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胎牛血清的來源、分類、選擇及適用細(xì)胞

2025/8/21 9:20:06 作者:帝企鵝

胎牛血清(Fetal Bovine Serum, FBS)是細(xì)胞培養(yǎng)中最常用的補(bǔ)充劑,含有豐富的生長因子、營養(yǎng)物質(zhì)和激素,能夠提供氨基酸、脂質(zhì)、糖類和維生素等營養(yǎng)成分,用于支持細(xì)胞的生長和分裂?。

胎牛血清

來源

胎牛血清(FBS)是從懷孕母牛的胎牛血液中提取的。通常是從6-8月齡的胎牛中通過穿刺采血收集血液??。在母牛懷孕的特定階段,通過剖腹產(chǎn)取出胎牛,并在嚴(yán)格無菌條件下從胎牛心臟或主要血管采血。這一過程要求高精度操作和無菌環(huán)境,以確保血液不被污染,從而保證血清質(zhì)量。隨后,通過離心分離去除血細(xì)胞和纖維蛋白,并經(jīng)過多道過濾工序去除微生物和顆粒,最終得到純凈的胎牛血清。

分類

牛血清一般可以分為以下幾種:

a、胎牛血清 (FBS):最常用的培養(yǎng)基補(bǔ)充劑,含有豐富的生長因子和低水平抗體,廣泛用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)。

b、小牛血清 (CS):從小牛中提取,相較于胎牛血清抗體含量更高,適用于某些低成本的實(shí)驗(yàn)需求。

c、新生牛血清 (NCS):從出生不久的小牛體內(nèi)提取,生長因子含量略低,但仍適用于一些細(xì)胞實(shí)驗(yàn)。

d、成牛血清 (ABS):成分相對復(fù)雜且抗體較高,主要用于一些特定的實(shí)驗(yàn)需求。

根據(jù)血清的內(nèi)毒素含量、血紅蛋白含量、總蛋白含量等指標(biāo),將胎牛血清粗略分為三個(gè)等級。

胎牛血清-干細(xì)胞專用:經(jīng)過細(xì)胞培養(yǎng)檢測,適用于胚胎干細(xì)胞、間充質(zhì)干細(xì)胞、昆蟲細(xì)胞、神經(jīng)類細(xì)胞均可使用;

胎牛血清-特級:適用于對血清質(zhì)量要求較高的細(xì)胞培養(yǎng)(如:BeWo、 Vero、Caco-2 等細(xì)胞);

胎牛血清-優(yōu)等:適用于對血清質(zhì)量有一定要求的細(xì)胞培養(yǎng)(如:HepC2、RAW264.7、HacaT 等細(xì)胞)。

如何選擇優(yōu)質(zhì)的胎牛血清

選擇優(yōu)質(zhì)的胎牛血清主要看以下三點(diǎn):

(1)外觀

根據(jù)血紅蛋白含量的不同,胎牛血清可表現(xiàn)出黃色或紅色。總的來說,國產(chǎn)的血清呈現(xiàn)出蠟黃。進(jìn)口的血清,質(zhì)量好的呈現(xiàn)出淡黃、微紅色,差點(diǎn)的呈現(xiàn)出橘紅色或鮮紅色。當(dāng)然,熱滅活血清或保存不當(dāng)?shù)难澹捎谘t蛋白的破壞氧化,會(huì)呈現(xiàn)出暗紅,甚至咖啡色。

(2)沉淀

進(jìn)口的胎牛血清,過濾分裝前很少會(huì)反復(fù)凍融,生產(chǎn)后的成品也是清澈的,但隨著時(shí)間的推移,血清中的大量纖維蛋白會(huì)析出形成沉淀。當(dāng)然,進(jìn)口的新生牛血清,一般牛齡都在2周左右,血清中的各種蛋白含量明顯偏高,生產(chǎn)后血清可能會(huì)渾濁,甚至有大量沉淀。

(3)澄清度

進(jìn)口胎牛血清由于蛋白和脂類等物質(zhì)含量低,表現(xiàn)為稀薄、清淡,而國產(chǎn)血清,因?yàn)榻^大多數(shù)是新生牛血清,相對而言更加粘稠,顏色略深,這對于初步接觸血清的人很難判斷,但把兩者進(jìn)行對比,可容易分辨。

胎牛血清可用于哪些細(xì)胞的培養(yǎng)?

胎牛血清適用于多種常規(guī)細(xì)胞的培養(yǎng),如:心肌細(xì)胞、BSMCs、ARPE-19、HMEC-1、HUVEC、SV-HUC-1、GL261、SW480、THP-1、RKO、U251、4T1、PANO-2、229、CT-2A、KYSE150、KYSE450、HCT116、293T、293V、RAW264.7、HepG2、Huh7、THP-1、HaCat、HeLa、Vero、HCC1937、Balb/3T3等細(xì)胞。

胎牛血清是否需要熱滅活?

部分實(shí)驗(yàn)可能要求對胎牛血清進(jìn)行熱滅活以減少可能存在的補(bǔ)體等免疫活性成分。但需要注意的是,熱滅活會(huì)影響血清中的生長因子活性,因此應(yīng)視實(shí)驗(yàn)需求而定。

熱滅活血清的目的是去除血清中的補(bǔ)體等對熱敏感的物質(zhì),以避免補(bǔ)體對細(xì)胞的不良影響(如細(xì)胞溶解、平滑肌收縮等)。熱滅活在免疫學(xué)研究、培養(yǎng)胚胎干細(xì)胞、昆蟲細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞時(shí)可能是必要的。然而,對于大多數(shù)細(xì)胞培養(yǎng),熱滅活并非必需。

研究表明,熱滅活血清對細(xì)胞生長的促進(jìn)作用微弱,甚至可能因高溫處理降低血清品質(zhì),導(dǎo)致細(xì)胞生長速率下降。此外,熱處理血清雖可滅活補(bǔ)體,但也可能使蛋白質(zhì)變性,使沉淀物顯著增加,易被誤認(rèn)為污染。因此,是否進(jìn)行熱滅活需根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求和細(xì)胞類型謹(jǐn)慎決定。

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