"NCI-H2227 Cell|人小細胞肺癌細胞

細胞背景資料：詳見相關文獻介紹

細胞形態(tài)：上皮細胞樣

細胞接收操作說明：請仔細閱讀本操作說明及相應的細胞說明書。本公司細胞發(fā)貨有四種形式：T２５培養(yǎng)瓶(一般是貼壁細胞使用，懸浮細胞也可以)、離心管(懸浮細胞使用多，當然，有些公司也會用這種離心管形式發(fā)貼壁細胞，但是，長期經驗來說，貼壁細胞容易發(fā)生形態(tài)變化，估計是細胞培養(yǎng)空間狹小，血清不足導致(Zui主要是怕運輸延誤導致這些情況發(fā)生)，個人不建議用離心管形式發(fā)貼壁細胞)及干冰(凍存細胞用，主要是冬天天氣冷，溫度低于４℃的地方，都要考慮凍存細胞)。T２５培養(yǎng)瓶：是用T２５細胞培養(yǎng)瓶直接發(fā)貨的形式。收到細胞后，拆開包裝T２５培養(yǎng)瓶的自封袋，不拆封口膜，表面噴７５%酒精消毒后顯微鏡觀察細胞狀態(tài)(有條件可以拍下此時細胞照片)。將細胞放入３７度培養(yǎng)箱平衡兩小時以上，再處理細胞。首先將T２５中培養(yǎng)基取出裝HAO備用，如細胞密度GAO于８０%，可以直接消化傳代，相反則加入５-６ml培養(yǎng)基放回培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)即可。離心管：是用１５ml離心管發(fā)貨的形式，只用于懸浮細胞發(fā)貨。收到細胞后消毒處理及將細胞放入３７度培養(yǎng)箱平衡兩小時以上，再處理細胞。首先將T２５中培養(yǎng)基取出裝HAO備用(如果實驗室沒有T２５培養(yǎng)瓶，可以暫時T７５培養(yǎng)瓶，加入１０-１５ml培養(yǎng)基，建議１０ml培養(yǎng)基，也可以使用T１７５培養(yǎng)瓶，加入５０-６０ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)瓶越大，需要的培養(yǎng)基越多。當然如果剛接收到細胞密度不夠的話，ZuiHAO不用大瓶子，先用小瓶子養(yǎng)起來再換大的，不然會長得很慢，嚴重的，會導致細胞死亡等危險)，平衡完成后，離心(１０００rpm，３min)收集細胞，棄上清，用新的培養(yǎng)基重懸細胞并接種至培養(yǎng)瓶或皿中，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。干冰：是用本公司凍存液凍存細胞后，直接用干冰將凍存的細胞冷凍發(fā)貨的形式。收到細胞后按照細胞復蘇的步驟操作即可。

細胞生長：貼壁

HCC-78細胞類似產品：：H358細胞、RPMC細胞、L-Wnt-3A細胞

RPMI 7951細胞類似產品：：X63.Ag8.653細胞、H-1876細胞、MDAMB-231細胞

HELA-GFP細胞類似產品：：251MG細胞、H-820細胞、YD38細胞

HRPEpiC細胞類似產品：：HDQ-P1細胞、WERI細胞、JG細胞

Dami細胞類似產品：：VeroC1008細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-436細胞、LED-WiDr細胞

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

NCI-H2227 Cell|人小細胞肺癌細胞

[細胞產品包裝]鮮活細胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞：１ml凍存管(兩支)

