、NCIH520細胞、Wills Eye Research Institute-Retinoblastoma-1細胞
NCIH1105細胞系相關產(chǎn)品：ST 486細胞、CT26.WT細胞、H-1299細胞
MOLP-2細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H157細胞、H-510A細胞、HCC-2935細胞
SPC-A-1細胞系相關產(chǎn)品：CEM.C1細胞、BC-024細胞、751細胞
C41細胞系相關產(chǎn)品：HEK293-A細胞、C2A細胞、EMT6細胞
VP267細胞系相關產(chǎn)品：Adult Retinal Pigment Epithelial cell line-19細胞、COV-434細胞、H2029細胞
MAD109細胞系相關產(chǎn)品：Karpas422細胞、S16細胞、Hs-940細胞
mouse Inner Medullary Collecting Duct-3細胞系相關產(chǎn)品：MC/CAR細胞、HEM-L細胞、HuH6細胞
KMB-17 Adherent人二倍體細胞系
MDA-MB 231細胞系相關產(chǎn)品：HCT 116細胞、UM-UC-1細胞、HCC1806細胞
Capan1細胞系相關產(chǎn)品：SK-RC-20細胞、UWB1-289細胞、HRMC細胞
MC/9細胞系相關產(chǎn)品：A7r5細胞、H-1355細胞、CMEC/D3細胞
NSC34細胞系相關產(chǎn)品：NTera 2/cl.D1細胞、H.Ep. #2細胞、LC1-Sq細胞
HFTF細胞系相關產(chǎn)品：HeLa細胞、AX-Mel細胞、NCIH1048細胞
786-0細胞系相關產(chǎn)品：NCIH716細胞、TOG細胞、NCIH2291細胞
OCI-LY-7細胞系相關產(chǎn)品：HEC-251細胞、SK-ES-1細胞、Hamster Islet Transformed-Tioguanine resistant clone 15細胞
A7r5細胞系相關產(chǎn)品：SKCol1細胞、HuH6細胞、NCI-H64細胞
NT-2細胞系相關產(chǎn)品：CATH.a細胞、CT 26細胞、3T3-L1細胞
P3-X63Ag8細胞系相關產(chǎn)品：HCC 2185細胞、B16/F0細胞、NUGC4細胞
LTEPa2細胞系相關產(chǎn)品：SNU-484細胞、PC10細胞、Hs_578t細胞
S37細胞系相關產(chǎn)品：HBE135-E6E7細胞、NCIH28細胞、P1-Raji細胞
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