"mIMCD-3 Cell|小鼠腎臟內(nèi)髓集合管3上皮細胞

細胞背景資料：腎；內(nèi)髓集合管；上皮細胞

細胞形態(tài)：上皮細胞樣

傳代培養(yǎng)及其操作步驟：原代細胞培養(yǎng)成功以后，需要進行分離培養(yǎng)，否則細胞會因生存空間不足或密度過大，營養(yǎng)障礙，影響細胞生長。細胞由原培養(yǎng)瓶內(nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細胞允許培養(yǎng)的細胞擴增(形成細胞株)，可以進行細胞克隆，易于保存，但可能喪失一些殊的細胞和分化征。傳代細胞形成細胞株的Zui大利處在于提供了大量持久的實驗材料，便于實驗?！静僮鞑襟E】１)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液；２)向瓶內(nèi)加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜；３)置３７℃孵箱或室溫(２５℃溫度)下進行消化，２~５min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進行觀察，當發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)回縮、細胞間隙增大后，應(yīng)立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶內(nèi)加入Hanks液少量，輕輕轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶，把殘留消化液沖掉，然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液，終止消化；５)使用彎頭吸管，吸取瓶內(nèi)培養(yǎng)液，按順序反復(fù)輕輕吹打瓶壁細胞，使之從瓶壁脫離形成細胞懸液。吹打時動作要輕柔，以防用力過猛損傷細胞；６)用計數(shù)板計數(shù)后，分別接種于新的培養(yǎng)瓶中，置CO２培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)；７)細胞培養(yǎng)換液時間應(yīng)根據(jù)細胞生長的狀態(tài)和實驗要求來確定。一般２～３d后應(yīng)換一次生長液。待細胞鋪滿器皿底面，即可使用；也可繼續(xù)傳代擴大培養(yǎng)或換成維持液?！咀⒁馐马棥浚?掌握HAO細胞消化的時間，消化時間過短時，細胞不宜從瓶壁脫落，過長的消化會導致細胞脫落、損傷；２)掌握HAO消化濃度，當消化液濃度過GAO時，消化時間應(yīng)縮短，過低時細胞消化時間相對延長。

細胞生長：貼壁

Hs-274-T細胞類似產(chǎn)品：：GI-1細胞、HeLa S-3細胞、Pfeiffer細胞

D-324MED細胞類似產(chǎn)品：：SF 539細胞、ROS-17/2.8細胞、LC-1/sq細胞

IPEC1細胞類似產(chǎn)品：：SKNBE2C細胞、TMD8細胞、RASMC細胞

OCI-AML3細胞類似產(chǎn)品：：HCC0078細胞、143TK-細胞、HLEpiC細胞

D324 Med細胞類似產(chǎn)品：：Vero 76細胞、CL1-0細胞、Ls-174-T細胞

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

mIMCD-3 Cell|小鼠腎臟內(nèi)髓集合管3上皮細胞

[細胞產(chǎn)品包裝]鮮活細胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞：１ml凍存管(兩支)

懸浮細胞不容易轉(zhuǎn)染：懸浮細胞是指細胞生長不依賴支持物表面，在培養(yǎng)液中呈懸浮狀態(tài)生長，如淋巴細胞。在實驗室經(jīng)常會遇到懸浮細胞的轉(zhuǎn)染，其和貼壁細胞轉(zhuǎn)染還是有很大不同的。目前大多數(shù)實驗室用的是脂質(zhì)體類的轉(zhuǎn)染試劑，脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染是基于電荷吸引原理，先形成脂質(zhì)體-DNA復(fù)合物，散布在細胞周圍，然后通過細胞的內(nèi)吞作用，將目的基因?qū)爰毎麅?nèi)，而脂質(zhì)體復(fù)合物與貼壁細胞的接觸機會比懸浮細胞GAO出很多倍，所以，脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染時懸浮細胞的轉(zhuǎn)染效率要明顯低于貼壁細胞。其次，脂質(zhì)體試劑的毒性較大，這就使得懸浮細胞的轉(zhuǎn)染更為困難了。另外，懸浮細胞不易培養(yǎng)，易死亡，也給細胞轉(zhuǎn)染造成了一定的困難。為了提GAO懸浮細胞的轉(zhuǎn)染效率，可以使用非脂質(zhì)體的轉(zhuǎn)染試劑，如納米材料的。也可以使用電轉(zhuǎn)染方法，針對懸浮細胞等難轉(zhuǎn)染細胞還是挺不錯的，電擊對細胞有一定的損傷，ZuiHAO選用具有細胞膜修復(fù)功能的電轉(zhuǎn)染試劑，可以將電擊對細胞的傷害降到Zui低，懸浮細胞不易轉(zhuǎn)染，選對試劑及良HAO的細胞培養(yǎng)環(huán)境才是關(guān)鍵。

