"MV-522 Cell|人肺癌細胞

細胞背景資料：肺腺癌；女性

細胞形態(tài)：上皮細胞樣

傳代培養(yǎng)及其操作步驟：原代細胞培養(yǎng)成功以后，需要進行分離培養(yǎng)，否則細胞會因生存空間不足或密度過大，營養(yǎng)障礙，影響細胞生長。細胞由原培養(yǎng)瓶內分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細胞允許培養(yǎng)的細胞擴增(形成細胞株)，可以進行細胞克隆，易于保存，但可能喪失一些殊的細胞和分化征。傳代細胞形成細胞株的Zui大利處在于提供了大量持久的實驗材料，便于實驗?！静僮鞑襟E】１)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內舊培養(yǎng)液；２)向瓶內加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜；３)置３７℃孵箱或室溫(２５℃溫度)下進行消化，２~５min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進行觀察，當發(fā)現(xiàn)胞質回縮、細胞間隙增大后，應立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶內加入Hanks液少量，輕輕轉動培養(yǎng)瓶，把殘留消化液沖掉，然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液，終止消化；５)使用彎頭吸管，吸取瓶內培養(yǎng)液，按順序反復輕輕吹打瓶壁細胞，使之從瓶壁脫離形成細胞懸液。吹打時動作要輕柔，以防用力過猛損傷細胞；６)用計數(shù)板計數(shù)后，分別接種于新的培養(yǎng)瓶中，置CO２培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)；７)細胞培養(yǎng)換液時間應根據(jù)細胞生長的狀態(tài)和實驗要求來確定。一般２～３d后應換一次生長液。待細胞鋪滿器皿底面，即可使用；也可繼續(xù)傳代擴大培養(yǎng)或換成維持液?！咀⒁馐马棥浚?掌握HAO細胞消化的時間，消化時間過短時，細胞不宜從瓶壁脫落，過長的消化會導致細胞脫落、損傷；２)掌握HAO消化濃度，當消化液濃度過GAO時，消化時間應縮短，過低時細胞消化時間相對延長。

細胞生長：貼壁

Lu99A細胞類似產(chǎn)品：：B16-F1細胞、Renal Carcinoma細胞、MBT2細胞

M20 [Human melanoma]細胞類似產(chǎn)品：：WM115細胞、CAL 78細胞、SUDHL-16細胞

NS653細胞類似產(chǎn)品：：H1869細胞、HECCL-1細胞、NCI H747細胞

H1836細胞類似產(chǎn)品：：H-1581細胞、FRH-0201細胞、NHLF細胞

SK-MEL3細胞類似產(chǎn)品：：Human Embryo Lung-1細胞、HC-11細胞、HEK-293-F細胞

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

MV-522 Cell|人肺癌細胞

[細胞產(chǎn)品包裝]鮮活細胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞：１ml凍存管(兩支)

預防細胞污染的注意事項：實驗進行前，超凈臺用紫外燈照射30-60min，然后用75%酒精擦拭超凈臺臺面，并開啟超凈臺風扇運轉10min左右再開始實驗操作。實驗用品用75%酒精擦拭后才能放入超凈臺內；實驗用品用完應移出超凈臺，以利于氣流的流通。實驗完成后用75%酒精擦拭超凈臺臺面。每次操作只處理一種細胞；即使不同細胞使用相同的培養(yǎng)基也不要共享同一瓶培養(yǎng)基，避免細胞間的交叉污染。操作時小心取用無菌的物品，避免污染。勿碰觸吸管尖頭，不小心碰觸后應立即更換；不要在打開的容器瓶口正上方操作，容器打開后，傾斜45°操作，操作完成后及時蓋上瓶蓋。CO2培養(yǎng)箱的清潔是較易被忽視的地方，應1-2個月對培養(yǎng)箱定期進行清潔消毒。先用75%酒精擦拭培養(yǎng)箱內壁、隔板、水盤2-3次，用雙蒸水清洗，再用酒精棉球擦拭一遍，后紫外燈照射4h以上。水盤內加入無菌水（應每周更換），待培養(yǎng)箱內溫度、濕度、CO2濃度穩(wěn)定后再放入細胞。定期清洗或更換超凈臺過濾膜、預濾網(wǎng)。

