在動(dòng)態(tài)追蹤蛋白互作與細(xì)胞內(nèi)定位研究中,“可視化” 是破解機(jī)制的關(guān)鍵 —— 定制多肽 MQRYVKRLHEV - 羅丹明熒光(全長(zhǎng) 10 肽,C 端或 N 端偶聯(lián)羅丹明熒光基團(tuán))憑借其序列特異性與熒光標(biāo)記的雙重優(yōu)勢(shì),成為實(shí)時(shí)追蹤靶蛋白功能的 “動(dòng)態(tài)探針”。10 肽序列 MQRYVKRLHEV 可精準(zhǔn)匹配特定蛋白的結(jié)合域或功能位點(diǎn),而羅丹明熒光基團(tuán)(如羅丹明 B、TRITC)則提供穩(wěn)定可見的紅色熒光信號(hào),讓原本 “看不見” 的分子相互作用與轉(zhuǎn)運(yùn)過程變得清晰可辨。?
三大核心科研場(chǎng)景,動(dòng)態(tài)解析機(jī)制?
蛋白互作的 “實(shí)時(shí)觀測(cè)儀”:若該多肽序列對(duì)應(yīng)某受體的配體結(jié)合基序,羅丹明熒光標(biāo)記使其能在熒光顯微鏡下實(shí)時(shí)追蹤與受體的結(jié)合過程。例如,在活細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中,可觀察到熒光多肽隨時(shí)間富集于細(xì)胞膜的受體區(qū)域,通過熒光共定位分析(與受體熒光抗體共染),直觀驗(yàn)證兩者的相互作用,甚至量化結(jié)合動(dòng)力學(xué)(如結(jié)合速率、解離速率),比傳統(tǒng) Pull-down 實(shí)驗(yàn)更能反映生理狀態(tài)下的動(dòng)態(tài)互作。?
細(xì)胞內(nèi)轉(zhuǎn)運(yùn)的 “熒光導(dǎo)航標(biāo)”:借助羅丹明的強(qiáng)熒光信號(hào)(量子產(chǎn)率約 0.7,激發(fā)波長(zhǎng) 550nm,發(fā)射波長(zhǎng) 570nm),可追蹤多肽在細(xì)胞內(nèi)的轉(zhuǎn)運(yùn)路徑。若 MQRYVKRLHEV 包含核定位信號(hào)或線粒體靶向序列,熒光標(biāo)記能清晰示蹤其從胞外進(jìn)入細(xì)胞、最終定位到特定細(xì)胞器的全過程,為解析蛋白的亞細(xì)胞定位機(jī)制提供直接證據(jù),尤其適用于病毒蛋白入核、信號(hào)分子胞內(nèi)傳遞等研究。?
功能域活性的 “可視化探針”:當(dāng)多肽序列涉及構(gòu)象敏感型功能域(如酶的活性中心、蛋白的變構(gòu)位點(diǎn))時(shí),羅丹明的熒光特性可間接反映功能域的活性狀態(tài)。例如,某些功能域在激活時(shí)會(huì)發(fā)生構(gòu)象變化,導(dǎo)致羅丹明標(biāo)記的多肽熒光強(qiáng)度或偏振度改變,通過熒光光譜儀檢測(cè)這些變化,可實(shí)現(xiàn)對(duì)功能域活性的實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè),為篩選激活劑或抑制劑提供 “可視化篩選模型”。?
熒光標(biāo)記優(yōu)勢(shì),適配動(dòng)態(tài)研究需求?
羅丹明標(biāo)記穩(wěn)定性高(光漂白半衰期>30 分鐘),適合長(zhǎng)時(shí)間動(dòng)態(tài)成像;標(biāo)記過程不影響 10 肽的天然結(jié)構(gòu)與活性(經(jīng) HPLC 驗(yàn)證,標(biāo)記后多肽與靶蛋白的結(jié)合親和力保持率>90%);支持與其他熒光探針(如 FITC 標(biāo)記的抗體)聯(lián)合使用,實(shí)現(xiàn)多色熒光共定位,豐富實(shí)驗(yàn)維度。此外,高純度定制品(HPLC 純度≥95%,熒光標(biāo)記率>90%)確保熒光信號(hào)的均一性,避免非特異性標(biāo)記干擾結(jié)果。?
無論是追蹤蛋白互作的瞬間動(dòng)態(tài),還是解析分子的胞內(nèi)轉(zhuǎn)運(yùn)路徑,這條熒光標(biāo)記定制多肽都能以 “可視化優(yōu)勢(shì)” 幫你突破傳統(tǒng)方法的靜態(tài)局限。動(dòng)態(tài)分子機(jī)制研究,需要能 “照亮” 過程的追蹤工具!
訂購(gòu):400-086-2158
來源:https://www.med-life.cn