ONPG的作用主要體現(xiàn)在以下方面：

1.科研領域：

酶活性檢測：作為 β- 半乳糖苷酶的特異性底物，ONPG 可被 β- 半乳糖苷酶水解為半乳糖和黃色的鄰 - 硝基苯酚。通過比色法或分光光度法，在 410-420nm 波長處檢測黃色產(chǎn)物鄰 - 硝基苯酚的吸光度變化，能定量或定性分析 β- 半乳糖苷酶的活性，常用于研究酶的動力學、酶的表達與調控等。

基因表達研究：在基因工程和分子生物學研究中，常利用 ONPG 來檢測與 β- 半乳糖苷酶相關基因的表達情況。如在研究大腸桿菌乳糖操縱子（lac operon）時，通過 ONPG 試驗可判斷 lacZ 基因是否正常表達 β- 半乳糖苷酶，進而研究基因的轉錄、翻譯等調控機制。

微生物遺傳研究：ONPG 可用于篩選和鑒定具有特定基因或代謝能力的微生物菌株。如在誘變育種或基因工程改造微生物后，利用 ONPG 平板篩選出能夠產(chǎn)生 β- 半乳糖苷酶的陽性菌株，有助于研究微生物的遺傳變異和基因功能。

2.醫(yī)學診斷領域：

細菌鑒定與分類：在臨床微生物學檢驗中，ONPG 試驗是鑒別腸道桿菌的重要生化試驗之一。通過檢測細菌能否分解 ONPG 產(chǎn)生黃色產(chǎn)物，可區(qū)分乳糖發(fā)酵菌和非乳糖發(fā)酵菌，以及遲發(fā)酵乳糖的細菌，幫助快速準確地鑒定病原菌，為臨床診斷和治療提供依據(jù)。

疾病診斷輔助：某些疾病與 β- 半乳糖苷酶的活性異常有關，如遺傳性半乳糖血癥等。檢測患者體內相關組織或體液中 β- 半乳糖苷酶對 ONPG 的水解能力，有助于輔助診斷這些疾病，為疾病的早期診斷和治療提供參考。

3.工業(yè)生產(chǎn)領域：

酶制劑生產(chǎn)監(jiān)控：在 β- 半乳糖苷酶的工業(yè)化生產(chǎn)過程中，利用 ONPG 檢測酶活性，可實時監(jiān)控酶的發(fā)酵生產(chǎn)過程，優(yōu)化發(fā)酵條件，提高酶的產(chǎn)量和質量，確保產(chǎn)品符合質量標準。

乳制品質量檢測：可用于檢測乳制品中 β- 半乳糖苷酶的殘留活性。在乳制品加工中，若 β- 半乳糖苷酶殘留量過高，可能會影響產(chǎn)品的質量和口感，通過 ONPG 檢測可控制酶的添加量和反應程度，保證產(chǎn)品質量的穩(wěn)定性。