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常用溶液的配制方法:PBS、CBS和Tris緩沖液

2025/8/20 13:08:34 作者:帝企鵝

PBS 是phosphate buffer saline的縮寫,中文通常稱為“磷酸鹽緩沖鹽溶液”,更準(zhǔn)確地譯名應(yīng)該是“磷酸鹽緩沖生理鹽水”,是生化實驗廣泛使用的一種緩沖溶液。通常是在PB的基礎(chǔ)上加入0.9% NaCl,擁有和人體體液類似的滲透壓和pH值。有時為了滿足其它需求,需加入K+、Ca2+或Mg2+。這個時候就需要用到D-PBS(Dulbecco′s Phosphate Buffered Saline,杜氏磷酸鹽緩沖鹽水),相對于PBS,其中磷酸二氫鉀濃度降低,避免與常見的鈣離子Ca2+、Mg2+及一些重金屬離子生成沉淀。

PBS緩沖液的配制

PBS的緩沖pH值范圍非常廣,可配置各種pH值的酸、堿、中性緩沖液,是最常見的緩沖體系之一。
配制酸性磷酸緩沖液可直接用NaH2PO4或KHPO,pH范圍在1-5;
堿性緩沖液可直接用NaH2PO4或K2HPO4,pH范圍在9-12;
中性緩沖液則用等濃度的NaH2PO4和Na2HPO4,溶液混合,pH在5.5-8.5。

以0.2mol/L中性磷酸緩沖液為例,不同摩爾濃度緩沖液加純化水稀釋即可(緩沖液的摩爾濃度指的是磷酸根的濃度,所以若稀釋后pH值有微小變化需要調(diào)整,不要用帶有磷酸根的溶液):磷酸氫二鈉(Na2HPO4*,0.2mol/L):28.39g/L;磷酸二氫鈉(NaH2PO4*,0.2mol/L):24g/L。配制100mLPBS緩沖液所用量如下圖所示:

不同pH的PBS緩沖液配方

碳酸緩沖液(CBS)的配制

CBS一般由碳酸和碳酸氫鈉配制,多為堿性。以0.2mol/L碳酸緩沖液為例,不同摩爾濃度緩沖液加純化水稀釋即可。碳酸鈉(Na2CO3*,0.2mol/L):21.2g/L;碳酸氫鈉(NaHCO3*,0.2mol/L):16.8g/L。配制50mL CBS緩沖液所用量如下圖所示:

不同pH的CBS緩沖液配方

Tris-HCl緩沖液的配制

貯備液A:0.2 mol/L三羥甲氨基烷(Tris-ydroxy methyLamino methanne,C4H11NO3,24.2g配成1000ml);

貯備液B:0.2 mol/L鹽酸(濃HCl 17.1ml配成1000ml)。

50ml ml A液 + x ml B液稀釋至200ml

不同pH的Tris-HCl緩沖液配方

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