背景及概述^[1][2]

假馬齒莧為玄參科植物假馬齒莧Bacopamonnieri(L.)Wettst的全草，又名白花豬母菜。在印度使用假馬齒莧滋補大腦、改善記憶和智力，如焦慮、認知低下、精神不集中等已有3000年的歷史，目前用于治療精神病和癲癇。假馬齒莧促進記憶的主要化學成分是假馬齒莧皂苷A和假馬齒莧皂苷B，它們最重要的作用是提高認知、記憶功能，以及鎮(zhèn)靜抗焦慮和抗驚厥抗癲癇等生物活性。在我國主要分布于福建、臺灣、廣東、云南和四川等地。

假馬齒莧藥材中含量最高的為假馬齒莧皂苷A，其中主要有BacopasideⅠ(簡稱BacoⅠ，分子量979)、BacopasideⅡ(簡稱BacoⅡ，分子量929)、BacosideA3(簡稱BacoA3，分子量929)、BacopasaponinC(簡稱BacoC，分子量899)以及BacopasaponinCisomer(簡稱BacoCi，分子量899)，它們的母核結構類似，苷元均為jujubogenin(酸棗仁苷元)或pseudojujubogenin(偽酸棗仁苷元)，并且BacoⅡ和BacoA3、BacoC和BacoCi互為同分異構體。本專利分離純化后檢測的假馬齒莧皂甙含量均指這5個成分的液相含量總和。

專利CN1303098C提到了一種制備假馬齒莧皂甙的方法，原料乙醇提取，大孔樹脂分離，RP-18低壓柱或HPLC高效液相色譜純化，得到3種假馬齒莧皂甙，分別為BacoⅠ、BacoC和BacoD。該專利采用多歩柱層析的方法進行純化，周期長、成本高、不適用于工業(yè)化生產(chǎn)。

專利CN1833692B也提到了一種假馬齒莧皂甙的制備方法，原料采用40-80％乙醇提取，濃縮后再經(jīng)大孔吸附樹脂純化，直接采用10-95％乙醇洗脫，或先用10-60％乙醇洗脫，再用60-95％乙醇洗脫，可將假馬齒莧皂甙含量提高到20-80％(以假馬齒莧皂苷A計)。該專利通過樹脂純化，工藝周期長、試劑損耗大、且有效成分回收率低(80％含量的產(chǎn)品，回收率僅1.17％)，不利于工業(yè)化生產(chǎn)。

制備^[2]

步驟1-堿醇提?。?/p>

將原料假馬齒莧粉碎，采用原料質(zhì)量3-5倍量且質(zhì)量濃度為10％-30％乙醇溶液提取，濃縮干燥提取液，粉碎，所得樣品備用；所述乙醇溶液內(nèi)含乙醇溶液質(zhì)量0.3％-0.8％的氫氧化鈉、碳酸鈉、氧化鎂或氨水中任意一種；

步驟2-料液澄清：

向步驟1所得樣品中加入質(zhì)量5-10倍量質(zhì)量濃度為90％-95％乙醇溶液，攪拌，過濾，減壓濃縮，再加入絮凝劑攪拌，過濾，收集濾液，然后向濾液中加入活性炭脫色，再過濾，繼續(xù)收集濾液；所述絮凝劑是質(zhì)量濃度為0.8％-1.2％的陽離子絮凝劑、陰離子絮凝劑或復合離子絮凝劑；

步驟3-膜分離：

將步驟2所得的濾液通過超濾膜過濾，收集透過液，然后將透過液用納濾膜過濾，收集濃縮液，濃縮干燥后即得假馬齒莧皂甙粗品；所述超濾膜的截留分子量為2000～3000或3000～5000中的一種；所述納濾膜的截留分子量為400～500或500～600中的一種。

步驟4-純化：

將步驟3所得的假馬齒莧皂甙粗品粉碎，加入質(zhì)量1-2倍量的有機溶劑溶解，過濾，收集不溶物進行干燥，即得的假馬齒莧皂甙；所述有機溶劑為二氯甲烷、乙酸乙酯或丙酮中的一種或任意多種組合。

上述步驟1的優(yōu)選方案是：將原料假馬齒莧粉碎，采用原料質(zhì)量3-5倍量且質(zhì)量濃度為10％-30％乙醇溶液提取兩次，合并提取液并濃縮干燥，粉碎過80目篩，所得樣品備用；所述乙醇溶液內(nèi)含乙醇溶液質(zhì)量0.3％-0.8％的氫氧化鈉、碳酸鈉、氧化鎂或氨水中任意一種(假馬齒莧原料中含有有機酸類及Monnieraside等酸性物質(zhì)，假馬齒莧皂甙結構中的縮酮在酸性條件下不穩(wěn)定，因此加堿增加其穩(wěn)定性)。

上述步驟2的優(yōu)選方案是：向步驟1所得樣品中加入質(zhì)量5-10倍量質(zhì)量濃度為90％-95％乙醇溶液，攪拌溶解，過濾，減壓濃縮至液體體積的1/10-1/5，再加入絮凝劑攪拌，過濾，收集濾液，然后向濾液中加入活性炭脫色，再過濾，繼續(xù)收集濾液；所述絮凝劑是質(zhì)量濃度為0.8％-1.2％的陽離子絮凝劑、陰離子絮凝劑或復合離子絮凝劑；所述活性炭的型號為767活性炭、320活性炭、303活性炭或HB-F活性炭中的一種或任意多種的混合。

上述步驟2中絮凝劑與濃縮后液體的質(zhì)量比為0.03-0.05:1；所述活性炭和絮凝劑澄清后濾液的質(zhì)量比為0.01-0.03。上述步驟4的優(yōu)選方案是：將步驟3所得的假馬齒莧皂甙粗品粉碎，過80目篩，加入質(zhì)量1-2倍量的丙酮溶解，過濾，收集不溶物進行干燥，即得假馬齒莧皂甙。

本方法的優(yōu)點：

通過堿醇提取、高醇溶解、絮凝劑澄清、活性炭脫色等工藝除去大量的脂溶性雜質(zhì)及水溶性雜質(zhì)，進而根據(jù)上述5種假馬齒莧皂甙的分子量采用膜分離手段將其進一步細分離，有機試劑洗滌純化，從而將這5種成分液相含量總和提高至85％以上，避免了樹脂分離等復雜工藝，成本低，周期短，可操作性強，產(chǎn)品回收率2.2％左右，質(zhì)量穩(wěn)定，適用于工業(yè)化生產(chǎn)。

主要參考資料

[1] 李元元. (2014). 假馬齒莧皂苷Ⅰ治療阿爾茲海默癥的藥效及作用機制研究. (Doctoral dissertation, 第二軍醫(yī)大學).

[2] 崔雨晴, 張繼全, 吳飛, & 阮克鋒. (2016). 一測多評法測定假馬齒莧中間體中的5種三萜皂苷類成分含量. 上海中醫(yī)藥雜志(7), 88-93.

[3] 崔雨晴, 張繼全, 吳飛, 胡佳亮, 阮克鋒, & 馮怡. (2017). Hplc同時測定不同產(chǎn)地假馬齒莧中的5個三萜皂苷類成分. 藥物分析雜志(2), 54-60.