"EO771 Cell|小鼠髓樣乳腺癌細(xì)胞

細(xì)胞背景資料：惡性乳腺癌；雌性；C５７BL/６

細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣

細(xì)胞接收操作說明：請仔細(xì)閱讀本操作說明及相應(yīng)的細(xì)胞說明書。本公司細(xì)胞發(fā)貨有四種形式：T２５培養(yǎng)瓶(一般是貼壁細(xì)胞使用，懸浮細(xì)胞也可以)、離心管(懸浮細(xì)胞使用多，當(dāng)然，有些公司也會用這種離心管形式發(fā)貼壁細(xì)胞，但是，長期經(jīng)驗來說，貼壁細(xì)胞容易發(fā)生形態(tài)變化，估計是細(xì)胞培養(yǎng)空間狹小，血清不足導(dǎo)致(Zui主要是怕運輸延誤導(dǎo)致這些情況發(fā)生)，個人不建議用離心管形式發(fā)貼壁細(xì)胞)及干冰(凍存細(xì)胞用，主要是冬天天氣冷，溫度低于４℃的地方，都要考慮凍存細(xì)胞)。T２５培養(yǎng)瓶：是用T２５細(xì)胞培養(yǎng)瓶直接發(fā)貨的形式。收到細(xì)胞后，拆開包裝T２５培養(yǎng)瓶的自封袋，不拆封口膜，表面噴７５%酒精消毒后顯微鏡觀察細(xì)胞狀態(tài)(有條件可以拍下此時細(xì)胞照片)。將細(xì)胞放入３７度培養(yǎng)箱平衡兩小時以上，再處理細(xì)胞。首先將T２５中培養(yǎng)基取出裝HAO備用，如細(xì)胞密度GAO于８０%，可以直接消化傳代，相反則加入５-６ml培養(yǎng)基放回培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)即可。離心管：是用１５ml離心管發(fā)貨的形式，只用于懸浮細(xì)胞發(fā)貨。收到細(xì)胞后消毒處理及將細(xì)胞放入３７度培養(yǎng)箱平衡兩小時以上，再處理細(xì)胞。首先將T２５中培養(yǎng)基取出裝HAO備用(如果實驗室沒有T２５培養(yǎng)瓶，可以暫時T７５培養(yǎng)瓶，加入１０-１５ml培養(yǎng)基，建議１０ml培養(yǎng)基，也可以使用T１７５培養(yǎng)瓶，加入５０-６０ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)瓶越大，需要的培養(yǎng)基越多。當(dāng)然如果剛接收到細(xì)胞密度不夠的話，ZuiHAO不用大瓶子，先用小瓶子養(yǎng)起來再換大的，不然會長得很慢，嚴(yán)重的，會導(dǎo)致細(xì)胞死亡等危險)，平衡完成后，離心(１０００rpm，３min)收集細(xì)胞，棄上清，用新的培養(yǎng)基重懸細(xì)胞并接種至培養(yǎng)瓶或皿中，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。干冰：是用本公司凍存液凍存細(xì)胞后，直接用干冰將凍存的細(xì)胞冷凍發(fā)貨的形式。收到細(xì)胞后按照細(xì)胞復(fù)蘇的步驟操作即可。

細(xì)胞生長：貼壁

KU.812細(xì)胞類似產(chǎn)品：：J-774A.1細(xì)胞、Hi-five細(xì)胞、HEK-293-H細(xì)胞

HCC-1599細(xì)胞類似產(chǎn)品：：B/C3T3細(xì)胞、373 MG細(xì)胞、HEK AD293細(xì)胞

HSC5細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SW 900細(xì)胞、Clone 929細(xì)胞、VERO76細(xì)胞

hCMEC/D3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SACC-83細(xì)胞、LNCaP FGC細(xì)胞、P3-X63-Ag 8.653細(xì)胞

Opossum Kidney細(xì)胞類似產(chǎn)品：：DLD 1細(xì)胞、HEK293T/17細(xì)胞、UACC-893細(xì)胞

細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

EO771 Cell|小鼠髓樣乳腺癌細(xì)胞

[細(xì)胞產(chǎn)品包裝]鮮活細(xì)胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細(xì)胞：１ml凍存管(兩支)

