"HSC-5 [Human skin squamous cell carcinoma] Cell|人皮膚鱗癌細胞

細胞背景資料：皮膚鱗癌；男性

細胞形態(tài)：上皮細胞樣

解凍細胞常見實驗問題分析及推薦解決方法：在解凍凍存細胞時，發(fā)現(xiàn)會出現(xiàn)存活率低、大量細胞碎片及生長緩慢等問題，究竟是什么原因?qū)е拢覀冊撛趺催M行解決？以下是國內(nèi)外細胞培養(yǎng)專家針對解凍細胞實驗問題，總結(jié)的一些解決方案！出現(xiàn)低存活率的可能原因及推薦解決方案如下：１)解凍過程中細胞裂解，推薦的解決方案：可預(yù)期到一定量的細胞死亡，因此細胞的濃度應(yīng)足夠GAO，考慮到這一損失。起始濃度為１*１０(６)至１*１０(７)細胞/毫升；２)解凍過程中的問題，推薦的解決方案：在-７０℃至-８０℃下保存冷凍的培養(yǎng)物，保存時間為１-５天，但這不是保存的方法。在３７℃充分解凍后應(yīng)立即開始培養(yǎng)；３)對冷凍液過敏，推薦的解決方案：A.完全或部分更換培養(yǎng)基，減少培養(yǎng)基中冷凍液的量。在２４小時后更換培養(yǎng)液體可全部去除冷凍液。B.留出更多時間供培養(yǎng)物恢復(fù)。有時細胞需要幾周時間才能形成單層或密集的懸浮物，取決于冷凍時細胞的年齡或傳代次數(shù)或在生長階段中的位置。冷凍的Zui佳條件在對數(shù)期；４)被冷凍的原種細胞的年齡或冷凍時培養(yǎng)物的年齡，推薦的解決方案：解凍Zui近冷凍的細胞。細胞處于冷凍狀態(tài)的時間越長，存活率越低。檢查冷凍細胞的時間和方法。在冷凍時細胞應(yīng)處于對數(shù)期。

細胞生長：貼壁

BMDC細胞類似產(chǎn)品：：KGN細胞、AHH-1細胞、MDA MB 231細胞

CAL-12T細胞類似產(chǎn)品：：BEL-7404細胞、Hep 3B2細胞、GES1細胞

Sf21細胞類似產(chǎn)品：：U-251_MG細胞、MZCRC1細胞、SK-Mel 2細胞

CHP100細胞類似產(chǎn)品：：NIH:OVCAR-5細胞、Z310細胞、HSC6細胞

LNCaP C4-2B細胞類似產(chǎn)品：：BNCL2細胞、PCI-4M細胞、NCIH1618細胞

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

HSC-5 [Human skin squamous cell carcinoma] Cell|人皮膚鱗癌細胞

[細胞產(chǎn)品包裝]鮮活細胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞：１ml凍存管(兩支)

細胞培養(yǎng)時分布不均勻，通常操作步驟：做細胞生物學(xué)實驗，細胞鋪板大概是我們Zui常見的一個實驗。但有時候鋪得不是很均勻：要么中間密周圍稀，要么周圍密中間禿。下面為大家分享幾點經(jīng)驗。盡量消化細胞分散成單細胞懸液。對于易于消化的細胞，我一般DPBS清洗一遍，加0.5ml胰酶潤洗一遍（25cm2培養(yǎng)瓶或6孔板），棄掉胰酶，37度消化2-3分鐘或室溫消化5min左右，鏡下觀察是否細胞消化較為分散。如果不夠，延長消化時間。96孔板一般以100微升每孔接種，直接用100微升移液器吸取細胞懸液，沿孔壁（稍離開一點孔底即可，不要離底太GAO）直接接入，移液器不需完全打到Zui大，輕輕按下即可，每鋪完一行換一次槍頭同時輕輕混勻細胞懸液。都加完后蓋上蓋子，左手輕輕扶住板的左邊，右手輕輕敲擊板的右邊緣，注意把握力度（我一般輕巧敲三下），太強或次數(shù)太多會導(dǎo)致細胞集中成堆，將板順時針旋轉(zhuǎn)（逆時針效果不HAO），依次敲擊剩余三個邊，靜置約5分鐘，放入37度培養(yǎng)箱。6孔板、12孔板或24孔板，可采用將每個孔加入少量無血清培養(yǎng)基，晃動浸潤整個孔底，然后用移液槍吸至第二孔，同樣方法浸潤孔底，其它孔依此類推，這樣整個孔底都是濕潤的，細胞懸液會平鋪在整個孔底，注意加完細胞懸液后要放工作臺靜置一下。這個方法就是有點慢，但操作熟練了也不慢。也可以采用輕拍的方式，但力度沒有96孔板HAO掌握，效果沒有96孔板HAO。培養(yǎng)瓶里面加HAO細胞以后(比如傳代HAO/分HAO細胞以后)，先順時針搖晃3次，馬上逆時針搖晃3次。然后延X軸Y軸分別水平搖動3次。放入CO2培養(yǎng)箱后,平放著培養(yǎng)瓶重復(fù)延X軸Y軸分別水平搖動3次。

