LP1人多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞

 基本特性:

種屬來源:人

性別年齡:女性，56歲

組織來源:外周血

生長特性:懸浮生長

細(xì)胞形態(tài):單細(xì)胞樣

細(xì)胞規(guī)格:1 X 106cells/T25或1 mL凍存管

培養(yǎng)條件:IMDM + 10% fetal bovine serum (FBS)+1%P/S37 ℃, 5% CO2

凍存條件:90% FBS + 10% DMSO

傳代方法:1:2傳代, 2-3天傳1代

1. 細(xì)胞背景

來源：LP1細(xì)胞源自一名多發(fā)性骨髓瘤患者的骨髓樣本，屬于B淋巴細(xì)胞系，具有漿細(xì)胞特性。

特征：

分泌單克隆免疫球蛋白（IgGκ型），符合多發(fā)性骨髓瘤的典型表現(xiàn)。

高表達(dá)CD138（Syndecan-1），是漿細(xì)胞的標(biāo)志物。

具有增殖快、侵襲性強(qiáng)的特點(diǎn)，適合研究骨髓瘤的惡性行為。

培養(yǎng)條件：

培養(yǎng)基：RPMI-1640（含10-20%胎牛血清，F(xiàn)BS）。

補(bǔ)充因子：部分研究添加IL-6（10 ng/mL）以維持細(xì)胞生長（模擬骨髓微環(huán)境）。

培養(yǎng)環(huán)境：37°C、5% CO?，懸浮生長（需定期吹打避免聚集）。

傳代比例：1:2至1:3（密度維持在1-2×10? cells/mL）。

3. 研究應(yīng)用

藥物篩選：

測試蛋白酶體抑制劑（如硼替佐米/Bortezomib）、免疫調(diào)節(jié)劑（如來那度胺/Lenalidomide）的療效。

研究耐藥機(jī)制（如NF-κB通路激活、自噬調(diào)控）。

分子機(jī)制：

研究MYC基因過表達(dá)、BCL-2家族蛋白在凋亡抵抗中的作用。

探索骨髓微環(huán)境（與基質(zhì)細(xì)胞共培養(yǎng)）對腫瘤生存的影響。

免疫治療：

評估CAR-T細(xì)胞或雙特異性抗體（如BCMA靶向療法）對LP1的殺傷效果。

4. 常見問題與優(yōu)化

細(xì)胞聚集：

解決方法：用**低濃度胰酶（0.05% Trypsin-EDTA）**短暫處理，或增加吹打次數(shù)。

生長緩慢：

檢查血清質(zhì)量（建議使用優(yōu)級FBS），或添加**β-巰基乙醇（50 μM）**增強(qiáng)活力。

支原體污染：

定期檢測（如PCR法），必要時(shí)使用Plasmocin處理。

公司出售的產(chǎn)品：

 注意事項(xiàng)：

污染防控：細(xì)菌污染：培養(yǎng)液渾濁、變黃，需添加抗生素（如青霉素-鏈霉素），污染嚴(yán)重時(shí)丟棄。

霉菌污染：顯微鏡下可見絲狀/絮狀漂浮物，需徹底消毒培養(yǎng)箱（過氧乙酸擦拭+紫外線照射），污染細(xì)胞立即丟棄。

支原體污染：無明顯外觀變化，需定期用PCR或熒光法檢測，污染后可用支原體清除試劑處理。

操作規(guī)范：收到細(xì)胞后，先檢查包裝完整性及干冰狀態(tài)，鏡檢細(xì)胞形態(tài)并拍照記錄（40x、100x、200x）。

未開封細(xì)胞若污染或活性差（3天內(nèi)反饋），可申請重發(fā)；客戶操作失誤導(dǎo)致問題不重發(fā)。

運(yùn)輸與保存：干冰運(yùn)輸：凍存管含1×10? cells，收到后立即轉(zhuǎn)入液氮或-80℃冰箱。

常溫運(yùn)輸：T25培養(yǎng)瓶，收到后靜置3-4小時(shí)穩(wěn)定狀態(tài)，再換液或傳代。