細胞培養(yǎng)時分布不均勻，通常操作步驟：做細胞生物學實驗，細胞鋪板大概是我們Zui常見的一個實驗。但有時候鋪得不是很均勻：要么中間密周圍稀，要么周圍密中間禿。下面為大家分享幾點經驗。盡量消化細胞分散成單細胞懸液。對于易于消化的細胞，我一般DPBS清洗一遍，加0.5ml胰酶潤洗一遍（25cm2培養(yǎng)瓶或6孔板），棄掉胰酶，37度消化2-3分鐘或室溫消化5min左右，鏡下觀察是否細胞消化較為分散。如果不夠，延長消化時間。96孔板一般以100微升每孔接種，直接用100微升移液器吸取細胞懸液，沿孔壁（稍離開一點孔底即可，不要離底太GAO）直接接入，移液器不需完全打到Zui大，輕輕按下即可，每鋪完一行換一次槍頭同時輕輕混勻細胞懸液。都加完后蓋上蓋子，左手輕輕扶住板的左邊，右手輕輕敲擊板的右邊緣，注意把握力度（我一般輕巧敲三下），太強或次數(shù)太多會導致細胞集中成堆，將板順時針旋轉（逆時針效果不HAO），依次敲擊剩余三個邊，靜置約5分鐘，放入37度培養(yǎng)箱。6孔板、12孔板或24孔板，可采用將每個孔加入少量無血清培養(yǎng)基，晃動浸潤整個孔底，然后用移液槍吸至第二孔，同樣方法浸潤孔底，其它孔依此類推，這樣整個孔底都是濕潤的，細胞懸液會平鋪在整個孔底，注意加完細胞懸液后要放工作臺靜置一下。這個方法就是有點慢，但操作熟練了也不慢。也可以采用輕拍的方式，但力度沒有96孔板HAO掌握，效果沒有96孔板HAO。培養(yǎng)瓶里面加HAO細胞以后(比如傳代HAO/分HAO細胞以后)，先順時針搖晃3次，馬上逆時針搖晃3次。然后延X軸Y軸分別水平搖動3次。放入CO2培養(yǎng)箱后,平放著培養(yǎng)瓶重復延X軸Y軸分別水平搖動3次。

Vero C1008細胞類似產品：：COLO 206F細胞、SU 86.86細胞、TW01細胞

M109細胞類似產品：：JAR細胞、RGC5細胞、Hs895.T細胞

OCILY-3細胞類似產品：：Hs 888Lu細胞、Walker/LLC-WRC256細胞、P3X63 Ag8.653細胞

COLO320-DM細胞類似產品：：HuO9細胞、RBMEC細胞、Cloudman S91 melanoma clone M-3細胞

細胞傳代方法：１：２-１：４傳代；每周換液２次。

細胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫

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細胞生長特性：該細胞既有懸浮生長，又有貼壁生長

細胞系永生化原理介紹：多數(shù)正常細胞的壽命是有限的，能傳20-100代，但有些細胞，尤其是來自嚙齒類或來自多數(shù)腫瘤的細胞，可以產生具有無限壽命的連續(xù)細胞系。嚙齒類動物細胞在分離時核型是正常的，在傳到12代左右以后可能出現(xiàn)危相，多數(shù)細胞在這個階段死亡了，但少數(shù)細胞存活下來，并擁有了更GAO的生長率，成為連續(xù)細胞系。目前認為永生化是一個多步驟的過程，包括一系列細胞周期的調節(jié)基因(如Rb和p53)失活。目前主要從兩個方向進行操作，病毒基因致永生化和端粒酶誘導的永生化，其原理如下：SV40 LT基因常用于誘導永生化。這個基因的產物-T抗原，可與Rb和p53結合。這樣不僅使細胞增殖的壽命得以延長，同時也限制了如p53這樣基因的DNA監(jiān)控活性，從而使基因組的不穩(wěn)定性增加，也增加了向永生化發(fā)展的進一步突變的機會(如上調端粒酶或下調端粒酶抑制物的活性)。用含可調節(jié)啟動子的端粒酶基因進行轉染，足以形成永生化細胞。這些基因中已被廣泛應用的有：EBV用于淋巴母細胞樣細胞；SV40 LT用于黏附細胞，如成纖維細胞(Mayne et al., 1996)、 角質形成細胞(Steinberg,1996) 和內皮細胞(Punchard et al.,1996)等;而hTERT則用于間充質干細胞和其他一些細胞。

