Na +K+ - ATP 酶活性測定說明書
分光光度法 50 管/24 樣
正式測定前務必取 2-3 個預期差異較大的樣本做預測定
測定意義:
Na +K+ - ATP 酶廣泛分布于植物、動物、微生物和細胞中,可催化 ATP 水解生成 ADP 和無機磷。
測定原理:
Na +K+ -ATP 酶分解 ATP 生成 ADP 及無機磷,通過測定無機磷的量來確定 ATP 酶活性。
需自備的儀器和用品:
可見分光光度計、臺式離心機、可調(diào)式移液器、1 ml 玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
樣品酶液的制備:
1、細菌、細胞或組織樣品的制備: 細菌或培養(yǎng)細胞:先收集細菌或細胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細菌或細胞數(shù)量(10 4個): 提取液體積(ml)為 500~1000:1 的比例(建議 500 萬細菌或細胞加入 1ml 提取液),超聲波破碎細菌或 細胞(冰浴,功率 20%或 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復 30 次);8000g 4℃離心 10min,取上清,置冰 上待測。
組織:按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(ml)為 1:5~10 的比例(建議稱取約 0.1g 組織,加入 1ml 提 取液),進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。
2、血清(漿)樣品:直接檢測。
伊勢久(江蘇連云港)生物科技有限責任公司
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