在細(xì)胞培養(yǎng)過程中會出現(xiàn)這樣或那樣的問題，客戶遇到的問題從細(xì)胞生長角度來說，針對細(xì)胞培養(yǎng)過程中生長不HAO、甚至死亡的原因，我們做以下分析并提出相對應(yīng)的解決方法。一、培養(yǎng)細(xì)胞生長不HAO》可能原因：細(xì)胞本身的狀態(tài)》1)細(xì)胞傳代次數(shù)多，細(xì)胞老化；2)細(xì)胞的接種量：接種量過低，細(xì)胞生長緩慢；3)細(xì)胞傳代時間過晚：細(xì)胞中毒，影響傳代后的細(xì)胞生長；4)胰酶消化時間過長或過短：時間過長，細(xì)胞死亡；時間過短，細(xì)胞未完全分離而成團(tuán)，細(xì)胞死亡；5)細(xì)胞的凍存與復(fù)蘇：慢凍速融。污染：1)支原體污染；2)霉菌污染；培養(yǎng)基或血清：1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進(jìn)行驗證；2)選擇的培養(yǎng)基是否合適；3)培養(yǎng)基配制是否準(zhǔn)確無誤；培養(yǎng)環(huán)境：1)CO2供應(yīng)是否正常；2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確；解決方法：根據(jù)以上四個方面的可能原因，做出針對性的解決方案》1)注意細(xì)胞的本身狀態(tài)：如傳代次數(shù)、接種量等；2)避免產(chǎn)生污染（用正規(guī)、合法、可溯源的血清）；3)要用合適的血清或培養(yǎng)基，ZuiHAO經(jīng)過驗證；4)注意實驗室的環(huán)境；二、培養(yǎng)細(xì)胞死亡》可能原因：1)培養(yǎng)箱內(nèi)無CO2；2)培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動太大；3)細(xì)胞凍存或復(fù)蘇過程中損傷；4)培養(yǎng)液滲透壓不正確；5)培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積；解決方法：1)檢測培養(yǎng)箱內(nèi)CO2；2)檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度；3)取新的保存細(xì)胞種；4)檢測培養(yǎng)液滲透壓；5)換入新鮮培養(yǎng)液。

MDA PCa 2b細(xì)胞類似產(chǎn)品：：COLO357細(xì)胞、NCI-H78細(xì)胞、HCT/FU細(xì)胞

SRA 01/04細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HN4細(xì)胞、CEM-0細(xì)胞、MC38細(xì)胞

IMR90細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Natural Killer-92細(xì)胞、Line 522細(xì)胞、COLO684細(xì)胞

CORL26細(xì)胞類似產(chǎn)品：：WM-239A細(xì)胞、KMS11細(xì)胞、MDAPC2B細(xì)胞

細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。

細(xì)胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細(xì)胞庫

MDA PCa 2b細(xì)胞類似產(chǎn)品：：COLO357細(xì)胞、NCI-H78細(xì)胞、HCT/FU細(xì)胞

SRA 01/04細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HN4細(xì)胞、CEM-0細(xì)胞、MC38細(xì)胞

IMR90細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Natural Killer-92細(xì)胞、Line 522細(xì)胞、COLO684細(xì)胞

CORL26細(xì)胞類似產(chǎn)品：：WM-239A細(xì)胞、KMS11細(xì)胞、MDAPC2B細(xì)胞

細(xì)胞生長特性：貼壁

細(xì)胞培養(yǎng)中的污染分為兩類，化學(xué)污染和生物污染；生物污染包括比較容易發(fā)現(xiàn)的細(xì)菌、霉菌和酵母的污染，和較難發(fā)現(xiàn)的病毒、支原體和其他細(xì)胞的污染。細(xì)菌、霉菌和酵母到處存在，它們能在合適的環(huán)境中非?？焖俚纳L。這些污染比較容易觀察到，它們往往會使其污染的培養(yǎng)液產(chǎn)生可見的變化，或者通過顯微鏡觀察就可以看見。由于病毒有種屬異性，所以病毒污染的概率比較小。但是病毒污染難于發(fā)現(xiàn)，因為病毒顆粒別微小，一般的實驗室都沒能力檢查細(xì)胞培養(yǎng)中污染的病毒。由于病毒一般潛伏在細(xì)胞內(nèi)，對整個細(xì)胞培養(yǎng)不是致死的，所以它可能會使研究人員長期得到受病毒影響的細(xì)胞的實驗結(jié)果。1956年Robinson及其同事首次發(fā)現(xiàn)細(xì)胞培養(yǎng)中的支原體污染。90年代初的一個調(diào)查發(fā)現(xiàn)，在美國培養(yǎng)的細(xì)胞中，至少有15%被支原體污染。由于支原體沒有細(xì)胞壁，在細(xì)胞培養(yǎng)液中幾乎是透明的，同時對常用于細(xì)胞培養(yǎng)中的抗生素不敏感，不引起pH變化，不使培養(yǎng)液渾濁，所以支原體污染不容易被發(fā)現(xiàn)，但是其存在會影響實驗的結(jié)果。培養(yǎng)多種細(xì)胞時操作不當(dāng)，會導(dǎo)致細(xì)胞的交叉污染。由于不同細(xì)胞的生產(chǎn)速率不同，污染的生長速率快的細(xì)胞終會完全取代被污染的細(xì)胞。