BT20細胞類似產品：：OV-90細胞、MDAMB361細胞、PANC-04-03細胞

D-341 Med細胞類似產品：：OVCAR8/ADR細胞、EOC-20細胞、HuCC-T1細胞

LA-N-6細胞類似產品：：NCIH1781細胞、HLEC-SRA 01/04細胞、KLN 205細胞

COLO829細胞類似產品：：HS-695T細胞、L-02細胞、H341細胞

Sci-1細胞類似產品：：Anip-973細胞、EC-9706細胞、ECC 10細胞

NCIH727細胞類似產品：：NCI-N87細胞、TN5B14細胞、SW1573細胞

P3/X63-Ag8細胞類似產品：：MHCC 97細胞、MOVAS細胞、HCC-366細胞

NCI-H322細胞類似產品：：CEM-T4細胞、MCA205細胞、BT 20細胞

WI 38細胞類似產品：：GM-346細胞、MOLT-4細胞、Okayama University Medical School-27細胞

RH7777細胞類似產品：：KALS-1細胞、HCC-827細胞、NCI-128細胞

NCI-H2227 Cell|人小細胞肺癌細胞

SK ES 01細胞類似產品：：MKN45細胞、PSN-1細胞、NCI-H1385細胞

CA-OV-3細胞類似產品：：HIT T15細胞、VK2 (E6/E7)細胞、L6565細胞

HCC 2185細胞類似產品：：H-1930細胞、P3X63Ag8-6-5-3細胞、N2a細胞

SCC-25細胞類似產品：：ZR75-1細胞、HUT 28細胞、RPMI #1846細胞

COLO-679細胞類似產品：：TE-6細胞、H283細胞、3T3-442A細胞

EB-2細胞類似產品：：Rainbow Trout Embryo細胞、U251n細胞、CHO-S細胞

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LLC-PK(1)細胞類似產品：：Murine Leydig Tumor Cell line-1細胞、mRTEC細胞、HLMVEC細胞

H-460細胞類似產品：：GLC-82細胞、RT-4細胞、B16F0細胞

MD Anderson-Metastatic Breast-361細胞類似產品：：OCILY10細胞、RCC23細胞、CRFK細胞

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Adeno 293細胞類似產品：：COLO-824細胞、Hep-G2/C3A細胞、HCAEC細胞

Fetal Human Lens-124細胞類似產品：：bEnd.3[BEND3]細胞、A375-S2細胞、A-431細胞

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GP5d細胞類似產品：：SKES-1細胞、OCI-AML2細胞、Vero細胞

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OSRC2細胞類似產品：：GL261細胞、Hep 3B2.1-7細胞、CA-OV-3細胞

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Porcine Kidney-15細胞類似產品：：PLA801C細胞、LS-1034細胞、8305C_1細胞

NCI-H2227 Cell|人小細胞肺癌細胞

WEHI-279細胞類似產品：：P31FUJ細胞、LICCF細胞、PC14細胞

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MSF細胞類似產品：：H2227細胞、U87-MG細胞、Panc 10.05細胞

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MNNG-HOS (TE 85, clone F-5)細胞類似產品：：SHP-77細胞、JF305細胞、SKMEL28細胞

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CEMO-1細胞類似產品：：HCC-1395細胞、MADB 106細胞、NUGC-3細胞

C2-C12細胞類似產品：：AQ-Mel細胞、WEHI3細胞、KYSE-450細胞

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B-CPAP細胞類似產品：：MuM-2C細胞、SW 527細胞、KYSE 30細胞

578T細胞類似產品：：ME1細胞、MES 23.5細胞、HT 29細胞

KYSE 150 KYSE150 Kyse150 KY150

細胞類似產品：：NCIH1299細胞、SUP-B15細胞、C6細胞

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