"Hs 739.T Cells(贈送Str鑒定報告)|人乳腺癌細胞

細胞背景資料：詳見相關文獻介紹

細胞形態(tài)：上皮細胞樣

解凍細胞常見實驗問題分析及推薦解決方法：在解凍凍存細胞時，發(fā)現(xiàn)會出現(xiàn)存活率低、大量細胞碎片及生長緩慢等問題，究竟是什么原因導致，我們該怎么進行解決？以下是國內外細胞培養(yǎng)專家針對解凍細胞實驗問題，總結的一些解決方案！出現(xiàn)低存活率的可能原因及推薦解決方案如下：１)解凍過程中細胞裂解，推薦的解決方案：可預期到一定量的細胞死亡，因此細胞的濃度應足夠GAO，考慮到這一損失。起始濃度為１*１０(６)至１*１０(７)細胞/毫升；２)解凍過程中的問題，推薦的解決方案：在-７０℃至-８０℃下保存冷凍的培養(yǎng)物，保存時間為１-５天，但這不是保存的方法。在３７℃充分解凍后應立即開始培養(yǎng)；３)對冷凍液過敏，推薦的解決方案：A.完全或部分更換培養(yǎng)基，減少培養(yǎng)基中冷凍液的量。在２４小時后更換培養(yǎng)液體可全部去除冷凍液。B.留出更多時間供培養(yǎng)物恢復。有時細胞需要幾周時間才能形成單層或密集的懸浮物，取決于冷凍時細胞的年齡或傳代次數(shù)或在生長階段中的位置。冷凍的Zui佳條件在對數(shù)期；４)被冷凍的原種細胞的年齡或冷凍時培養(yǎng)物的年齡，推薦的解決方案：解凍Zui近冷凍的細胞。細胞處于冷凍狀態(tài)的時間越長，存活率越低。檢查冷凍細胞的時間和方法。在冷凍時細胞應處于對數(shù)期。

細胞生長：貼壁

H4-II-EC3細胞類似產品：：SUM-190細胞、SKRC-20細胞、T241細胞

3AA細胞類似產品：：Centre Antoine Lacassagne-12T細胞、LN299細胞、F9細胞

T-98細胞類似產品：：SKml2細胞、MKN-28細胞、MDCK Type II細胞

KG1A細胞類似產品：：Colon-26細胞、UWB1.289+BRCA1細胞、Anip973細胞

MiaPaca.2細胞類似產品：：MGHU1細胞、L-428細胞、MDA-MB-330細胞

Hs 739.T Cells(贈送Str鑒定報告)|人乳腺癌細胞

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

[細胞產品包裝]鮮活細胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞：１ml凍存管(兩支)

在細胞培養(yǎng)過程中會出現(xiàn)這樣或那樣的問題，客戶遇到的問題從細胞生長角度來說，針對細胞培養(yǎng)過程中生長不HAO、甚至死亡的原因，我們做以下分析并提出相對應的解決方法。一、培養(yǎng)細胞生長不HAO》可能原因：細胞本身的狀態(tài)》1)細胞傳代次數(shù)多，細胞老化；2)細胞的接種量：接種量過低，細胞生長緩慢；3)細胞傳代時間過晚：細胞中毒，影響傳代后的細胞生長；4)胰酶消化時間過長或過短：時間過長，細胞死亡；時間過短，細胞未完全分離而成團，細胞死亡；5)細胞的凍存與復蘇：慢凍速融。污染：1)支原體污染；2)霉菌污染；培養(yǎng)基或血清：1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進行驗證；2)選擇的培養(yǎng)基是否合適；3)培養(yǎng)基配制是否準確無誤；培養(yǎng)環(huán)境：1)CO2供應是否正常；2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確；解決方法：根據(jù)以上四個方面的可能原因，做出針對性的解決方案》1)注意細胞的本身狀態(tài)：如傳代次數(shù)、接種量等；2)避免產生污染（用正規(guī)、合法、可溯源的血清）；3)要用合適的血清或培養(yǎng)基，ZuiHAO經(jīng)過驗證；4)注意實驗室的環(huán)境；二、培養(yǎng)細胞死亡》可能原因：1)培養(yǎng)箱內無CO2；2)培養(yǎng)箱內溫度波動太大；3)細胞凍存或復蘇過程中損傷；4)培養(yǎng)液滲透壓不正確；5)培養(yǎng)液中有毒代謝產物堆積；解決方法：1)檢測培養(yǎng)箱內CO2；2)檢查培養(yǎng)箱內溫度；3)取新的保存細胞種；4)檢測培養(yǎng)液滲透壓；5)換入新鮮培養(yǎng)液。