SUM-102細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H-1651細(xì)胞、NRK 49F細(xì)胞、SKN-AS細(xì)胞

HBL1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：U2-OS細(xì)胞、VSMC細(xì)胞、D324細(xì)胞

OCI Ly19細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H-3255細(xì)胞、M-20細(xì)胞、HCC70細(xì)胞

LLC-WRC 256細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HuNS1細(xì)胞、HEEpiC細(xì)胞、MHCC-LM3細(xì)胞

H-211細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SUM 190細(xì)胞、HT1197細(xì)胞、CEM C7細(xì)胞

MHCC 97-H細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NIT-1細(xì)胞、SW-626細(xì)胞、16HBEo-細(xì)胞

GL-261細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Hs-746T細(xì)胞、NCI-H1623細(xì)胞、CCLP-1細(xì)胞

KYSE 180細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H2108細(xì)胞、OVCAR-8細(xì)胞、SBC-3細(xì)胞

SCC 9細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MLE-12細(xì)胞、SK-MEL-24細(xì)胞、GM03671C細(xì)胞

RWPE-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCI-H2073細(xì)胞、EFM192A細(xì)胞、TE3細(xì)胞

EO771 Cell|小鼠髓樣乳腺癌細(xì)胞

NB-4細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCI-HUT-125細(xì)胞、HCC-1438細(xì)胞、HT clone H9細(xì)胞

SW-1353細(xì)胞類似產(chǎn)品：：AZ521細(xì)胞、NCIH146細(xì)胞、C42細(xì)胞

NCI-H146細(xì)胞類似產(chǎn)品：：B16-F10細(xì)胞、HCC1143細(xì)胞、DLD-1細(xì)胞

ME 180細(xì)胞類似產(chǎn)品：：RCM-1 [Human rectum adenocarcinoma]細(xì)胞、RD 2細(xì)胞、IR 983F細(xì)胞

BT325細(xì)胞類似產(chǎn)品：：QGY細(xì)胞、J82細(xì)胞、HuH7細(xì)胞

BNCL-2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CAKI 2細(xì)胞、QGY-7701細(xì)胞、A72細(xì)胞

BNCL-2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CAKI 2細(xì)胞、QGY-7701細(xì)胞、A72細(xì)胞

HuP-T3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SK-CO-1細(xì)胞、SMMC-7721細(xì)胞、HCT-116細(xì)胞

HCC4006細(xì)胞類似產(chǎn)品：：KAT-5細(xì)胞、HCC-94細(xì)胞、H-1184細(xì)胞

EFO-27細(xì)胞類似產(chǎn)品：：PLA-802細(xì)胞、NCIH1092細(xì)胞、PNT1A細(xì)胞

MC3T3-E1(C4)細(xì)胞類似產(chǎn)品：：FHCRC subclone 11細(xì)胞、PC 61.5.3細(xì)胞、P388D1細(xì)胞

Keio University-19-19細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SF539細(xì)胞、RPMI no 8226細(xì)胞、IHH-4細(xì)胞

HCC1143細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Biopsy xenograft of Pancreatic Carcinoma line-3細(xì)胞、NL-20細(xì)胞、MDCK-II細(xì)胞

Centre Antoine Lacassagne-85-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CHP-212細(xì)胞、Caco2BBe細(xì)胞、MDA330細(xì)胞

