U266B1人多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞

 基本特性:

種屬來(lái)源:人

性別年齡:男性，53歲

組織來(lái)源:外周血

生長(zhǎng)特性:懸浮生長(zhǎng)

細(xì)胞形態(tài):淋巴母細(xì)胞

細(xì)胞規(guī)格:1 X 106cells/T25或1 mL凍存管

培養(yǎng)條件:RPMI-1640 + 15% fetal bovine serum (FBS)37 ℃, 5% CO2

凍存條件:90% FBS + 10% DMSO

傳代方法:1：2到1：4傳代，3-5天傳1代

1. 細(xì)胞系基本信息

名稱(chēng)：U266B1

來(lái)源：人多發(fā)性骨髓瘤（Multiple Myeloma, MM）細(xì)胞系，分離自一名多發(fā)性骨髓瘤患者的骨髓腫瘤組織。U266B1是多發(fā)性骨髓瘤研究中常用的細(xì)胞模型，具有骨髓瘤的典型特征。

特性：

組織學(xué)類(lèi)型：多發(fā)性骨髓瘤（MM），屬于漿細(xì)胞惡性腫瘤，特征為骨髓中異常漿細(xì)胞克隆性增殖。

基因表達(dá)譜：

漿細(xì)胞標(biāo)志物：高表達(dá)CD138（Syndecan-1）、CD38、CD79a、MUM1（IRF4）。

免疫球蛋白分泌：分泌單克隆免疫球蛋白（如IgG、IgA或輕鏈κ/λ）。

常見(jiàn)基因突變：

KRAS突變：約25%-30%的MM患者攜帶KRAS突變。

NRAS突變：約15%-20%的MM患者攜帶NRAS突變。

DIS3突變：約10%-15%的MM患者攜帶DIS3突變。

其他：可能攜帶TP53突變、FAM46C突變、BRAF突變等。

功能特性：

增殖能力較強(qiáng)，對(duì)化療藥物（如硼替佐米、來(lái)那度胺）敏感，但易產(chǎn)生耐藥性。

可能高表達(dá)PD-L1，對(duì)免疫檢查點(diǎn)抑制劑（如PD-1/PD-L1抗體）敏感。

2. 多發(fā)性骨髓瘤背景與U266B1的關(guān)聯(lián)

多發(fā)性骨髓瘤分子分型：

超二倍體型（Hyperdiploid）：染色體三體（如3、5、7、9、11、15、19、21號(hào)染色體），預(yù)后較好。

非超二倍體型（Non-hyperdiploid）：染色體易位（如t(4;14)、t(11;14)、t(14;16)、t(14;20)），預(yù)后較差。

基因突變譜：

t(4;14)：MMSET/FGFR3基因過(guò)表達(dá)，預(yù)后差。

t(11;14)：CCND1基因過(guò)表達(dá)，預(yù)后中等。

t(14;16)：MAF基因過(guò)表達(dá)，預(yù)后差。

t(14;20)：MAFB基因過(guò)表達(dá)，預(yù)后差。

U266B1的分子亞型：

需通過(guò)基因測(cè)序或FISH分析確認(rèn)其染色體異常和基因突變譜。

可能攜帶KRAS突變或NRAS突變，屬于非超二倍體型。

臨床相關(guān)性：

多發(fā)性骨髓瘤對(duì)蛋白酶體抑制劑（如硼替佐米）、免疫調(diào)節(jié)劑（如來(lái)那度胺）和CD38單抗（如達(dá)雷妥尤單抗）初始響應(yīng)率高，但易復(fù)發(fā)和耐藥。

U266B1作為多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞模型，可用于研究耐藥機(jī)制、免疫治療響應(yīng)及潛在治療靶點(diǎn)。

