987-78-0

33818-15-4

以2-(((((((2R,3S,4R,5R)-5-(4-氨基-2-氧代嘧啶-1(2H)-基)-3,4-二羥基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(羥基)磷?；?氧基)氧代磷?；?氧基)-N,N,N-三甲基乙銨為原料，合成2-((((((2R,3S,4R,5R)-5-(4-氨基-2-氧代嘧啶-1(2H)-基)-3,4-二羥基四氫呋喃-2-基)甲氧基)(羥基)磷酰基)氧基)氧化磷?；?氧基)-N,N,N-三甲基乙烷-1-銨鈉鹽(1:1)的一般步驟如下：將CMP（100mg，0.31mmol）在DMF（2mL）和三丁胺（150μL，0.62mmol）中的游離酸攪拌懸浮液于50℃加熱10分鐘，隨后冷卻至室溫。加入CDI（250mg，1.55mmol）后，懸浮液在幾分鐘內(nèi)變?yōu)槌吻迦芤?。反?yīng)混合物在室溫下無水條件下攪拌30分鐘，隨后用無水甲醇（100μL，2.48mmol）處理以水解過量的CDI。30分鐘后，加入無水氯化鋅（59mg，0.43mmol），隨后加入磷酸膽堿溶液（0.77M無水DMF溶液，2mL，1.55mmol）。反應(yīng)混合物在室溫下攪拌24小時。溶劑在真空中蒸發(fā)后，通過陰離子交換色譜法純化CDP-Cho 5。將殘余物溶解于水中，用Sephadex DEAE A-25樹脂離子交換柱色譜法純化，采用0-0.5M碳酸氫銨線性梯度洗脫，隨后在RP-18上進行色譜分離。通過將核苷酸溶液通過Dowex 50WX8柱，將三乙銨抗衡離子交換為鈉離子。冷凍干燥后得到1-（β-D-呋喃核糖基）胞嘧啶-5'-二磷酸膽堿（鈉鹽），為白色固體（115mg，收率74%）。HPLC：tR = 8.8min（λmax 276nm）；1H NMR（400MHz，D2O）δ 7.86（d，1H，H6，J6-5 = 7.6Hz），6.04（d，1H，H5，J5-6 = 7.6Hz），5.92（d，1H，H10，J10-20 = 4.0Hz），4.31（sl，2H，CH2-O），4.28-4.08（m，5H，H2O H30H40H50和H50b），3.60（t，2H，CH2-N，J = 4.2Hz），3.14（s，9H，CH3）；13C NMR（101MHz，D2O）δ 166.2（s，C4），157.7（s，C2），141.4（s，C6），96.6（s，C5），89.3（s，C10），82.6（d，C40，JC-P = 8.9Hz），74.1（s，C20），69.3（s，C30），65.9（s，CH2N），64.7（d，C50，JC-P = 5.1Hz），59.9（s，CH2O），53.9（s，CH3）；31P NMR（162MHz，D2O）δ 11.35（d，2Jab = 21.4Hz），12.14（d，2Jab = 21.4Hz）；HRMS（ESI）m/z：[M + H]+ C14H26N4O11NaP2計算值511.0971，實測值511.0973。

參考文獻：

[1] Tetrahedron Letters, 2014, vol. 55, # 38, p. 5306 - 5310

Citicoline是細胞膜磷脂質(zhì)中的主要成分，是由核糖、焦磷酸酯、胞嘧啶和膽堿組成的復(fù)雜的有機分子。Citicoline具有水溶性，其口服生物利用度大于90%。Citicoline對hCMEC/D3沒有促有絲分裂和趨化作用。然而，它能顯著地增強傷口愈合、球體發(fā)芽，強烈誘導(dǎo)基底膜基質(zhì)中內(nèi)皮管狀結(jié)構(gòu)的形成。Citicoline能夠誘導(dǎo)磷酸化ERK1/2的表達。它能保護hCMEC/D3免于細胞損傷/凋亡。Citicoline通過p-ERK1/2和IRS-1相關(guān)通路誘導(dǎo)血管新生、改善人腦微血管內(nèi)皮細胞的生存。