K562/ADR細(xì)胞類似產(chǎn)品：：LCMS細(xì)胞、PG-4細(xì)胞、HSC-I細(xì)胞

MAEC細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCIH820細(xì)胞、TF1細(xì)胞、RBL細(xì)胞

TCC-PAN2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Suzhou Human Glioma-44細(xì)胞、LMH細(xì)胞、IOSE-Van細(xì)胞

UMR 106細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SW 1990細(xì)胞、BSC1細(xì)胞、PC-3M-IE8細(xì)胞

BHP-10細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SK-Mel 2細(xì)胞、FCCH1018細(xì)胞、OE33細(xì)胞

MB157細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SNU-1細(xì)胞、18G3.cl 1細(xì)胞、SK-ChA-1細(xì)胞

M109細(xì)胞類似產(chǎn)品：：JAR細(xì)胞、RGC5細(xì)胞、Hs895.T細(xì)胞

UM-UC-14細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CF-1 MEF細(xì)胞、GL261細(xì)胞、ZYM-DIEC02細(xì)胞

32D clone 3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：A875細(xì)胞、MDA231-LM2細(xì)胞、N-9細(xì)胞

EO771細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCIH841細(xì)胞、BALB/3T3 cl. A31細(xì)胞、Hs 852.T細(xì)胞

PANC 813細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HCT GEO細(xì)胞、MESSADX5細(xì)胞、PM6細(xì)胞

HDLM2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HT-115細(xì)胞、HIC細(xì)胞、Duke University 4475細(xì)胞

hESC細(xì)胞類似產(chǎn)品：：BCAP37細(xì)胞、TE12細(xì)胞、174xCEM.T2細(xì)胞

TFH細(xì)胞類似產(chǎn)品：：RAW 264.7細(xì)胞、NU-GC-2細(xì)胞、OCILY-10細(xì)胞

Centre Antoine Lacassagne-51細(xì)胞類似產(chǎn)品：：LWnt-3A細(xì)胞、HT 1197.T細(xì)胞、SRA01/04細(xì)胞

EO771 Cell|小鼠髓樣乳腺癌細(xì)胞

Hs27細(xì)胞類似產(chǎn)品：：K299細(xì)胞、OS-732細(xì)胞、HCC-44細(xì)胞

NBL-4細(xì)胞類似產(chǎn)品：：UMRC-2細(xì)胞、Simpson細(xì)胞、NCI-H498細(xì)胞

LI7細(xì)胞類似產(chǎn)品：：BxPC-3細(xì)胞、3T3 J2細(xì)胞、T173細(xì)胞

R1610細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H510細(xì)胞、Murine Thymic Epithelial Cell line 1細(xì)胞、HUT 28細(xì)胞

RK-13細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CALU 1細(xì)胞、Hep II細(xì)胞、MES-23.5細(xì)胞

SupB15WT細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H-1944細(xì)胞、IGROV 1細(xì)胞、ME 180細(xì)胞

MHCC97細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SK N SH細(xì)胞、BPH1細(xì)胞、LN299細(xì)胞

H-2330細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Soleus clone 8細(xì)胞、RL-952細(xì)胞、HEK293FT細(xì)胞

HCA 7細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H-292細(xì)胞、GC1-SPG細(xì)胞、AR4-IP細(xì)胞

N-9細(xì)胞類似產(chǎn)品：：PK15細(xì)胞、MSF細(xì)胞、CG4細(xì)胞

H-2009細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NTera 2細(xì)胞、SJSA-1細(xì)胞、Caco2-BBE細(xì)胞

QGP-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：BALB 3T3 clone A31細(xì)胞、HSC-1細(xì)胞、JB6 Cl 30細(xì)胞

SW 780細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Hs-695-T細(xì)胞、H82sclc細(xì)胞、H-1734細(xì)胞

SKNBE-2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Laboratory of Allergic Diseases 2細(xì)胞、IMCD3細(xì)胞、SCL I細(xì)胞

NCI H747細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NKL細(xì)胞、HeLa-S3細(xì)胞、Colon 26細(xì)胞

COLO 320 HSR細(xì)胞類似產(chǎn)品：：DR2R1610細(xì)胞、E0771細(xì)胞、H-498細(xì)胞

High Five細(xì)胞類似產(chǎn)品：：KLN-205細(xì)胞、SW-48細(xì)胞、D-341細(xì)胞

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