3. U266B1在科研中的應(yīng)用

藥物篩選與耐藥研究：

化療藥物：

蛋白酶體抑制劑：如硼替佐米、卡非佐米，針對(duì)骨髓瘤的蛋白酶體降解途徑。

免疫調(diào)節(jié)劑：如來(lái)那度胺、泊馬度胺，通過(guò)免疫調(diào)節(jié)和直接抗腫瘤作用抑制骨髓瘤。

CD38單抗：如達(dá)雷妥尤單抗，通過(guò)ADCC和CDC作用靶向CD38陽(yáng)性骨髓瘤細(xì)胞。

靶向藥物：

KRAS/NRAS抑制劑：如曲美替尼、司美替尼，針對(duì)KRAS/NRAS突變。

BCL-2抑制劑：如維奈托克，針對(duì)BCL-2高表達(dá)。

免疫檢查點(diǎn)抑制劑：針對(duì)PD-L1高表達(dá)，如帕博利珠單抗、納武利尤單抗。

耐藥機(jī)制：

化療耐藥可能與蛋白酶體亞基突變、免疫調(diào)節(jié)劑耐藥相關(guān)（如CRBN基因突變）、CD38表達(dá)下調(diào)相關(guān)。

靶向耐藥可能與KRAS/NRAS旁路信號(hào)通路激活、BCL-2家族蛋白高表達(dá)相關(guān)。

免疫逃逸可能與PD-L1表達(dá)下調(diào)、T細(xì)胞耗竭或腫瘤微環(huán)境（TME）免疫抑制相關(guān)。

分子機(jī)制研究：

KRAS/NRAS信號(hào)通路：KRAS/NRAS突變激活MAPK通路，促進(jìn)增殖和存活。

免疫微環(huán)境：研究PD-L1表達(dá)調(diào)控機(jī)制，探索免疫治療響應(yīng)預(yù)測(cè)標(biāo)志物。

骨髓微環(huán)境：研究骨髓瘤細(xì)胞與骨髓基質(zhì)細(xì)胞、破骨細(xì)胞的相互作用，探索耐藥機(jī)制。

3D培養(yǎng)與類(lèi)器官模型：

結(jié)合3D培養(yǎng)技術(shù)，模擬多發(fā)性骨髓瘤的骨髓微環(huán)境，研究腫瘤細(xì)胞與基質(zhì)細(xì)胞的相互作用。

通過(guò)類(lèi)器官模型驗(yàn)證藥物療效，推動(dòng)個(gè)性化治療。

4. 實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)

細(xì)胞培養(yǎng)條件：

培養(yǎng)基：通常使用RPMI-1640培養(yǎng)基，含10%-20%胎牛血清（FBS）和抗生素（如青霉素、鏈霉素）。

形態(tài)特征：細(xì)胞呈懸浮生長(zhǎng)，聚集成團(tuán)，增殖速度中等。

污染檢測(cè)：定期檢測(cè)支原體污染，避免實(shí)驗(yàn)誤差。

基因表達(dá)驗(yàn)證：

通過(guò)流式細(xì)胞術(shù)或免疫組化確認(rèn)CD138、CD38、MUM1等漿細(xì)胞標(biāo)志物的表達(dá)，確保細(xì)胞系身份正確。

功能實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)：

結(jié)合ELISA檢測(cè)免疫球蛋白分泌水平，驗(yàn)證U266B1的漿細(xì)胞功能。

通過(guò)Western blot或qPCR檢測(cè)KRAS/NRAS突變狀態(tài)，明確其分子特征。

公司出售的產(chǎn)品：

 注意事項(xiàng)：

污染防控：細(xì)菌污染：培養(yǎng)液渾濁、變黃，需添加抗生素（如青霉素-鏈霉素），污染嚴(yán)重時(shí)丟棄。

霉菌污染：顯微鏡下可見(jiàn)絲狀/絮狀漂浮物，需徹底消毒培養(yǎng)箱（過(guò)氧乙酸擦拭+紫外線照射），污染細(xì)胞立即丟棄。

支原體污染：無(wú)明顯外觀變化，需定期用PCR或熒光法檢測(cè)，污染后可用支原體清除試劑處理。

操作規(guī)范：收到細(xì)胞后，先檢查包裝完整性及干冰狀態(tài)，鏡檢細(xì)胞形態(tài)并拍照記錄（40x、100x、200x）。

未開(kāi)封細(xì)胞若污染或活性差（3天內(nèi)反饋），可申請(qǐng)重發(fā)；客戶操作失誤導(dǎo)致問(wèn)題不重發(fā)。

運(yùn)輸與保存：干冰運(yùn)輸：凍存管含1×10? cells，收到后立即轉(zhuǎn)入液氮或-80℃冰箱。

常溫運(yùn)輸：T25培養(yǎng)瓶，收到后靜置3-4小時(shí)穩(wěn)定狀態(tài)，再換液或傳代。