C33細胞類似產(chǎn)品：：2B4細胞、B16-F10--RED細胞、MNNG-HOS (TE 85, clone F-5)細胞

CV-1 in Origin Simian-1細胞類似產(chǎn)品：：H-1993細胞、PG-4 (S+L-)細胞、TF-1a細胞

RenCa細胞類似產(chǎn)品：：NIE 115細胞、SVOG細胞、MT-2細胞

FHL124細胞類似產(chǎn)品：：GCT0404細胞、MADISON LUNG TA-109細胞、HeLa-229細胞

細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。

細胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫

C33細胞類似產(chǎn)品：：2B4細胞、B16-F10--RED細胞、MNNG-HOS (TE 85, clone F-5)細胞

CV-1 in Origin Simian-1細胞類似產(chǎn)品：：H-1993細胞、PG-4 (S+L-)細胞、TF-1a細胞

RenCa細胞類似產(chǎn)品：：NIE 115細胞、SVOG細胞、MT-2細胞

FHL124細胞類似產(chǎn)品：：GCT0404細胞、MADISON LUNG TA-109細胞、HeLa-229細胞

細胞生長特性：貼壁

細胞系永生化原理介紹：多數(shù)正常細胞的壽命是有限的，能傳20-100代，但有些細胞，尤其是來自嚙齒類或來自多數(shù)腫瘤的細胞，可以產(chǎn)生具有無限壽命的連續(xù)細胞系。嚙齒類動物細胞在分離時核型是正常的，在傳到12代左右以后可能出現(xiàn)危相，多數(shù)細胞在這個階段死亡了，但少數(shù)細胞存活下來，并擁有了更GAO的生長率，成為連續(xù)細胞系。目前認為永生化是一個多步驟的過程，包括一系列細胞周期的調節(jié)基因(如Rb和p53)失活。目前主要從兩個方向進行操作，病毒基因致永生化和端粒酶誘導的永生化，其原理如下：SV40 LT基因常用于誘導永生化。這個基因的產(chǎn)物-T抗原，可與Rb和p53結合。這樣不僅使細胞增殖的壽命得以延長，同時也限制了如p53這樣基因的DNA監(jiān)控活性，從而使基因組的不穩(wěn)定性增加，也增加了向永生化發(fā)展的進一步突變的機會(如上調端粒酶或下調端粒酶抑制物的活性)。用含可調節(jié)啟動子的端粒酶基因進行轉染，足以形成永生化細胞。這些基因中已被廣泛應用的有：EBV用于淋巴母細胞樣細胞；SV40 LT用于黏附細胞，如成纖維細胞(Mayne et al., 1996)、 角質形成細胞(Steinberg,1996) 和內皮細胞(Punchard et al.,1996)等;而hTERT則用于間充質干細胞和其他一些細胞。