細胞傳代方法：１：２—１：３傳代；每周換液２-３次。

B16-F0細胞類似產品：：Hs737T細胞、AK細胞、HOEC細胞

NCIH1666細胞類似產品：：MDCK (NBL-2)細胞、SUDHL10細胞、Murine Lung Epithelial-12細胞

HCC44細胞類似產品：：NCIH358細胞、SF295細胞、ME1細胞

HTR8細胞類似產品：：JHH2細胞、Farage OL細胞、HDQP1細胞

SUM 102細胞類似產品：：Swiss-3T3細胞、ID8/MOSEC細胞、NFS60細胞

細胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫

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細胞生長特性：貼壁生長

HeLa/DDP細胞類似產品：：COLO 320細胞、KATO 3細胞、L-6 myoblast細胞

Ramos (RA)細胞類似產品：：BALB/3T3 clone A31細胞、H19-7細胞、Nb-2細胞

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SK.MEL.28細胞類似產品：：H-1770細胞、U-251細胞、Z138細胞

細胞接收后的操作流程與注意事項：１)如果細胞為貼壁細胞，而收到時呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài)，請將懸浮的細胞即時離心，加１５%血清的完全培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)３天；同時原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細胞更換為１５%血清的完全培養(yǎng)基培養(yǎng)３天。３天后若原瓶或者新瓶中的細胞都沒有出現(xiàn)增值而是繼續(xù)脫落死亡，請及時聯(lián)系實驗室技術人員會跟進解決；２)貼壁細胞生長緩慢；適當提GAO血清濃度(ZuiGAO不能超過２０%)，或可根據(jù)該細胞生長密度，考慮胰酶消化后，轉移到新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng)；３)生長不均：貼壁細胞若出現(xiàn)分布不均，成島狀生長，可將細胞進行消化，重懸打散細胞，加入新鮮培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。

細胞培養(yǎng)無菌操作步驟和注意事項：１.打開無菌工作臺及凈化室的紫外燈，消毒半小時以上。２.進入凈化室前先關閉紫外燈，打開超凈臺風機，等待３０min以上，以排盡臭氧。３.穿HAO隔離衣，戴HAO口罩，帽子。４.風淋２分鐘。５.０.１%水泡手，擦干。６.點燃酒精燈;超凈臺內應避免放入過多的物品;使用的吸管，滴管，試管，培養(yǎng)瓶等均事先滅菌。７.打開各類瓶蓋前先過火，以固定灰塵;打開的瓶口、試管口過火焰，鑷子使用前應經(jīng)火焰燒灼。８.水平式風機的超凈臺，應使瓶口斜置，應盡量避免瓶口敞開直立。９.同一根吸管或滴管不應連續(xù)用于幾個不同的細胞系；吸取培養(yǎng)基的吸管應離開培養(yǎng)瓶或試管口０.５cm，避免伸入培養(yǎng)瓶口或試管口；以防止細胞系的互相混雜污染。１０.漏在培養(yǎng)瓶上或臺上的液體，立即用酒精棉球擦凈。１１.操作完畢后恢復工作臺面。

C-32細胞類似產品：：EST81細胞、Cloudman M3細胞、UK Pan-1細胞

NCI-SNU-16細胞類似產品：：IHH細胞、NTERA-2細胞、T98細胞

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