COV-434細胞類似產(chǎn)品：：HT-1376細胞、PNT-1A細胞、B16BL6細胞

MCA-205細胞類似產(chǎn)品：：HEK-293 c18細胞、NCI-SNU-1040細胞、Nb2a細胞

SW-1417細胞類似產(chǎn)品：：Jurkat FHCRC細胞、NCI-H889細胞、JURKAT E-6.1細胞

HBZY1細胞類似產(chǎn)品：：VeroE6細胞、Mac-1細胞、LS 174T細胞

細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。

細胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫

COV-434細胞類似產(chǎn)品：：HT-1376細胞、PNT-1A細胞、B16BL6細胞

MCA-205細胞類似產(chǎn)品：：HEK-293 c18細胞、NCI-SNU-1040細胞、Nb2a細胞

SW-1417細胞類似產(chǎn)品：：Jurkat FHCRC細胞、NCI-H889細胞、JURKAT E-6.1細胞

HBZY1細胞類似產(chǎn)品：：VeroE6細胞、Mac-1細胞、LS 174T細胞

細胞生長特性：貼壁

細胞系永生化原理介紹：多數(shù)正常細胞的壽命是有限的，能傳20-100代，但有些細胞，尤其是來自嚙齒類或來自多數(shù)腫瘤的細胞，可以產(chǎn)生具有無限壽命的連續(xù)細胞系。嚙齒類動物細胞在分離時核型是正常的，在傳到12代左右以后可能出現(xiàn)危相，多數(shù)細胞在這個階段死亡了，但少數(shù)細胞存活下來，并擁有了更GAO的生長率，成為連續(xù)細胞系。目前認為永生化是一個多步驟的過程，包括一系列細胞周期的調(diào)節(jié)基因(如Rb和p53)失活。目前主要從兩個方向進行操作，病毒基因致永生化和端粒酶誘導(dǎo)的永生化，其原理如下：SV40 LT基因常用于誘導(dǎo)永生化。這個基因的產(chǎn)物-T抗原，可與Rb和p53結(jié)合。這樣不僅使細胞增殖的壽命得以延長，同時也限制了如p53這樣基因的DNA監(jiān)控活性，從而使基因組的不穩(wěn)定性增加，也增加了向永生化發(fā)展的進一步突變的機會(如上調(diào)端粒酶或下調(diào)端粒酶抑制物的活性)。用含可調(diào)節(jié)啟動子的端粒酶基因進行轉(zhuǎn)染，足以形成永生化細胞。這些基因中已被廣泛應(yīng)用的有：EBV用于淋巴母細胞樣細胞；SV40 LT用于黏附細胞，如成纖維細胞(Mayne et al., 1996)、 角質(zhì)形成細胞(Steinberg,1996) 和內(nèi)皮細胞(Punchard et al.,1996)等;而hTERT則用于間充質(zhì)干細胞和其他一些細胞。