mRTEC細胞類似產(chǎn)品：：MOLM-14細胞、MES13細胞、LL2細胞

MCF-7/AdrR細胞類似產(chǎn)品：：RPMI no 8226細胞、NCIH28細胞、HBE135-E6E7細胞

HOP 62細胞類似產(chǎn)品：：SNU886細胞、NCI-SNU-16細胞、H-1105細胞

SW-1088細胞類似產(chǎn)品：：CEMO-1細胞、C17細胞、PL45細胞

細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。

細胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫

mRTEC細胞類似產(chǎn)品：：MOLM-14細胞、MES13細胞、LL2細胞

MCF-7/AdrR細胞類似產(chǎn)品：：RPMI no 8226細胞、NCIH28細胞、HBE135-E6E7細胞

HOP 62細胞類似產(chǎn)品：：SNU886細胞、NCI-SNU-16細胞、H-1105細胞

SW-1088細胞類似產(chǎn)品：：CEMO-1細胞、C17細胞、PL45細胞

細胞生長特性：貼壁

細胞系永生化原理介紹：多數(shù)正常細胞的壽命是有限的，能傳20-100代，但有些細胞，尤其是來自嚙齒類或來自多數(shù)腫瘤的細胞，可以產(chǎn)生具有無限壽命的連續(xù)細胞系。嚙齒類動物細胞在分離時核型是正常的，在傳到12代左右以后可能出現(xiàn)危相，多數(shù)細胞在這個階段死亡了，但少數(shù)細胞存活下來，并擁有了更GAO的生長率，成為連續(xù)細胞系。目前認為永生化是一個多步驟的過程，包括一系列細胞周期的調(diào)節(jié)基因(如Rb和p53)失活。目前主要從兩個方向進行操作，病毒基因致永生化和端粒酶誘導的永生化，其原理如下：SV40 LT基因常用于誘導永生化。這個基因的產(chǎn)物-T抗原，可與Rb和p53結(jié)合。這樣不僅使細胞增殖的壽命得以延長，同時也限制了如p53這樣基因的DNA監(jiān)控活性，從而使基因組的不穩(wěn)定性增加，也增加了向永生化發(fā)展的進一步突變的機會(如上調(diào)端粒酶或下調(diào)端粒酶抑制物的活性)。用含可調(diào)節(jié)啟動子的端粒酶基因進行轉(zhuǎn)染，足以形成永生化細胞。這些基因中已被廣泛應(yīng)用的有：EBV用于淋巴母細胞樣細胞；SV40 LT用于黏附細胞，如成纖維細胞(Mayne et al., 1996)、 角質(zhì)形成細胞(Steinberg,1996) 和內(nèi)皮細胞(Punchard et al.,1996)等;而hTERT則用于間充質(zhì)干細胞和其他一些細胞。

