糖原快速染色

簡(jiǎn)介：

糖原染色是病理學(xué)中常規(guī)的染色方法之一，McManus在1946年最先使用高碘酸-雪夫技術(shù)顯示黏蛋白，該法常用來顯示糖原和其他多糖，該染色試劑盒不僅能夠顯示糖原，還能顯示中性黏液性物質(zhì)和某些酸性物質(zhì)以及軟骨、垂體、霉菌、真菌、色素、淀粉樣物質(zhì)、基底膜等。過碘酸(又稱高碘酸)是一種強(qiáng)氧化劑，它能氧化糖類及有關(guān)物質(zhì)中的1，2-乙二醇基，使之變?yōu)槎┡cSchiff試劑能結(jié)合成一種品紅化合物，產(chǎn)生紫紅色。由于高碘酸還可氧化細(xì)胞內(nèi)其他物質(zhì)，使用時(shí)應(yīng)注意選擇好高碘酸濃度和氧化時(shí)間，使氧化控制在既能把乙二醇基氧化成醛基又不至于過氧化，這是很關(guān)鍵的步驟。? 

BIOISCO糖原PAS快速染色液的特點(diǎn):?采用BIOISCO特有配方技術(shù)，大大增強(qiáng)了染色效果；性能穩(wěn)定，特異性強(qiáng)；操作簡(jiǎn)捷。與常規(guī)糖原PAS染色試劑盒相比，少了蘇木素染細(xì)胞核的步驟，大大提高了工作效率。適用于石蠟切片和冰凍切片。??

組成：

保存條件：。

一年有效。

自備材料：? 

1、蒸餾水?

2、系列乙醇?? 

操作步驟(僅供參考)：

1、組織固定:?石蠟切片固定于Carnoy固定液較好，可在4℃下固定以為避免極化。小塊組織2~3h，大塊組織可以適當(dāng)延長(zhǎng)時(shí)間，但不宜超過18h。固定后的組織可直接用95%乙醇浸洗幾次，然后入無水酒精脫水，再透明包埋。?

2、石蠟切片脫蠟入蒸餾水。冰凍切片直接入蒸餾水。?

3、自來水沖洗，蒸餾水浸洗。?

4、入過碘酸溶液，室溫氧化。?

5、自來水沖洗，蒸餾水浸洗。? 

6、入Schiff?Reagent,?置于室溫陰暗處浸染?(冰凍切片，石蠟切片可適當(dāng)延長(zhǎng)時(shí)間)。? ????????????????7、在上述操作過程中亞硫酸溶液:蒸餾水按一定的比例配制亞硫酸工作液。入亞硫酸工作液 洗。? 

8、自來水沖洗，更換蒸餾水沖洗。? 

9、逐級(jí)常規(guī)乙醇脫水。二甲苯透明，中性樹膠封固。?? 

染色結(jié)果：? 

備注：顏色深淺很大程度上取決于樣品在過碘酸溶液和Schiff?Reagent中作用時(shí)間的長(zhǎng)短。? 

陰性對(duì)照(可選)：? 

1、取淀粉酶溶解于PBS(pH5.3)?，處理，與其他切片共同入過碘酸溶液。結(jié)果應(yīng)為陰性。?

2、(備選方案)取唾液片(過濾后用)處理，與其他切片共同入過碘酸溶液。結(jié)果應(yīng)為陰性。?

3、(備選方案)如果對(duì)照片采用其自身樣本，對(duì)照片不經(jīng)過碘酸溶液這一步，直接入Schiff?Reagent。結(jié)果應(yīng)為陰性。?? 

注意事項(xiàng)：

1、?切片脫蠟應(yīng)盡量干凈，否則影響染色效果。? 

2、?過碘酸氧化時(shí)間不宜過久，氧化時(shí)的溫度以18～22℃最佳。? 

3、?過碘酸溶液和Schiff?Reagent應(yīng)置于4℃密閉保存，提前恢復(fù)到室溫，避光暗處使用。?

4、?在過碘酸溶液和Schiff?Reagent中的作用時(shí)間非常重要，應(yīng)該依據(jù)切片厚薄、組織的 類別等決定。冷凍切片染色時(shí)間盡量要短。??