910482-46-1
中文名稱
Cy5.5 N-羥基琥珀酰亞胺酯
英文名稱
CY5.5 NHS ESTER
CAS
910482-46-1
分子式
C45H48KN3O16S4
分子量
1054.22
MOL 文件
910482-46-1.mol
更新日期
2025/08/05 09:54:14
910482-46-1 結構式
物理化學性質
外觀性狀外觀 : 深藍色固體
ex/em : 678/706 nm (PBS緩沖液)
消光系數(ε) : 211000 L?mol?1?cm?1
量子產率(Φ) : 0.21
ex/em : 678/706 nm (PBS緩沖液)
消光系數(ε) : 211000 L?mol?1?cm?1
量子產率(Φ) : 0.21
溶解度易溶于DMSO，DMF等有機溶劑，極易溶于水
外觀Dark blue solid
ε(消光系數)211000 L?mol?1?cm?1
Φ(量子產率)0.21
激發(fā)峰(Ex)/發(fā)射峰(Em)678/706 nm (PBS buffer)
常見問題列表
熒光標記染料
磺化Cy5.5 (sulfo Cyanine 5.5; sulfo Cy5.5) 是一種發(fā)近紅外(NIR)熒光的花青素類熒光染料?；腔疌y5.5是磺化修飾過的Cy5.5，水溶性好?；腔疌y5.5的消光系數高，熒光也很亮，并且對pH不敏感，并且由于它的熒光波長（Em：706nm）恰好處于肌體組織近紅外窗口 I 的區(qū)域（肌體的血液，體液和組織此區(qū)域背景熒光弱，而長波長穿透性強），所以磺化Cy5.5常應用于小動物活體體內成像中?；腔疌y5.5-NHS可以用來標記蛋白，抗體，多肽,核酸分子等。由于強水溶性加帶電荷，磺化花青素標記的生物分子更穩(wěn)定，不易產生疏水性聚集。NHS活化酯 （N-羥基琥珀酰亞胺酯，N-hydroxysuccinimide ester，succinimidyl ester）是生物標記反應中最常用的活化基團。它活化Cy5.5分子中的羧基，讓它可以和目標生物分子上的胺基（伯胺或者仲胺）反應生成穩(wěn)定的酰胺鍵，從而把Cy5.5分子標記到生物大分子上。由于游離胺基是蛋白，抗體，多肽表面的常見官能團（來自于賴胺酸側鏈），磺化Cy5.5-NHS可以和它們直接反應。核酸分子中天然不帶游離胺基，只有胺基修飾過的RNA或者DNA才可以和磺化Cy5.5-NHS反應。
磺化Cy5.5-NHS活化酯的水溶性非常好，所以可以在水相的標記反應體系中直接使用，不需要有機溶劑助溶，特別適合標記蛋白等對有機溶劑敏感的生物分子。另外磺化Cy5.5水溶性極好，并且染料分子本身帶電荷，標記到蛋白表面后不會引發(fā)疏水性蛋白聚集，提高熒光標記產物的穩(wěn)定性?；腔疌y5.5-NHS也溶于甲醇，DMSO，DMF等有機溶劑，標記反應也可以在純有機溶劑中進行。如需脂溶性Cy5.5染料，可選擇普通花青素（cyanine），即Cy5.5-NHS活化酯。
磺化Cy5.5-NHS標記后的產物Ex/Em是678/706nm。和它具有相似熒光特性的染料包括Alexa Fluor 680，DyLight 680等。
注意事項
- NHS ester基團對濕度比較敏感，務必干燥保存產品。使用前產品需放到室溫回溫至少20分鐘。
- 使用不含氨基的緩沖體系。比如磷酸鈉緩沖液（PBS）,Hepes緩沖液，碳酸氫鈉緩沖液；或硼酸緩沖液等。不要使用任何含伯胺或仲胺的緩沖液，比如Tris，甘氨酸等。高濃度咪唑(imidazole)也會影響反應。
- 標記反應不要放在強光下，因為大部分熒光化合物在強光下長時間照射會緩慢漂白(photobleaching)。