"LLC-MK2 Cell|恒河猴腎細(xì)胞

細(xì)胞背景資料：胚胎；腎；自發(fā)永生

細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣

【細(xì)胞培養(yǎng)中支原體、黑蛟蟲、真菌的污染情況總結(jié)】支原體：黑色的，HAO象多為多形，培養(yǎng)液一般培養(yǎng)液一般會(huì)渾濁，原體感染，國(guó)內(nèi)血清很多都沒有做支原體陰性檢測(cè)，而支原體是牛血清中Zui常見的微生物之一。而且它不能用過(guò)濾的辦法除去。支原體感染細(xì)胞以后，細(xì)胞病變不很明顯，只是慢慢死去。用泰樂(lè)菌素，獸用支原體病的藥，但可用于細(xì)胞培養(yǎng)，無(wú)任何不良反應(yīng)。如果作為常用的抗生素的話, 建議用８ug/ml的濃度；黑蛟蟲：可以穿透濾膜，也可以通過(guò)空氣傳播，低倍下為黑色點(diǎn)狀，GAO倍下可看見黑色的小蟲游來(lái)游去，培養(yǎng)液也是不渾的，一般不會(huì)太影響，細(xì)胞還是可以用的。常常是細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良HAO，且觀測(cè)到的運(yùn)動(dòng)物無(wú)明顯增多，且培養(yǎng)液顏色、透明度無(wú)明顯變化，可在同一批號(hào)的血清養(yǎng)的細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)類似現(xiàn)象。對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)不會(huì)有明顯影響，在細(xì)胞增殖旺盛之后會(huì)自然消失，除更換血清外無(wú)須殊處理。建議如果細(xì)胞有可能是此種污染的話，可以增加細(xì)胞的種板密度，以提GAO細(xì)胞的生存率；真菌：一般培養(yǎng)液清亮，不變色，鏡下有絲狀物，有些真菌開始很像死細(xì)胞碎片，只是它很多很多的小塊很清楚，象珊瑚狀，不象細(xì)胞碎片分不清，慢慢的會(huì)長(zhǎng)出很細(xì)的黑色絲狀物。真菌生長(zhǎng)的比較慢，不象細(xì)菌那么容易被發(fā)現(xiàn)，但是一旦發(fā)現(xiàn)有它的存在細(xì)胞就被污染了，也很難救活了。

細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁

8226細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HCT-15細(xì)胞、H-1930細(xì)胞、NCI H295R細(xì)胞

NCI-H2087細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SW962細(xì)胞、SRS-82細(xì)胞、HBZY1細(xì)胞

QGY-7703細(xì)胞類似產(chǎn)品：：FLC7細(xì)胞、LNCaP細(xì)胞、FET細(xì)胞

G361-mel細(xì)胞類似產(chǎn)品：：KBM-5細(xì)胞、SKCol1細(xì)胞、K7M2細(xì)胞

UPCI-SCC-90細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Epstein-Barr-1細(xì)胞、SKRC20細(xì)胞、TK+/- (clone 3.7.2C)細(xì)胞

細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源

LLC-MK2 Cell|恒河猴腎細(xì)胞

[細(xì)胞產(chǎn)品包裝]鮮活細(xì)胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細(xì)胞：１ml凍存管(兩支)

