MDCK [NBL-2]（犬腎上皮細胞）
別稱：Madin-Darby Canine Kidney (NBL-2) Cells；NBL-2；MDCK (NBL-2)
種屬與組織來源
- 物種：家犬（Canis lupus familiaris）
- 組織來源：成年雌性英國小獵犬腎臟（1958年分離自外觀正常的個體）
- 細胞類型：自發(fā)永生化上皮細胞
細胞特性與生物學特征
- 生長特性：貼壁依賴性生長，典型上皮細胞樣形態(tài)（多角形，緊密連接成單層）
- 功能特征：
- 角蛋白免疫過氧化物酶染色陽性，明確上皮來源；
- 廣泛用于病毒學研究（如流感病毒、冠狀病毒培養(yǎng)）、藥物跨膜轉(zhuǎn)運模型及極性細胞功能分析；
- 在β-淀粉樣蛋白前體加工及蛋白水解產(chǎn)物研究中具有重要應用價值。
- 生物安全等級：BSL-1（基礎安全級別，適用于常規(guī)實驗室操作）
質(zhì)量控制與鑒定
- 純度驗證：上皮細胞標志物（如E-cadherin、角蛋白）陽性表達；
- 無菌檢測：無細菌、真菌、支原體、HIV-1、HBV、HCV污染；
- 穩(wěn)定性：傳代后保持典型形態(tài)與功能特性，可穩(wěn)定擴增。
培養(yǎng)指南
- 推薦培養(yǎng)基：MEM（ATCC改良配方，貨號PM150467）+10% FBS（貨號164210）+1%青霉素-鏈霉素（P/S，貨號PB180120）
- 培養(yǎng)條件：37℃，5% CO?，飽和濕度；氣相環(huán)境為95%空氣+5% CO?
- 換液頻率：每2-3天更換新鮮培養(yǎng)基
- 傳代操作：推薦1:2至1:4比例傳代，使用0.25%胰蛋白酶（含EDTA）消化
- 凍存條件：凍存液配方為55%基礎培養(yǎng)基+40% FBS+5% DMSO，液氮長期保存
應用與研究價值
MDCK [NBL-2]細胞是病毒學、藥理學及細胞生物學研究的經(jīng)典模型，尤其適用于：
- 病毒復制機制研究（如流感病毒宿主適應性、抗病毒藥物篩選）；
- 藥物跨膜轉(zhuǎn)運模型（極性上皮細胞屏障功能分析）；
- 阿爾茨海默病相關(guān)β-淀粉樣蛋白代謝研究。
保藏與來源信息
- 保藏機構(gòu)：ATCC（CCL-34, CRL-6253）、ECACC（84121903, 85011435）
- 分離歷史：由S. H. Madin與N. B. Darby于1958年首次建立，為最早的自發(fā)永生化犬腎細胞系之一。