背景及概述^[1]

蘇丹黑B是一種脂溶性染料，可將細(xì)胞中的脂類物質(zhì)染成棕黑色，定位于細(xì)胞質(zhì)內(nèi)。蘇丹黑B染色通常應(yīng)用于組織化學(xué)中用于區(qū)分石蠟和動(dòng)物脂肪，髓素染色，白細(xì)胞顆粒和高爾基氏器染色，細(xì)胞和組織中類脂質(zhì)的染色。蘇丹黑B染色液的傳統(tǒng)配制方法為：將蘇丹黑B溶于70％-100％的乙醇溶液中，即可。傳統(tǒng)方法配制的染色液，其溶劑易揮發(fā)，蘇丹黑B容易析出，最終導(dǎo)致染色不均勻、不清晰，以及染料沉淀導(dǎo)致染色背景不干凈的問題。

制備^[2]

一種蘇丹黑B染色液，其中含有異丙醇和乙二醇，以異丙醇和乙二醇的總體積計(jì)，其中含有的異丙醇的體積百分比范圍為大于等于60％并小于等于80％。

上述提供的蘇丹黑B染色液中，以染色液的總體積計(jì)，其中含有蘇丹黑B0.5-1.0w/v％(g/100ml)。所述的方法包括步驟：(1)將蘇丹黑B與異丙醇和乙二醇混合，得到混合溶液1；以異丙醇和乙二醇的總體積計(jì)，其中含有的異丙醇的體積百分比范圍為大于等于60％并小于等于80％；(2)將混合溶液1在30-40℃20-30小時(shí)；和(3)離心得到如上所述的本發(fā)明提供的蘇丹黑B染色液。

應(yīng)用^[3]

蘇丹黑B染色液用于快速檢測(cè)微藻油脂含量的方法，屬于微藻油脂含量的快速檢測(cè)技術(shù)領(lǐng)域。采用染色效果好、成本低的蘇丹黑B，通過建立適宜的染色程序和檢測(cè)方法，達(dá)到能快速、方便檢測(cè)微藻油脂含量的效果。具體實(shí)施過程為：用蘇丹黑B染色微藻細(xì)胞，確定出染色后的微藻細(xì)胞光吸收波長(zhǎng)，在此波長(zhǎng)下微藻細(xì)胞油脂含量與吸光值呈線性關(guān)系。通過建立染色后吸光值和微藻細(xì)胞油脂含量的關(guān)系方程式，對(duì)于待檢測(cè)的微藻樣品，先測(cè)定染色后的微藻細(xì)胞在645nm波長(zhǎng)的吸光值，然后通過相關(guān)方程式的計(jì)算，可以快速、準(zhǔn)確檢測(cè)出微藻樣品的油脂含量。本發(fā)明的方法具有快速準(zhǔn)確、簡(jiǎn)便易行、成本低的優(yōu)點(diǎn)，是值得采用的檢測(cè)微藻油脂含量的好方法。

主要參考資料

[1] CN201911197909.X一種蘇丹黑B染色試劑盒

[2] CN201110037185.X一種蘇丹黑B染色液及其制備方法和用途

[3] CN201010209174.0一種蘇丹黑B用于快速檢測(cè)微藻油脂含量的方法