細(xì)胞屬性:
產(chǎn)品名稱 | K7M2WT(K7M2-WT)-LUC小鼠骨肉瘤成骨細(xì)胞熒光素酶標(biāo)記 | 英文名稱 | K7M2WT(K7M2-WT)-LUC:K7M2WTK7M2WTLUC |
編號(hào) | XG-X3648 | 規(guī)格 | 1×106 |
組織來源 | BALB/c 器官: 骨 疾病: 骨肉瘤 來源轉(zhuǎn)移灶: 肺 細(xì)胞類型: 成骨細(xì)胞; | 形態(tài) | 貼壁細(xì)胞 成骨細(xì)胞 |
抗原表達(dá): CD31 陽性 [PubMed:1315100] 產(chǎn)物: 八因子 [PubMed: 11315100]; 整合唾液酸蛋白 (BSP) [PubMed11315100]; biglyan [PubMed: 11315100]; decorrin [PubMed:1315100]; villin 2 (ezrin) [PubMed: 11325848]. 骨唾液酸蛋白, biglyan, decorrin, 和 osteopontin 的表達(dá)顯示其骨家族細(xì)胞特性。 在本庫通過支原體檢測(cè)。
1基本特征與來源
細(xì)胞來源:
源自BALB/c小鼠的骨肉瘤肺轉(zhuǎn)移灶,屬于成骨細(xì)胞類型,具有骨肉瘤的典型生物學(xué)特性。
形態(tài)與標(biāo)記:
貼壁生長(zhǎng),形態(tài)為成骨細(xì)胞樣,表達(dá)CD31陽性。
產(chǎn)物包括骨唾液酸蛋白(BSP)、整合唾液酸蛋白(BSP)、biglycan等骨家族標(biāo)志物,證實(shí)其成骨分化特性。
基因修飾:
通過慢病毒轉(zhuǎn)染攜帶螢火蟲熒光素酶(Luc)基因,穩(wěn)定表達(dá)熒光素酶,用于活體成像追蹤腫瘤生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移。
2培養(yǎng)與凍存條件
培養(yǎng)基:
DMEM高糖培養(yǎng)10%胎牛血1%雙抗(青霉素-鏈霉素),氣相條件為95%空5CO,溫度37℃。
傳代與密度:
傳代周期3-5天,推薦傳代比例1:2至1:6,使用0.25%胰酶-EDTA消化。
傳代后密度需達(dá)70%-80%再進(jìn)行分瓶,避免長(zhǎng)期超過80%導(dǎo)致分化。
凍存液:
90%胎牛血10DMSO,需現(xiàn)用現(xiàn)配,凍存管干冰運(yùn)輸或復(fù)蘇后4℃暫存。
3熒光素酶標(biāo)記特性
構(gòu)建方法:
通過慢病毒載體(如FugW)整合Luc基因至基因組,結(jié)合嘌呤霉素篩選(終濃度2-μg/mL)維持穩(wěn)定表達(dá)。
熒光檢測(cè):
熒光素(D-luciferin)腹腔注射后1-2分鐘發(fā)光,峰值在10-30分鐘,持續(xù)約3小時(shí),推薦檢測(cè)時(shí)間窗口為注射后15-35分鐘。
發(fā)光強(qiáng)度與細(xì)胞數(shù)量正相關(guān),適用于活體成像(IVIS系統(tǒng))及體外細(xì)胞定量分析。
穩(wěn)定性維護(hù):
長(zhǎng)期培養(yǎng)需定期用嘌呤霉素篩選(建議每3代一次),防止熒光素酶基因丟失。
4應(yīng)用領(lǐng)域
腫瘤模型構(gòu)建:
原位骨肉瘤模型:通過脛骨或顱骨注射(推薦劑量1×10cells/10μL),模擬人類骨肉瘤的肺轉(zhuǎn)移(成功率>90%)。
皮下移植模型:用于藥物療效評(píng)估(如化療或免疫治療)。
機(jī)制研究:
研究骨肉瘤侵襲轉(zhuǎn)移、血管生成(如VEGF通路)及耐藥性。
結(jié)合基因編輯技術(shù)(如CRISPR敲除抑癌基因p53/Rb),驗(yàn)證特定基因功能。

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關(guān)鍵字: K7M2WT;小鼠骨肉瘤成骨細(xì)胞熒光素酶標(biāo)記;K7M2WT(K7M2-WT)-LUC:;
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