1.酶學(xué)研究：

檢測 β - 半乳糖苷酶活性：是 β - 半乳糖苷酶的常用底物，二者特異性結(jié)合后，β - 半乳糖苷酶催化 pNPGal 水解，生成對硝基苯酚和 β -D - 吡喃半乳糖。對硝基苯酚在堿性條件下顯黃色，在 405nm 波長處有強(qiáng)吸收，通過分光光度法檢測吸光度變化，可準(zhǔn)確定量 β - 半乳糖苷酶的活性，廣泛應(yīng)用于酶活性分析實(shí)驗(yàn)。

研究酶的特性：通過改變反應(yīng)條件，觀察 pNPGal 與 β - 半乳糖苷酶的反應(yīng)情況，可深入研究酶的動(dòng)力學(xué)和熱力學(xué)性質(zhì)，如確定米氏常數(shù)、最大反應(yīng)速率、活化能等參數(shù)，有助于了解酶的催化特性、底物特異性及結(jié)構(gòu)與功能的關(guān)系。

2.基因表達(dá)研究：

作為報(bào)告基因的底物：在基因工程和分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中，β - 半乳糖苷酶基因（lacZ）常被用作報(bào)告基因。將含有 lacZ 基因的重組質(zhì)?；蜉d體導(dǎo)入細(xì)胞后，若 lacZ 基因成功表達(dá)，細(xì)胞內(nèi)會產(chǎn)生 β - 半乳糖苷酶，加入 pNPGal 作為底物，通過檢測酶促反應(yīng)的顯色情況，可直觀判斷目的基因是否在細(xì)胞中成功表達(dá)及表達(dá)水平。

3.疾病診斷與研究：

用于疾病診斷：在某些遺傳性疾病或代謝性疾病的診斷中具有輔助作用。如半乳糖血癥患者體內(nèi)，由于相關(guān)酶的缺陷，會導(dǎo)致 β - 半乳糖苷酶活性異常，通過檢測患者血液或組織樣本中 β - 半乳糖苷酶對 pNPGal 的水解能力，可輔助醫(yī)生進(jìn)行疾病的診斷和病情評估。

研究疾病機(jī)制：在腫瘤、神經(jīng)退行性疾病等研究中，pNPGal 可用于檢測病變組織或細(xì)胞中 β - 半乳糖苷酶活性的變化，幫助研究人員了解疾病發(fā)展過程中酶活性的改變及其與疾病發(fā)生、發(fā)展的關(guān)系，為疾病的發(fā)病機(jī)制研究提供重要線索。

4.微生物學(xué)研究：

篩選和鑒定微生物：利用 pNPGal 可篩選和鑒定能產(chǎn)生 β - 半乳糖苷酶的微生物。在培養(yǎng)基中添加 pNPGal，能分解 pNPGal 的微生物會使培養(yǎng)基顯色，從而快速篩選出目標(biāo)微生物，常用于微生物的分離、鑒定和計(jì)數(shù)等實(shí)驗(yàn)。

研究微生物代謝：在研究微生物的糖代謝途徑和調(diào)控機(jī)制時(shí)，pNPGal 可作為底物來研究微生物對半乳糖苷類物質(zhì)的利用情況，了解微生物在不同環(huán)境條件下的代謝特性和適應(yīng)性。