蛋白質(zhì)測(cè)定儀測(cè)定中鐵輕化加濃度對(duì)精度影響
流速的選擇化學(xué)發(fā)光流動(dòng)注射體系中，流速太慢會(huì)導(dǎo)致發(fā)光信號(hào)出現(xiàn)在進(jìn)入流通池之前；流速太快會(huì)導(dǎo)致發(fā)光信號(hào)出現(xiàn)在進(jìn)入流通池之后，都不能被光電倍增管完全檢測(cè)。蛋白質(zhì)含量的測(cè)定可以使用蛋白質(zhì)測(cè)定儀進(jìn)行快速的測(cè)定分析。
選擇載流、試樣的流速為5.0mL?min-1，魯米諾與鐵輕化加的流速為4.0mL?min-1。魯米諾濃度的選擇在卵清白蛋白-魯米諾-鐵輕化加和牛血清白蛋白-魯米諾-鐵輕化加兩體系中，當(dāng)魯米諾的濃度在2.0×10-6~8.0×10-5mol?L-1范圍，隨著濃度的增加，兩體系的相對(duì)發(fā)光強(qiáng)度也增大，但當(dāng)魯米諾濃度超過(guò)5.0×10-5mol?L-1時(shí)，相對(duì)發(fā)光強(qiáng)度均降低。魯米諾濃度為5.0×10-5mol?L-1時(shí)，峰形好，信噪比(S/N=3)。選擇魯米諾濃度為5.0×10-5mol?L-1。使用自動(dòng)定氮儀分析發(fā)下鐵輕化加濃度的選擇試驗(yàn)結(jié)果表明：鐵輕化加濃度為6.0×10-4mol?L-1時(shí)相對(duì)發(fā)光強(qiáng)度達(dá)到；隨后鐵輕化加濃度繼續(xù)增大，蛋白質(zhì)發(fā)光體系的相對(duì)發(fā)光強(qiáng)度反而降低。試劑pH值的選擇試驗(yàn)結(jié)果表明：鐵輕化加與魯米諾的酸度對(duì)發(fā)光體系的相對(duì)發(fā)光強(qiáng)度都有明顯的影響，在pH為12.0和pH為12.2時(shí)，卵清白蛋白和牛血清白蛋白的發(fā)光強(qiáng)度和信噪比(S/N=3)達(dá)到。試樣pH值的選擇試驗(yàn)結(jié)果表明：卵清白蛋白和牛血清白蛋白在pH9.0~12.2，pH9.0~12.5范圍內(nèi)，體系的相對(duì)發(fā)光強(qiáng)度隨著試樣溶液的pH值升高而增大；隨后試樣的pH增大相對(duì)發(fā)光強(qiáng)度反而降低，而且噪音增大峰形變差。選擇試樣溶液的pH分別為12.2和12.5。增敏劑的選擇試驗(yàn)結(jié)果表明：聚乙二醇辛基苯基醚的加入使反應(yīng)的相對(duì)發(fā)光強(qiáng)度降低；溴化鉀和β-環(huán)糊精能明顯增強(qiáng)魯米諾-鐵輕化加體系相對(duì)發(fā)光強(qiáng)度，但對(duì)蛋白質(zhì)-魯米諾-鐵輕化加無(wú)協(xié)同增強(qiáng)作用；十二烷基磺酸鈉、三氯甲烷、乙醇、甲醇、乙腈等均未顯示出明顯的協(xié)同催化效果，溴化十六烷基三甲基胺對(duì)該體系的發(fā)光具有明顯增強(qiáng)作用。試驗(yàn)選擇5.0×10-5mol?L-1溴化十六烷基三甲基胺溶液。
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