細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)分布不均勻，通常操作步驟：做細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)，細(xì)胞鋪板大概是我們Zui常見的一個(gè)實(shí)驗(yàn)。但有時(shí)候鋪得不是很均勻：要么中間密周圍稀，要么周圍密中間禿。下面為大家分享幾點(diǎn)經(jīng)驗(yàn)。盡量消化細(xì)胞分散成單細(xì)胞懸液。對(duì)于易于消化的細(xì)胞，我一般DPBS清洗一遍，加0.5ml胰酶潤(rùn)洗一遍（25cm2培養(yǎng)瓶或6孔板），棄掉胰酶，37度消化2-3分鐘或室溫消化5min左右，鏡下觀察是否細(xì)胞消化較為分散。如果不夠，延長(zhǎng)消化時(shí)間。96孔板一般以100微升每孔接種，直接用100微升移液器吸取細(xì)胞懸液，沿孔壁（稍離開一點(diǎn)孔底即可，不要離底太GAO）直接接入，移液器不需完全打到Zui大，輕輕按下即可，每鋪完一行換一次槍頭同時(shí)輕輕混勻細(xì)胞懸液。都加完后蓋上蓋子，左手輕輕扶住板的左邊，右手輕輕敲擊板的右邊緣，注意把握力度（我一般輕巧敲三下），太強(qiáng)或次數(shù)太多會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞集中成堆，將板順時(shí)針旋轉(zhuǎn)（逆時(shí)針效果不HAO），依次敲擊剩余三個(gè)邊，靜置約5分鐘，放入37度培養(yǎng)箱。6孔板、12孔板或24孔板，可采用將每個(gè)孔加入少量無(wú)血清培養(yǎng)基，晃動(dòng)浸潤(rùn)整個(gè)孔底，然后用移液槍吸至第二孔，同樣方法浸潤(rùn)孔底，其它孔依此類推，這樣整個(gè)孔底都是濕潤(rùn)的，細(xì)胞懸液會(huì)平鋪在整個(gè)孔底，注意加完細(xì)胞懸液后要放工作臺(tái)靜置一下。這個(gè)方法就是有點(diǎn)慢，但操作熟練了也不慢。也可以采用輕拍的方式，但力度沒有96孔板HAO掌握，效果沒有96孔板HAO。培養(yǎng)瓶里面加HAO細(xì)胞以后(比如傳代HAO/分HAO細(xì)胞以后)，先順時(shí)針搖晃3次，馬上逆時(shí)針搖晃3次。然后延X軸Y軸分別水平搖動(dòng)3次。放入CO2培養(yǎng)箱后,平放著培養(yǎng)瓶重復(fù)延X軸Y軸分別水平搖動(dòng)3次。

OVMANA細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SK-MEL-5細(xì)胞、LIXC-002細(xì)胞、PA317細(xì)胞

TR 146細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SW1222細(xì)胞、SNB19細(xì)胞、KM H-2細(xì)胞

SK-RC-39細(xì)胞類似產(chǎn)品：：PE/CA-PJ34細(xì)胞、BT.549細(xì)胞、COR-L51細(xì)胞

Hs604T細(xì)胞類似產(chǎn)品：：TSCCa細(xì)胞、P3X63細(xì)胞、GA-10 clone 4細(xì)胞

細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。

細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：來(lái)源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細(xì)胞庫(kù)

OVMANA細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SK-MEL-5細(xì)胞、LIXC-002細(xì)胞、PA317細(xì)胞

TR 146細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SW1222細(xì)胞、SNB19細(xì)胞、KM H-2細(xì)胞

SK-RC-39細(xì)胞類似產(chǎn)品：：PE/CA-PJ34細(xì)胞、BT.549細(xì)胞、COR-L51細(xì)胞

Hs604T細(xì)胞類似產(chǎn)品：：TSCCa細(xì)胞、P3X63細(xì)胞、GA-10 clone 4細(xì)胞

細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁

細(xì)胞系永生化原理介紹：多數(shù)正常細(xì)胞的壽命是有限的，能傳20-100代，但有些細(xì)胞，尤其是來(lái)自嚙齒類或來(lái)自多數(shù)腫瘤的細(xì)胞，可以產(chǎn)生具有無(wú)限壽命的連續(xù)細(xì)胞系。嚙齒類動(dòng)物細(xì)胞在分離時(shí)核型是正常的，在傳到12代左右以后可能出現(xiàn)危相，多數(shù)細(xì)胞在這個(gè)階段死亡了，但少數(shù)細(xì)胞存活下來(lái)，并擁有了更GAO的生長(zhǎng)率，成為連續(xù)細(xì)胞系。目前認(rèn)為永生化是一個(gè)多步驟的過(guò)程，包括一系列細(xì)胞周期的調(diào)節(jié)基因(如Rb和p53)失活。目前主要從兩個(gè)方向進(jìn)行操作，病毒基因致永生化和端粒酶誘導(dǎo)的永生化，其原理如下：SV40 LT基因常用于誘導(dǎo)永生化。這個(gè)基因的產(chǎn)物-T抗原，可與Rb和p53結(jié)合。這樣不僅使細(xì)胞增殖的壽命得以延長(zhǎng)，同時(shí)也限制了如p53這樣基因的DNA監(jiān)控活性，從而使基因組的不穩(wěn)定性增加，也增加了向永生化發(fā)展的進(jìn)一步突變的機(jī)會(huì)(如上調(diào)端粒酶或下調(diào)端粒酶抑制物的活性)。用含可調(diào)節(jié)啟動(dòng)子的端粒酶基因進(jìn)行轉(zhuǎn)染，足以形成永生化細(xì)胞。這些基因中已被廣泛應(yīng)用的有：EBV用于淋巴母細(xì)胞樣細(xì)胞；SV40 LT用于黏附細(xì)胞，如成纖維細(xì)胞(Mayne et al., 1996)、 角質(zhì)形成細(xì)胞(Steinberg,1996) 和內(nèi)皮細(xì)胞(Punchard et al.,1996)等;而hTERT則用于間充質(zhì)干細(xì)胞和其他一些細(xì)胞。

