毛細(xì)管凝膠電泳(CGE)是將板上的凝膠移到毛細(xì)管中作支持物進(jìn)行的電泳。凝膠具有多孔性,起類(lèi)似分子篩的作用, 溶質(zhì)按分子大小逐一分離。凝膠粘度大, 能減少溶質(zhì)的擴(kuò)散, 所得峰形尖銳, 能達(dá)到CE中最高的柱效。
質(zhì)粒DNA的構(gòu)象,即質(zhì)粒DNA的拓?fù)浣Y(jié)構(gòu),包括超螺旋、開(kāi)環(huán)和線(xiàn)性這3種形式,有研究者報(bào)道超螺旋構(gòu)象的質(zhì)粒DNA體內(nèi)轉(zhuǎn)染效率更高 。因此,國(guó)內(nèi)外藥品監(jiān)管機(jī)構(gòu)(如 FDA、EMA)發(fā)布的與基因治療產(chǎn)品相關(guān)的技術(shù)指導(dǎo)原則或產(chǎn)品相關(guān)的標(biāo)準(zhǔn)(如 EP、《中華人民共和國(guó)藥典》、USP)中均會(huì)將質(zhì)粒DNA超螺旋構(gòu)象的含量作為質(zhì)粒DNA純度的質(zhì)量控制要求之一,但所要求的方法與質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)有所不同。CGE法配合熒光檢測(cè)器更具有上樣量少,靈敏度高,檢測(cè)時(shí)間短,質(zhì)粒DNA構(gòu)象分離度好的特點(diǎn)。因此,近2年來(lái),已有國(guó)外的研發(fā)企業(yè)開(kāi)發(fā)這個(gè)方法作為放行檢測(cè)方法。
本產(chǎn)品為非變性凝膠電泳試劑盒。質(zhì)粒DNA在陰極端用壓力進(jìn)樣的方式注入,然后使用高壓電場(chǎng)根據(jù)分子量大小快速分離質(zhì)粒DNA不同構(gòu)象。使用熒光檢測(cè)可以準(zhǔn)確地檢測(cè)質(zhì)粒DNA不同構(gòu)像組分并進(jìn)行定量分析。
產(chǎn)品性能指標(biāo)
項(xiàng)目
指標(biāo)
質(zhì)粒DNA分子量大小范圍
100-10000bp
分子量準(zhǔn)確度
± 10%
檢測(cè)限(信噪比>3)
1ng/μl
定量范圍
20ng/μl -100ng/μl
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