尿酸(Uric Acid, UA)含量測(cè)定試劑盒說(shuō)明書(shū)
微量法100T/96S
正式測(cè)定前務(wù)必取2-3個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定
測(cè)定意義:
UA是鳥(niǎo)類(lèi)和爬行類(lèi)動(dòng)物的主要代謝產(chǎn)物,正常人體尿液中產(chǎn)物主要為尿素,含少量尿酸。此外,UA還是重要的抗氧化劑,能清除超氧化物,羥自由基等。體內(nèi)UA生成量和排泄量不平衡會(huì)導(dǎo)致多種疾病的發(fā)生。例如,血中UA升高會(huì)引起痛風(fēng)、腎功能損害和動(dòng)脈硬化,相反UA降低會(huì)引起惡性貧血,在臨床診斷上具有重要的意義。
測(cè)定原理:
尿酸酶能催化UA生成尿囊素,CO2及H2O2,H2O2 氧化亞鐵氰化鉀中的Fe2+ 生成Fe3+ ,F(xiàn)e3+進(jìn)一步與酚和4-氨基安替比林縮合生成紅色醌類(lèi)化合物,在505nm下有特征吸收峰,測(cè)定反應(yīng)體系505nm的吸收值,可計(jì)算尿酸的含量。
組成:
產(chǎn)品名稱(chēng) | AO006-100T/96S | Storage |
緩沖液:液體 | 20ml | 4℃ |
試劑一:A粉末 | 1瓶 | 4℃避光 |
試劑一:B粉末 | 1瓶 | 4℃避光 |
試劑二:粉末 | 1瓶 | 4℃避光 |
說(shuō)明書(shū) | 一份 |
試劑一:
A:用于標(biāo)準(zhǔn)管和測(cè)定管,粉劑1瓶,4℃避光保存,使用前加13ml緩沖液溶解。
B:用于空白管,粉劑1瓶,4℃避光保存,使用前加7 ml緩沖液溶解。
試劑二:粉劑1管,4℃避光保存,使用前加2ml蒸餾水溶解,60℃加熱溶解。
自備儀器和用品:
恒溫水浴鍋、可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板和蒸餾水。
樣品的制備:
動(dòng)植物組織:建議稱(chēng)取約0.1g組織,加入1ml生理鹽水或蒸餾水,進(jìn)行冰浴勻漿,然后8000g,4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。
血清,培養(yǎng)液:直接檢測(cè)。
測(cè)定操作表
分光光度計(jì)或酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至505nm。
操作表
| 標(biāo)準(zhǔn)管 | 空白管 | 測(cè)定管 |
試劑一(μl) | A, 60 | B, 60 | A, 60 |
H2O(μl) | 180 | 240 | 180 |
試劑二(μl) | 60 |
|
|
樣品(μl) |
|
| 60 |
混勻,37℃水浴30min,取200μl于微量石英比色皿/96孔板中,測(cè)定505nm處各管吸光值,標(biāo)準(zhǔn)管和空白管只需做一管。 |
UV含量計(jì)算公式:
1. 組織:
(1)按樣本重量計(jì)算
尿酸含量(μmol/g 鮮重)=C標(biāo)準(zhǔn)品×(A測(cè)定管-A空白管)÷(A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管)÷ (W÷V樣總)=0.5×(A測(cè)定管-A空白管)÷(A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管)÷ W
(2)按樣本蛋白濃度計(jì)算
尿酸含量(μmol/mg prot)=C標(biāo)準(zhǔn)品×(A測(cè)定管-A空白管)÷(A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管)÷ Cpr =0.5×(A測(cè)定管-A空白管)÷(A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管)÷Cpr
(3)血清,培養(yǎng)液計(jì)算:
尿酸(μmol/L)= C標(biāo)準(zhǔn)品×(A測(cè)定管-A空白管)÷(A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管)×103
=500×(A測(cè)定管-A空白管)÷(A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管)
C標(biāo):標(biāo)準(zhǔn)品濃度0.5μmol/ml;V樣總:加入提取液體積,1ml;W:樣品質(zhì)量,g ;Cpr:樣本蛋白濃度,mg/ml;103 :1μmol/ L=103μmol/ ml
注意事項(xiàng):
1. 血清樣本請(qǐng)?jiān)?4小時(shí)內(nèi)測(cè)定,或者4℃密封避光保存不超過(guò)72小時(shí)。
2. 吸光值大于0.8可用蒸餾水稀釋樣本,并在計(jì)算公式中算入稀釋倍數(shù)。
3. 最低檢出限為10μmol/L。
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伊勢(shì)久(江蘇連云港)生物科技有限責(zé)任公司,成立于2019年,坐落于新亞歐大陸橋東方橋頭堡連云港市。公司由資深行業(yè)專(zhuān)家和雙一流高校博士聯(lián)合創(chuàng)辦,主要從事生化檢測(cè)、病理檢測(cè)和原料酶等相關(guān)試劑的研發(fā)和生產(chǎn)。
我司位于聯(lián)東U谷科技創(chuàng)新谷內(nèi)的2000平米的生產(chǎn)、研發(fā)基地已建成投入運(yùn)行,其中包括150平米的超十萬(wàn)級(jí)的潔凈車(chē)間。我司堅(jiān)持以自主研發(fā)為核心,現(xiàn)已生產(chǎn)出的脲酶、tRNA轉(zhuǎn)運(yùn)核糖核酸、刀豆球蛋白、胰蛋白酶抑制劑等產(chǎn)品,熱銷(xiāo)市場(chǎng)以來(lái)收到了客戶(hù)的廣泛好評(píng)。
公司秉承“ 摯誠(chéng)科研、匠心傳承” 的發(fā)展理念,聚焦于前沿生物技術(shù)的應(yīng)用和創(chuàng)新,努力成為生物科技領(lǐng)域的標(biāo)桿企業(yè)。堅(jiān)持以客戶(hù)為中心,致力于為中國(guó)的科研工作者提供高品質(zhì)的產(chǎn)品和專(zhuān)業(yè)服務(wù),始終是我們努力的目標(biāo)和方向。