UMUC14細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Mono Mac 1細(xì)胞、CT26-clone 25細(xì)胞、MNNG-HOS細(xì)胞

HTR-8細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCI-H2330細(xì)胞、MDA-157細(xì)胞、V 79細(xì)胞

SU-DHL6細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HuT78細(xì)胞、NCI-H661細(xì)胞、IOSE-29細(xì)胞

ADR-RES細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SG231細(xì)胞、B-16細(xì)胞、Hs600T細(xì)胞

alpha TC1 clone 6細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Leukemic 1210細(xì)胞、COLO-320-HSR細(xì)胞、H19-7細(xì)胞

Panc327細(xì)胞類似產(chǎn)品：：KPL-1細(xì)胞、BEL-7402細(xì)胞、COLO-320HSR細(xì)胞

OCI-AML3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HCC0078細(xì)胞、UPCI:SCC90細(xì)胞、P3X63Ag8.653細(xì)胞

M-14細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SW626細(xì)胞、NIH 3T6細(xì)胞、BNL-CL.2細(xì)胞

HFLS-OA細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HFF-1細(xì)胞、L5178-R細(xì)胞、COV 434細(xì)胞

NEC-8細(xì)胞類似產(chǎn)品：：TE-10細(xì)胞、Panc2_03細(xì)胞、KTA7細(xì)胞

LLC-MK2 Cell|恒河猴腎細(xì)胞

RT 112細(xì)胞類似產(chǎn)品：：PLC/PRF5細(xì)胞、H-2291細(xì)胞、KYSE0520細(xì)胞

TE7細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCI-H1417細(xì)胞、CPA 47細(xì)胞、UM-UC-14細(xì)胞

hTERT-RPE1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Hs821T細(xì)胞、STTG1細(xì)胞、DR2R 1610細(xì)胞

MDA-MB-134-VI細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MDA-MB436細(xì)胞、TGW-nu細(xì)胞、RAOEC細(xì)胞

Karpas 422細(xì)胞類似產(chǎn)品：：WC00059細(xì)胞、NS-1細(xì)胞、TC7細(xì)胞

KU-19-19細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MM1.S細(xì)胞、SK-NEP-1細(xì)胞、HT細(xì)胞

AA-Mel細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SW1463細(xì)胞、L 929細(xì)胞、HT-1080細(xì)胞

HFF1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：BNL 1ME A.7R.1細(xì)胞、MB39細(xì)胞、H295R-S1細(xì)胞

FM-88細(xì)胞類似產(chǎn)品：：KM H-2細(xì)胞、MC26細(xì)胞、N1E115細(xì)胞

V 79細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Liver-02細(xì)胞、LS 123細(xì)胞、Microbiological Associates-104細(xì)胞

NE-4C細(xì)胞類似產(chǎn)品：：PK-136細(xì)胞、rRMECs細(xì)胞、NuTu-19細(xì)胞

LAN-5細(xì)胞類似產(chǎn)品：：GA-10細(xì)胞、HCC941122細(xì)胞、HEM-L細(xì)胞

Blotchy fibroblast-11細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Mevo細(xì)胞、OCI-AML-3細(xì)胞、UMC11細(xì)胞

TE1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H-2228細(xì)胞、COLO-320HSR細(xì)胞、Med 341細(xì)胞

KMS18細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NS20-Y細(xì)胞、UCLA NPA-87-1細(xì)胞、JHH-7細(xì)胞

Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：A375SM細(xì)胞、RL-95-2細(xì)胞、IB-RS-2細(xì)胞