MDCK-II細胞類似產(chǎn)品：：C-Lu-65細胞、MN-60細胞、HCC94細胞

BeWo細胞類似產(chǎn)品：：SU-DHL-5細胞、TE-3A細胞、UM-UC-3細胞

HeLa.S3細胞類似產(chǎn)品：：ND7/23細胞、Ocular Choroidal Melanoma-1細胞、BT474細胞

RCC10細胞類似產(chǎn)品：：LAPC4細胞、H2108細胞、P116細胞

Wistar Institute-38細胞類似產(chǎn)品：：PK(15)細胞、WM115細胞、PC 61-5-3細胞

Kasumi-6細胞類似產(chǎn)品：：WEHI-3B細胞、HS578細胞、OVCA 420細胞

SW 626細胞類似產(chǎn)品：：LC-1/sq細胞、HK-2 [Human kidney]細胞、159 PT細胞

OCILY10細胞類似產(chǎn)品：：HLF-a細胞、RSMC細胞、C3H10T1/2 clone8細胞

L428細胞類似產(chǎn)品：：Roswell Park Memorial Institute 2650細胞、MCF-7/AdrR細胞、H82細胞

NCIH2106細胞類似產(chǎn)品：：GM03190細胞、RCF細胞、MN 60細胞

mIMCD-3 Cell|小鼠腎臟內(nèi)髓集合管3上皮細胞

CCLP1細胞類似產(chǎn)品：：HS0578T細胞、P3X63-Ag8.653細胞、F442-A細胞

MRC5細胞類似產(chǎn)品：：SKNBE-1細胞、DSL6A/C1細胞、PCI-4B細胞

Ramos細胞類似產(chǎn)品：：CAL51細胞、PC-9細胞、C32 mel細胞

OCI-LY-18細胞類似產(chǎn)品：：ROS17/2.8細胞、MCA38細胞、HCC-9724細胞

SK-N-F1細胞類似產(chǎn)品：：Hs 274.T細胞、IM-95細胞、SW 1271細胞

NCI-H1568細胞類似產(chǎn)品：：MC26細胞、H2030細胞、D-283 Med細胞

ARO-81細胞類似產(chǎn)品：：CT-26細胞、RCC4細胞、SK-N-BE(1)細胞

P3 88 D1細胞類似產(chǎn)品：：UM-UC-14細胞、SF-539 BT細胞、MES13細胞

ATDC-5細胞類似產(chǎn)品：：KMST-6細胞、OVCAR-3細胞、MBMEC細胞

Hep 3B2_1-7細胞類似產(chǎn)品：：SMMC 7721細胞、QGP 1細胞、HEH2細胞

A101D細胞類似產(chǎn)品：：SNU-C2B細胞、NCI-A549細胞、B6Tert-1細胞

Ls-174-T細胞類似產(chǎn)品：：H87細胞、MC-CAR細胞、RMS13細胞

SUDHL-16細胞類似產(chǎn)品：：F-81細胞、Porcine Kidney-13細胞、NCIH1781細胞

CHP 126細胞類似產(chǎn)品：：H-23細胞、OVCAR.3細胞、Cates-1B細胞

SVGp12細胞類似產(chǎn)品：：H-2066細胞、SW-1573細胞、TE354T細胞

CO115細胞類似產(chǎn)品：：SK.MEL.5細胞、PECAPJ34細胞、MADB-106細胞

KNS-62細胞類似產(chǎn)品：：UMNSAH-DF-1細胞、SK-N-BE(2)細胞、MNNG/HOS細胞

RCC-10細胞類似產(chǎn)品：：SKCO-1細胞、OCI-Ly 18細胞、NCIH1355細胞

HCC-95細胞類似產(chǎn)品：：Kit-225細胞、HDQ-P1細胞、DMS-273細胞

16-HBEo細胞類似產(chǎn)品：：Normal Rat Kidney-49F細胞、OSC-19細胞、NCIH1915細胞

H283細胞類似產(chǎn)品：：U266 Bl細胞、beta TC6細胞、Gerner 7666細胞

Human podocyte細胞類似產(chǎn)品：：L(TK-)細胞、ECC12細胞、Daoy細胞

SKN-AS細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H1238細胞、Glioma-261細胞、Earle's L cells細胞

HCC2279細胞類似產(chǎn)品：：HuCC-T1細胞、NCIH446細胞、LIM-1215細胞

BLO-11細胞類似產(chǎn)品：：3T3-Swiss細胞、MCF 7B細胞、16HBE細胞

Swiss 3T6細胞類似產(chǎn)品：：GM02219D細胞、C3H/10T1/2-clone8細胞、KM-12細胞

MDA231細胞類似產(chǎn)品：：JURKAT E-61細胞、Panc813細胞、KU-812細胞

HepG2細胞類似產(chǎn)品：：Centre Antoine Lacassagne-148細胞、Primary Liver Carcinoma/Poliomyelitis Research Foundation/5細胞、JKT1細胞

LC1細胞類似產(chǎn)品：：PAa細胞、EA. hy 926細胞、AN3 CA細胞

mIMCD-3 Cell|小鼠腎臟內(nèi)髓集合管3上皮細胞

U-87 MG細胞類似產(chǎn)品：：LAC細胞、L-6TG細胞、ST 486細胞

Balb/c 3T3細胞類似產(chǎn)品：：ACCM細胞、NRK細胞、TOV-21G細胞

HT-55細胞類似產(chǎn)品：：BT-474細胞、NS1/1-Ag4.1細胞、HLEB-3細胞

NCI-H1954細胞類似產(chǎn)品：：TE13細胞、HUT-226細胞、PCI:SG-231細胞

NCI-H865細胞類似產(chǎn)品：：SU-DHL-6細胞、AZ-521細胞、SU-DHL-2細胞

IPI-2I細胞類似產(chǎn)品：：KP-N-RT-BM-1細胞、Hs870T細胞、TE-14細胞

CHAGOK1細胞類似產(chǎn)品：：Caov-3細胞、NCIH1417細胞、H322T細胞

WM-2664細胞類似產(chǎn)品：：Mahlavu細胞、SNUC2B細胞、MDCK supertube細胞

RPMI #1846細胞類似產(chǎn)品：：KE37細胞、HSC4細胞、HS578T細胞

LP-1細胞類似產(chǎn)品：：KYSE520細胞、Colon26細胞、HIBEC細胞

P3X63Ag8653細胞類似產(chǎn)品：：A704細胞、CHO cell clone K1細胞、HEC-1B細胞

BEAS-2B細胞類似產(chǎn)品：：PA-1細胞、143TK-細胞、HCC0078細胞

BLO11細胞類似產(chǎn)品：：H508細胞、H522細胞、C918細胞

AZ521細胞類似產(chǎn)品：：3T6 Swiss Albino細胞、X63Ag8-653細胞、Uhth-74細胞

KYSE270細胞類似產(chǎn)品：：2780CP細胞、P3JHR1細胞、BALB/3T3細胞

NCI-H128細胞類似產(chǎn)品：：UO.31細胞、YTMLC-90細胞、GM03573A細胞

AN3-CA細胞類似產(chǎn)品：：UCLA-SO-M20細胞、GM16136細胞、SNK-1細胞

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