HCC0202細胞類似產(chǎn)品：：B-CPAP細胞、HT-29/CX-1細胞、OV-1063細胞

MDA-MB415細胞類似產(chǎn)品：：VMCUB-1細胞、CAL 85-1細胞、Y-1細胞

Panc02-H0細胞類似產(chǎn)品：：PANC-08-13細胞、Y-1細胞、VA-ES-BJ細胞

Large Cell Lung Cancer-103H細胞類似產(chǎn)品：：WPMY-1細胞、A2780CP細胞、NCI-SNU-423細胞

SW839細胞類似產(chǎn)品：：RC-2細胞、Kit 225 K6細胞、SNU182細胞

OV3121細胞類似產(chǎn)品：：BCP-1細胞、NCI-BL1339細胞、Hs294細胞

PC-9S1細胞類似產(chǎn)品：：TK 10細胞、MDA-MB436細胞、RMG-I細胞

NCIH196細胞類似產(chǎn)品：：YES 2細胞、AZ521細胞、ZR75-1細胞

PT-67細胞類似產(chǎn)品：：Sp 2/0-Ag 14細胞、C666-1細胞、NCI-SNU-620細胞

IOSE29細胞類似產(chǎn)品：：C32r細胞、SCC7細胞、CORL26細胞

MV-522 Cell|人肺癌細胞

A-172 MG細胞類似產(chǎn)品：：HCC-827細胞、COLO-824細胞、MEC1細胞

HTori-3細胞類似產(chǎn)品：：LM6細胞、Hs 746T細胞、MUG-Chor1細胞

MD Anderson-Metastatic Breast-468細胞類似產(chǎn)品：：YH-13細胞、SLK細胞、NCIH1869細胞

B16/F1細胞類似產(chǎn)品：：H345細胞、HEK293E細胞、NCIH1648細胞

OE33細胞類似產(chǎn)品：：HPMC細胞、Ramos 2G6 4C10細胞、SK Hep1細胞

B16F1細胞類似產(chǎn)品：：870細胞、IPLB-Sf21細胞、BALB/3T3 cl. A31細胞

B16F1細胞類似產(chǎn)品：：870細胞、IPLB-Sf21細胞、BALB/3T3 cl. A31細胞

H4-II-E細胞類似產(chǎn)品：：Hmy.2 CIR細胞、PANC 203細胞、624細胞

DHL10細胞類似產(chǎn)品：：H1793細胞、TB-1 Lu細胞、32D CL3細胞

RPMI1846細胞類似產(chǎn)品：：KYSE50細胞、RSC-96細胞、HASMC細胞

MM1細胞類似產(chǎn)品：：MV 4;11細胞、Tregs細胞、NIH-3T3細胞

COLO-357細胞類似產(chǎn)品：：SNU449細胞、S91細胞、MM1.S細胞

NCI-H2030細胞類似產(chǎn)品：：TK+/- (clone 3.7.2C)細胞、H-2591細胞、BIU-87/Adr細胞

10T1/2細胞類似產(chǎn)品：：BGC-823細胞、MT2細胞、NTERA2細胞

MFC細胞類似產(chǎn)品：：MC3T3-L1細胞、C-Li-7細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-2細胞

NH-6細胞類似產(chǎn)品：：SKNBE-2細胞、HS0578T細胞、SK-MES1細胞

H-711細胞類似產(chǎn)品：：GM03570細胞、SNK1細胞、NIT-1細胞

PLC-PRF-5細胞類似產(chǎn)品：：NCIH345細胞、DU 4475細胞、207細胞

MC-CAR細胞類似產(chǎn)品：：NSH細胞、SKLU1細胞、BE2M17細胞

HuH-1細胞類似產(chǎn)品：：NIH:OVCAR-8細胞、DHL10細胞、NCI-H2291細胞

rUCMSCs細胞類似產(chǎn)品：：HEK.EBNA細胞、SB細胞、ME16C細胞

NS1-Ag4/1細胞類似產(chǎn)品：：MHH-CALL2細胞、MDA-MB-175細胞、BHK細胞

WiDrTC細胞類似產(chǎn)品：：SNU-251細胞、H-1954細胞、CHO-K1細胞

RetroPack PT67細胞類似產(chǎn)品：：MAD109細胞、CAL78細胞、T84細胞

H-920細胞類似產(chǎn)品：：JVM3細胞、SNU475細胞、NCIH2052細胞

SaOS細胞類似產(chǎn)品：：EA.Hy926細胞、RPMI #8226細胞、CWR22R-V1細胞

HUVSMC細胞類似產(chǎn)品：：H1436細胞、H2081細胞、SKMEL-1細胞

JVM3細胞類似產(chǎn)品：：NCI-SNU-761細胞、MDA-MB-231細胞、SH-SY5Y細胞

3396細胞類似產(chǎn)品：：MDA MB 361細胞、Panc 05.04細胞、PC-3M-2B4細胞

MV-522 Cell|人肺癌細胞

MCF7-GFP細胞類似產(chǎn)品：：P3/NS-1細胞、SW 1353細胞、CCRF-CEM C1細胞

HGC-27細胞類似產(chǎn)品：：FLS細胞、H510細胞、Roswell Park Memorial Institute 7951細胞

KMS-18細胞類似產(chǎn)品：：MALME.3M細胞、TCam 2細胞、HH [Human lymphoma]細胞

KY-50細胞類似產(chǎn)品：：CL MC/9細胞、NCI-SNU-407細胞、Hs 606細胞

Alpha Mouse Liver 12細胞類似產(chǎn)品：：KTC-1細胞、COV-362細胞、EAhy 926細胞

OVCAR420細胞類似產(chǎn)品：：SiHa細胞、MDA MB 134VI細胞、SF767細胞

HCE-2 [50.B1]細胞類似產(chǎn)品：：G-401細胞、HRA-19細胞、NCIH378細胞

H-35細胞類似產(chǎn)品：：KP 4細胞、SUDHL2細胞、BSC1細胞

C-643細胞類似產(chǎn)品：：AD293細胞、RA.1細胞、Granta519細胞

KTCTL-140細胞類似產(chǎn)品：：C518細胞、COLO 684細胞、H-1954細胞

NK-92 MI細胞類似產(chǎn)品：：H2291細胞、GP293細胞、BE(2)M17細胞

RDES-1細胞類似產(chǎn)品：：HuT 78細胞、U-373-MG細胞、C-Lu-65細胞

MDA-MB-435-S細胞類似產(chǎn)品：：Kit225-K6細胞、NTERA2D1細胞、Hs 737.T細胞

EB1細胞類似產(chǎn)品：：Colo320細胞、CCFSTTG1細胞、J774A1細胞

TSUpr1細胞類似產(chǎn)品：：SNU761細胞、UCLA NPA871細胞、KG1細胞

QBI-HEK 293A細胞類似產(chǎn)品：：EU-2細胞、MN9D細胞、CHAGOK1細胞

EBNA293細胞類似產(chǎn)品：：HSC-I細胞、OV-1063細胞、MiaPaCa2細胞

"