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今天希望通過對恩格列凈過氧化雜質(zhì)研究，能為客戶對SGLT-2抑制劑-列凈類化合物過氧化雜質(zhì)研究提供幫助。SGLT-2抑制劑中最耀眼的兩顆明星就是恩格列凈和達格列凈。據(jù)不完全統(tǒng)計，勃林格殷格翰的恩格列凈22年的銷售額就突破了82億美金，阿斯利康的達格列凈也在2022年賣出了近44億美金。SGLT-2抑制劑系列化合物信息，如圖1：

圖1：SGLT-2抑制劑系列化合物信息

恩格列凈目前有單方和復方（恩格列凈二甲雙胍），所以研發(fā)仿制的企業(yè)很多。根據(jù)振強內(nèi)部數(shù)據(jù)，僅2023年向我司采購過恩格列凈雜質(zhì)的企業(yè)就超過了45家。目前QCS官網(wǎng)上總共收錄了恩格列凈雜質(zhì)94個（掃描文末二維碼，查看所有雜質(zhì)列表）。本文將介紹我中心參照《恩格列凈片》進口注冊標準（標準號JX20150247）對恩格列凈過氧化物進行的相關(guān)檢測研究工作（恩格列凈過氧化物結(jié)構(gòu)信息如圖2：）。

圖2：恩格列凈過氧化物結(jié)構(gòu)信息

根據(jù)《恩格列凈片》進口注冊標準（標準號JX20150247）中有關(guān)物質(zhì)方法，我中心首先對該過氧化物雜質(zhì)進行了液相定性定位研究，色譜條件參照標準中的有關(guān)物質(zhì)方法（見圖3）

圖3：片劑進口注冊標準有關(guān)物質(zhì)方法

參照此方法，我中心對實驗室合成的恩格列凈過氧化物進行了測試，該過氧化物雜質(zhì)與恩格列凈原料藥的混合進樣結(jié)果見圖5，過氧化物雜質(zhì)單獨進樣圖譜結(jié)果見圖4：

圖4：恩格列凈過氧化物檢測色譜圖

恩格列凈過氧化物與恩格列凈混合進樣數(shù)據(jù)如圖5：

圖5：恩格列凈及其過氧化物混樣圖譜

以上色譜結(jié)果中，恩格列凈保留時間7.7分鐘，過氧化物雜質(zhì)保留時間3.6-3.8分鐘呈雙峰。由于過氧化物雜質(zhì)是一對非對映異構(gòu)體混合物（結(jié)構(gòu)式見圖6，關(guān)鍵手性以紅色標注），進口注冊標準條件對該結(jié)構(gòu)有一定的分離效果因而產(chǎn)生雙峰。

圖6：產(chǎn)生雙峰的手性碳位置圖

QCS研發(fā)中心使用液質(zhì)聯(lián)用色譜（LCMS）對該樣品進行了確認。通過方法優(yōu)化，恩格列凈過氧化物雜質(zhì)樣品的雙峰結(jié)果可以在LCMS中得到復現(xiàn)（圖7），通過對兩個色譜峰的MS進行對比（圖8&圖9）驗證了該結(jié)論。

圖7：過氧化物雙峰的LC-MS圖譜

圖8:過氧化物LC-MS圖譜中RT=38.272min色譜峰（左）和RT=40.275min色譜峰（右）的MS結(jié)果（模式：正離子)

圖9：過氧化物LC-MS圖譜中RT=38.272min色譜峰（左）和RT=40.275min色譜峰（右）的MS結(jié)果（模式：負離子)

從LC-MS檢測數(shù)據(jù)可以看到，恩格列凈過氧化物所出的兩個色譜峰在正離子模式下都出了[M+K]+的分子量，在負離子模式下都出了[M+HCOO]-的分子量，而且在正離子和負離子的模式下，兩個色譜峰所處的分子量都是一樣的。

此外，我研究中心對該樣品進行了核磁共振波譜測試和二級質(zhì)譜檢測，該樣品核磁波譜結(jié)果可以觀測到產(chǎn)品結(jié)構(gòu)信號；二級質(zhì)譜結(jié)果中可見明確的次級離子碎裂結(jié)構(gòu)，以上信息均符合產(chǎn)品結(jié)構(gòu)。從核磁氫譜數(shù)據(jù)也能看到該產(chǎn)品存在兩套峰，從側(cè)面證明了該產(chǎn)品是一對非對應(yīng)異構(gòu)體化合物存在，如圖10：

圖10：恩格列凈過氧化物HNMR圖譜和二級質(zhì)譜結(jié)果

除了以上工作外，我中心還根據(jù)《恩格列凈片》進口注冊標準（標準號JX20150247）中有關(guān)物質(zhì)方法對恩格列凈過氧化物（RM-E131628）進行了溶液穩(wěn)定性檢測，分別在配樣后0、1、2、4、8、12、24小時下進樣檢測，樣品放置在室溫下，未避光，檢測數(shù)據(jù)總結(jié)如下：

圖11：恩格列凈API（RM-E131600）及恩格列凈過氧化物（RM-E131628）溶液穩(wěn)定性數(shù)據(jù)匯總

從圖11中可以看出，在室溫（未避光）的條件下恩格列凈過氧化物（RM-E131628）溶液相對穩(wěn)定?？梢钥吹皆谂錁雍蟛煌瑫r間點對恩格列凈過氧化物和內(nèi)標物（恩格列凈API）的混合樣品進行監(jiān)控，結(jié)果顯示該雜質(zhì)穩(wěn)定性良好，不同時間點內(nèi)恩格列凈過氧化物峰1、峰2保留時間和峰面積無顯著變化（RSD值均小于2.0%）。說明在室溫、未避光，樣品溶液pH值為中性的條件下，恩格列凈過氧化物的樣品溶液是穩(wěn)定的。

另外，我中心除了對恩格列凈過氧化物（RM-E131628）做了HNMR、CNMR、DEPT、COSY、HSQC、HMBC和NOESY的全套核磁共振測試并提供相關(guān)圖譜解析。若客戶有意購買本公司恩格列凈過氧化物（RM-E131628）產(chǎn)品，本公司將會與客戶分享CNMR、DEPT、COSY、HSQC、HMBC和NOESY圖譜及圖譜解析的內(nèi)容。如果您有采購意向，請聯(lián)系小編吧。

除恩格列凈過氧化物雜質(zhì)產(chǎn)品外，我中心已經(jīng)完成了對恩格列凈過氧化物和達格列凈過氧化物的研究。以上產(chǎn)品均使用相關(guān)注冊標準方法進行了驗證，如有需要也請聯(lián)系小編吧。

我中心目前已經(jīng)完成了對以下四個SGLT-2抑制劑-列凈類化合物過氧化物的合成工作，卡格列凈和艾托格列凈過氧化物目前處于檢測信息收集階段，歡迎咨詢。

圖12：SGLT-2抑制劑過氧化物結(jié)構(gòu)式信息

恩格列凈過氧化物雜質(zhì)是我中心已經(jīng)非常成熟的產(chǎn)品，但是之前接到某客戶反饋在msms條件下與別的供應(yīng)商的數(shù)據(jù)有沖突，所以我中心也同步的檢測了msms數(shù)據(jù)，并結(jié)合我們的核磁二維數(shù)據(jù)做了同步分析，大家可以放心使用。對此有疑問或者需求的客戶可以聯(lián)系我們。