D283-MED細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MBVP細(xì)胞、CAL 78細(xì)胞、WM115-mel細(xì)胞

NCI-SNU-520細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SUM-159細(xì)胞、H-2029細(xì)胞、NCIH1770細(xì)胞

Centre Antoine Lacassagne-51細(xì)胞類似產(chǎn)品：：LWnt-3A細(xì)胞、HT 1197.T細(xì)胞、SRA01/04細(xì)胞

FCCH1024細(xì)胞類似產(chǎn)品：：751-NA細(xì)胞、KBM-7細(xì)胞、Emory University-3細(xì)胞

MF2059細(xì)胞類似產(chǎn)品：：WM266mel細(xì)胞、HBL 100細(xì)胞、SU.86細(xì)胞

RM1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCIH208細(xì)胞、RAMSCs細(xì)胞、CFPAC-1細(xì)胞

Ramos.G6.C10細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MC-3T3細(xì)胞、ONS-76細(xì)胞、HUC細(xì)胞

FOXNY細(xì)胞類似產(chǎn)品：：B16/F1細(xì)胞、P815細(xì)胞、251 MG細(xì)胞

SUM149PT細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HCC1954細(xì)胞、hTERT RPE1細(xì)胞、HEK293-F細(xì)胞

K-562細(xì)胞類似產(chǎn)品：：GFP-Olig2細(xì)胞、Colo205細(xì)胞、H3255細(xì)胞

RPMI1846細(xì)胞類似產(chǎn)品：：KYSE50細(xì)胞、RSC-96細(xì)胞、HASMC細(xì)胞

Roswell Park Memorial Institute 2650細(xì)胞類似產(chǎn)品：：LPC-H12細(xì)胞、NCI-H1417細(xì)胞、Duke University 145細(xì)胞

RCC10RGB細(xì)胞類似產(chǎn)品：：PLA801-95C細(xì)胞、Michigan Cancer Foundation-10A細(xì)胞、MIO-M1細(xì)胞

LLC-MK2 Cell|恒河猴腎細(xì)胞

MM134細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H526細(xì)胞、SKOV-433細(xì)胞、KFB細(xì)胞

PL-9細(xì)胞類似產(chǎn)品：：IOSE-29細(xì)胞、NCIH508細(xì)胞、NPC-039細(xì)胞

Hs 870.T細(xì)胞類似產(chǎn)品：：RPVSMC細(xì)胞、MRC5細(xì)胞、KYSE510細(xì)胞

H740細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Neuro2a細(xì)胞、SUM-190細(xì)胞、IOSE80細(xì)胞

SUM 52細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MDA415細(xì)胞、SU86-86細(xì)胞、SKRC-20細(xì)胞

PLB 985細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SHI1細(xì)胞、OEC33細(xì)胞、FRH-0201細(xì)胞

CEK細(xì)胞類似產(chǎn)品：：BEAS 2B細(xì)胞、HS 445T細(xì)胞、Calu-1細(xì)胞

NCIH526細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Panc8.13細(xì)胞、WERI Rb-1細(xì)胞、ATC241細(xì)胞

9L細(xì)胞類似產(chǎn)品：：ZYM-DIEC02細(xì)胞、Homo sapiens No. 578, tumor cells細(xì)胞、HCC1008細(xì)胞

KLN205細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HeLa S 3細(xì)胞、ES-2細(xì)胞、H9c2 (2-1)細(xì)胞

DI-TNC1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SN12CPM6細(xì)胞、Baby Hamster Kidney from litter No. 21細(xì)胞、hEM15A細(xì)胞

LLCPK1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SK-NMC細(xì)胞、B-CPAP細(xì)胞、HBEpiC細(xì)胞

FBHE細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCI-H1781細(xì)胞、A2780/CP細(xì)胞、MHCC97L細(xì)胞

Statens Seruminstitut Rabbit Cornea細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SUDHL4細(xì)胞、HT細(xì)胞、HCEC-B4G12細(xì)胞

OVCAR4細(xì)胞類似產(chǎn)品：：PL45細(xì)胞、Duke University 145細(xì)胞、H-2195細(xì)胞

LM6細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NFS 60細(xì)胞、NCI-H735細(xì)胞、P30-OHKUBO細(xì)胞

Panc02.03細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H2198細(xì)胞、U118MG細(xì)胞、UWB1-289細(xì)胞

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