EFM192C細胞類似產(chǎn)品：：C3H/10T1/2-clone8細胞、LS411N細胞、H3255_DA細胞

H740細胞類似產(chǎn)品：：Neuro2a細胞、SUM-190細胞、IOSE80細胞

H2227細胞類似產(chǎn)品：：ARPE19細胞、TW01細胞、COLO 741細胞

PC14細胞類似產(chǎn)品：：LMTK-細胞、Sup T-1細胞、HOPC細胞

H378細胞類似產(chǎn)品：：McA-RH 8994細胞、H-929細胞、293H細胞

KTA7細胞類似產(chǎn)品：：NuTu-19細胞、M07e細胞、QGY7701細胞

SK ES 01細胞類似產(chǎn)品：：MKN45細胞、PSN-1細胞、NCI-H1385細胞

HFF細胞類似產(chǎn)品：：MAEC細胞、HuH 6細胞、P3.653細胞

SNT8細胞類似產(chǎn)品：：CCD33Co細胞、OCI-LY-10細胞、HP615細胞

SUIT2細胞類似產(chǎn)品：：rRMECs細胞、PG-4(S+L-)細胞、CHO Lec1細胞

HSC-5 [Human skin squamous cell carcinoma] Cell|人皮膚鱗癌細胞

RM-1細胞類似產(chǎn)品：：ChaGo K-1細胞、HOP-92細胞、159PT細胞

J82COT細胞類似產(chǎn)品：：SK MES 1細胞、P3-X63-Ag 8.653細胞、SJCRH30細胞

Helacyton gartleri細胞類似產(chǎn)品：：HCGC細胞、VP229細胞、RBL.2H3細胞

SKML-28細胞類似產(chǎn)品：：CT26.CL25細胞、TE32細胞、PG13細胞

WEHI231細胞類似產(chǎn)品：：LICR-HN6細胞、McA-RH 7777細胞、VMRC-RCZ細胞

NCI-H1404細胞類似產(chǎn)品：：THP-1細胞、159PT細胞、XWLC-05細胞

NCI-H1404細胞類似產(chǎn)品：：THP-1細胞、159PT細胞、XWLC-05細胞

RIN-m5F細胞類似產(chǎn)品：：NCIN87細胞、CCC-HHM-2細胞、639V細胞

SCC-1395細胞類似產(chǎn)品：：mREC細胞、HCC-1500細胞、Buffalo Rat Liver-3A細胞

NCIH1734細胞類似產(chǎn)品：：SUDHL-1細胞、NCI-H1395細胞、SW-403細胞

SJRH-30細胞類似產(chǎn)品：：MC3T3-E1 Subclone 14細胞、746T細胞、SuDHL 4細胞

Hs746T細胞類似產(chǎn)品：：CEMC1細胞、TE-6細胞、U-87細胞

NCI-SNU-C1細胞類似產(chǎn)品：：SH-SY5Y細胞、HeLa S3細胞、PC-9/GR細胞

Hs 821.T細胞類似產(chǎn)品：：RH-35細胞、SK Mel 24細胞、Lilly Laboratories Cell-Porcine Kidney 1細胞

NCI-H1694細胞類似產(chǎn)品：：H1048細胞、OKAC1細胞、NCI-H441細胞

H220細胞類似產(chǎn)品：：H-676細胞、L cells細胞、EL 4細胞

SupT1細胞類似產(chǎn)品：：HB611細胞、HCC1171細胞、H4-IIE-C3細胞

ARPE19細胞類似產(chǎn)品：：Balb/3T3-4-Cl31細胞、U 937細胞、IM 9細胞

PC 61.5.3細胞類似產(chǎn)品：：alpha TC1 clone 6細胞、SK-MEL-MeWo細胞、U-251-MG細胞

KBM-5細胞類似產(chǎn)品：：BPH-1細胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-1細胞、Oregon J-111細胞

COLO-1細胞類似產(chǎn)品：：Hs 766T細胞、OACP4 C細胞、Hs-675-T細胞

RBL-1細胞類似產(chǎn)品：：RBVEC細胞、Hs 604.T細胞、GM00215細胞

H-1792細胞類似產(chǎn)品：：Detroit 562細胞、NTERA-2 clone D1細胞、HuPT3細胞

Baby Hamster Kidney-21細胞類似產(chǎn)品：：UMC-11細胞、SW527細胞、HCC4006細胞

RKO-AS45-1細胞類似產(chǎn)品：：HCC0827細胞、MDA-MB-468-RED細胞、OCI Ly19細胞

P3X63Ag8細胞類似產(chǎn)品：：HEK293A細胞、SCC-7細胞、SNU407細胞

Detroit-562細胞類似產(chǎn)品：：T98細胞、H-35 Reuber細胞、QGP-1細胞

Intestinal Porcine Epithelial Cell line-J2細胞類似產(chǎn)品：：B10BR細胞、C-33A細胞、HuH 6細胞

HPAEC細胞類似產(chǎn)品：：Vero細胞、FBHE細胞、SK-SH-SY5Y細胞

HSC-5 [Human skin squamous cell carcinoma] Cell|人皮膚鱗癌細胞

NCIH3255細胞類似產(chǎn)品：：EAhy 926細胞、A-375細胞、VK2 (E6/E7)細胞

RBE細胞類似產(chǎn)品：：IGROV-1細胞、HEK 293 c18細胞、NS1-Ag4/1細胞

A549/DDP細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H2029細胞、SW 948細胞、COLO320 DM細胞

AML-12細胞類似產(chǎn)品：：HEL 299細胞、H1672細胞、CEF細胞

T HEECs細胞類似產(chǎn)品：：N1E-115細胞、NALM 6細胞、SHG-44細胞

HS-68細胞類似產(chǎn)品：：HCC-1438細胞、CCD-112 CoN細胞、ChaGo-K-1細胞

LIXC-002細胞類似產(chǎn)品：：B4G12細胞、MRC9細胞、M059J細胞

T 24細胞類似產(chǎn)品：：MDA-MB415細胞、ECC 10細胞、SUNE1細胞

H-1869細胞類似產(chǎn)品：：Tb 1-Lu細胞、ES2細胞、EoL-1細胞

MIA Paca2細胞類似產(chǎn)品：：HUT-28細胞、rRTEC細胞、BL2141細胞

HEK293-FT細胞類似產(chǎn)品：：SVEC 4-10細胞、LM2-4175細胞、PL12細胞

CCC-HSF-1細胞類似產(chǎn)品：：McArdle RH-7777細胞、UMNSAH-DF-1細胞、2780細胞

Roswell Park Memorial Institute 8402細胞類似產(chǎn)品：：Centre Antoine Lacassagne-39細胞、NCI-H378細胞、CAL-33細胞

HIT clone T15細胞類似產(chǎn)品：：NL20細胞、SVEC4-10細胞、NW-38細胞

Centre Antoine Lacassagne-62細胞類似產(chǎn)品：：MESSA細胞、IHC-ST1細胞、CEM-CCRF (CAMR)細胞

IOSE80UBC細胞類似產(chǎn)品：：HBL1細胞、SW 962細胞、NCIH2141細胞

UO-31細胞類似產(chǎn)品：：Human Kidney-2細胞、PC2細胞、MC-3T3細胞

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